一种基于缺氧诱导模型的氯化钴添加方法技术

本发明专利技术涉及生物医药技术领域，尤其涉及一种基于缺氧诱导模型的氯化钴添加方法。包括，步骤S1，溶液制备；步骤S2，细胞处理；步骤S3，环境模拟；步骤S4，添加氯化钴；步骤S5，添加影响因子；步骤S6，生成模型。本发明专利技术通过将细胞放置在低氧工作站中，以模拟低氧环境，通过将细胞培养基的pH值调整到6.8，以模拟组织缺氧时的微酸性环境，通过将氯化钴的添加与炎症因子的添加相关联，有效模拟缺氧环境的前提下，优化氯化钴的添加，以充分反映临床环境中的真实的缺氧机制，通过验证不同浓度的氯化钴对AC16心肌细胞缺氧诱导效果的影响，成功模拟了缺氧环境下的复杂生理反应，优化了氯化钴的浓度与添加时间。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及生物医药，尤其涉及一种基于缺氧诱导模型的氯化钴添加方法。

技术介绍

1、缺氧诱导模型的建立，目前主要有两种方式：物理缺氧模型和化学缺氧模型。细胞内缺氧诱导因子-1α（hif-1α）基因的表达增强是细胞缺氧最重要的表现之一，在某种意义上，hif-1α的表达程度可以反映细胞的缺氧程度，物理缺氧模型需要专业的设备和器械，费用高昂，主要通过精确控制纯氮、纯氧和二氧化碳的比例而构建，从而与体内细胞缺氧的生理状况相接近；化学缺氧模型不需要特殊的设备，利用在正常o2条件下，金属离子co2+和ni2+通过细胞内的离子置换作用达到模拟细胞缺氧的目的。但是，化学缺氧模型与体内缺氧的生理情况有一定差异，比较粗糙地评价细胞缺氧的程度，无法建立与物理缺氧相一致的比较方法；氯化钴（cobalt chloride，cocl2）是由钴和氯组成的无机化合物，可引起类似缺血缺氧的病理环境，是制造低氧模型的一种经典方法，其可以使组织细胞内氧自由基过度生成，抗氧化应激的能力下降，诱发氧化应激损伤细胞；同时，由于氯化钴价格低廉，毒性较低，因而目前多数体外缺氧实验中以氯化钴构建相应的化本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种基于缺氧诱导模型的氯化钴添加方法，其特征在于，包括，

2.根据权利要求1所述的基于缺氧诱导模型的氯化钴添加方法，其特征在于，向各所述模拟细胞培养基中添加预设配比的炎症因子，以预设采集间隔分别获取各模拟细胞培养基中的应激蛋白的含量，分别绘制应激蛋白的含量随时间的变化曲线，生成各应激蛋白含量变化曲线，获取所述各应激蛋白含量变化曲线对应的峰值，按照氯化钴的添加量由低到高的顺序计算两个模拟细胞培养基中对应的应激蛋白含量的差值，记作各实时蛋白含量差值，根据标准蛋白含量差值分别对各实时蛋白含量差值进行判定，

3.根据权利要求2所述的基于缺氧诱导模型的氯化钴添加方法，其...

【技术特征摘要】

1.一种基于缺氧诱导模型的氯化钴添加方法，其特征在于，包括，

2.根据权利要求1所述的基于缺氧诱导模型的氯化钴添加方法，其特征在于，向各所述模拟细胞培养基中添加预设配比的炎症因子，以预设采集间隔分别获取各模拟细胞培养基中的应激蛋白的含量，分别绘制应激蛋白的含量随时间的变化曲线，生成各应激蛋白含量变化曲线，获取所述各应激蛋白含量变化曲线对应的峰值，按照氯化钴的添加量由低到高的顺序计算两个模拟细胞培养基中对应的应激蛋白含量的差值，记作各实时蛋白含量差值，根据标准蛋白含量差值分别对各实时蛋白含量差值进行判定，

3.根据权利要求2所述的基于缺氧诱导模型的氯化钴添加方法，其特征在于，在判定存在实时蛋白含量差值大于标准蛋白含量差值时，以预设采集间隔获取第三初始浓度的氯化钴溶液对应的培养基中的细胞培养数目，计算预设采集间隔的实时增殖速率，计算预设采集时长的平均增殖速率，以预设采集时长绘制平均增殖速率随时间的变化曲线，并进行线性拟合，得到平均增殖速率拟合曲线，将该平均增殖速率拟合曲线的最大斜率作为实时增殖速率。

4.根据权利要求3所述的基于缺氧诱导模型的氯化钴添加方法，其特征在于，绘制实时增殖速率随时间的变化...

【专利技术属性】
技术研发人员：朱海燕，黄晶晶，潘博，
申请(专利权)人：中国人民解放军总医院第一医学中心，
类型：发明
国别省市：