基于免疫细胞膜的靶向药物递送纳米微球及其制备方法与应用技术

本发明专利技术公开了一种基于免疫细胞膜的靶向药物递送纳米微球及其制备方法与应用，基于免疫细胞膜的靶向药物递送纳米微球包括免疫细胞膜

【技术实现步骤摘要】
基于免疫细胞膜的靶向药物递送纳米微球及其制备方法与应用


[0001]本专利技术属于生物医学材料
，具体地说，涉及一种基于免疫细胞膜的靶向药物递送纳米微球及其制备方法与应用
。

技术介绍

[0002]强直性脊柱炎
(Ankylosing spondylitis
，简称
AS)
是一种主要侵犯脊柱，并累及骶髂关节和外周关节
(
如中轴关节
、
四肢关节等
)
的慢性进行性炎性疾病，强直性脊柱炎的病因目前尚未完全明确，但近年来研究结果表明促炎与抑炎的失衡在
AS
的发生
、
发展中起到重要作用，人体中辅助性
T
细胞
17(Thelper cell 17,Th17)
与调节性
T
细胞
(Regulatory cell
，简称
Treg)
可能来源于同一前体细胞，在分化方向的选择上存在互相竞争的关系，而两种细胞的功能及分泌的炎性因子也存在相互拮抗的作用，越来越多的研究显示，
AS
患者体内的
Treg
分化比例降低，且分化后的
Treg
免疫调节功能也存在异常，导致了炎症的发展
。
目前，强直性脊柱炎多通过服用非甾体类抗炎药进行治疗，但是常见的药物存在靶向性和缓释性较差的缺点，导致治疗效果不佳
。
[0003]新型的基于生物膜材料的载药纳米微球在药物的缓控释体系中得到了新的应用，其中应用较为广泛的有：以外泌体
(Exosome)
为代表的基于细胞膜的天然胞外囊泡
(Extracellular vesicles,EVs)、
利用细胞膜加工过后的载药纳米微球，近年来，上述两种基于生物膜材料的载药纳米微球在肿瘤治疗
(T.Kang,Q.Q.Zhu,D.Wei,J.X.Feng,J.H.Yao,T.Z.Jiang,Q.X.Song,X.B.Wei,H.Z.Chen,X.L.Gao,J.Chen,Nanoparticles Coated with Neutrophil Membranes Can Effectively Treat Cancer Metastasis,Acs Nano 11(2)(2017)1397
‑
1411.)
以及免疫治疗
(G.Dou,R.Tian,X.M.Liu,P.Y.Yuan,Q.W.Ye,J.Liu,S.Y.Liu,J.Zhou,Z.H.Deng,X.Chen,S.Y.Liu,Y.Jin,Chimeric apoptotic bodies functionalized with natural membrane and modular delivery system for inflammation modulation,Sci Adv 6(30)(2020).)
中均发挥了重要作用，已成为靶向药物递送领域的研究热点
。
[0004]两种基于生物膜材料的载药纳米微球中细胞膜的来源一般为免疫细胞，而免疫细胞涵盖的种类繁多，如
T
细胞
、
中性粒细胞及巨噬细胞等，其中，在生物膜载药纳米微球材料中应用最为广泛的为嗜中性粒细胞
(
或中性粒细胞，
neutrophil)
，由该类细胞制备得到的纳米微球载药系统在新型的癌症及肿瘤治疗
(F.Oroojalian,M.Beygi,B.Baradaran,A.Mokhtarzadeh,M.Shahbazis.Immune Cell Membrane
‑
Coated Biomimetic Nanoparticles for Targeted Cancer Therapy,Small 2006282.)、
心血管疾病治疗
(L.Feng,C.Dou,Y.Xia,B.Li,M.Zhao,P.Yu,Y.Zheng,A.El
‑
Toni,N.Atta,A.Galal,Y.Cheng,X.Cai,Y.Wang,F.Zhang.Neutrophil
‑
like Cell
‑
Membrane
‑
Coated Nanozyme Therapy for Ischemic Brain Damage and Long
‑
Term Neurological Functional Recovery,ACS Nano 15(2021)2263
‑
2280.)
以及肝脏肿瘤疾病引起的炎症治疗
(K.Wang,
Y.Lei,D.Xia,P.Xu,T.Zhu,Z.Jiang,Y.Ma.Neutrophil membranes coated,antibiotic agent loaded nanoparticles targeting to the lung inflammation,Colloids Surf B Biointerfaces 188(2020)110755.)
中均可发挥作用
。
另有研究表明，由中性粒细胞膜包被的纳米微球
(
聚乳酸
‑
羟基乙酸共聚物，
poly(lactic
‑
co
‑
glycolic acid)
，简称
PLGA)
可有效保留免疫细胞膜表面的抗原决定簇
(antigenic exterior)
，从而可保持免疫细胞的免疫原性
(Q.Zhang,D.Dehaini,Y.Zhang,J.Zhou,X.Chen,L.Zhang,R.H.Fang,W.Gao,L.Zhang.Neutrophil membrane
‑
coated nanoparticles inhibit synovial inflammation and alleviate joint damage in inflammatory arthritis,Nature Nanotechnology 13(2018)1182
‑
1190.)
，进而可在骨关节炎治疗中发挥靶向递送功能
。
[0005]但是目前尚未见利用此类纳米微球载药系统包埋具有治疗作用的生物活性分子及药物对关节炎症以及其它骨骼肌系统的炎症治疗的相关研究，缺乏具有靶向骨骼肌炎症疾病等的治疗作用的新的靶点
。
[0006]有鉴于此，提供一种新的可实现对脊柱炎症部位进行精准治疗的载药系统成为当前亟待解决的技术问题
。

技术实现思路

[0007]为此，本专利技术所要解决的技术问题在于传统用于治疗脊柱炎症尤其是强直性脊柱炎的药物靶向性本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.
一种基于免疫细胞膜的靶向药物递送纳米微球，其特征在于，包括免疫细胞膜
、PLGA
纳米微球和药物分子，所述药物分子包埋于所述
PLGA
纳米微球内，所述免疫细胞膜通过超声法或挤出法包覆于所述
PLGA
纳米微球外部，其中，药物分子为大分子蛋白药物或疏水性小分子药物；所述免疫细胞膜
、PLGA
纳米微球的质量比为
1:1
～
2:1
，
PLGA
纳米微球与大分子蛋白药物的质量比为
1800:1
～
9000:1
，
PLGA
纳米微球与疏水性小分子药物的质量比为
60:1
～
200:1。2.
根据权利要求1所述的基于免疫细胞膜的靶向药物递送纳米微球，其特征在于，所述免疫细胞膜由外周血液分离的人源免疫细胞提取得到，所述免疫细胞为
T
细胞或中性粒细胞；所述大分子蛋白药物为组蛋白琥珀酰化酶
GCN5
，所述疏水性小分子药物为小分子抑制剂
CPYPP
或西维来司钠
。3.
根据权利要求2所述的基于免疫细胞膜的靶向药物递送纳米微球，其特征在于，所述
PLGA
纳米微球的平均粒径为
200
‑
400nm。4.
一种制备如权利要求1‑3任一项所述的基于免疫细胞膜的靶向药物递送纳米微球的方法，其特征在于，包括如下步骤：
S1、
提取免疫细胞膜，所述免疫细胞膜由外周血液分离的人源免疫细胞提取得到，步骤为：将人外周血淋巴细胞分离液与血液按照
1:1
的比例分层混合，在
700g
下离心
30min
；离心后得到由上至下依次是稀释血浆
、
单个核细胞
、
分离液
、
红细胞及粒细胞的分层溶液；吸出所需细胞层加入
PBS
在
650g
下离心
5min
，并用
PBS
洗涤两次；加入适量红细胞裂解液在
600g
下离心
5min
，去除红细胞，得到中性粒细胞或
T
细胞；将细胞团浸泡于缓冲液中，使细胞核
、
细胞质渗透至细胞膜外，利用分层高速离心法将其除去，全程利用冰浴保持细胞膜的活性，之后破碎所述细胞膜以备用；
S2、
制备包埋药物分子的
PLGA
纳米微球，采用单乳化法或双乳化法将药物分子包埋于所述
PLGA
纳米微球中...

【专利技术属性】
技术研发人员：朱美灵，王翰，杨娜，沈双伟，张梦瑶，
申请(专利权)人：中山大学附属第八医院深圳福田，
类型：发明
国别省市：