一种用于生产重组细小病毒的组合物及应用制造技术

本发明专利技术公开了一种用于生产重组细小病毒的组合物及应用

【技术实现步骤摘要】
113897396 A
公开的一种在昆虫细胞生产
AAV
的方法中，专利技术人通过构建含有内含子调控序列的
Rep
表达盒实现了在同一阅读框的
Rep78
和
Rep52
蛋白的表达，不仅提高了在昆虫细胞中生产
rAAV
载体的稳定性，而且，通过调整内含子剪接效率灵活调节
Rep52/Rep78
蛋白相对含量
。
[0007]在上述技术方案中，
Rep78/52
和
VP1/2/3
蛋白使用单一类型的启动子转录，使得它们仅在感染的特定时期翻译表达
。
例如，
Urabe
等人使用
deltaIE1
启动子驱动
Rep78
蛋白的转录，
deltaIE1
启动子虽然在感染早期表现出较高的活性，但在感染晚期活性较低，
Rep78
蛋白在晚期的低表达可能不利于
rAAV
的包装；中国专利
CN103849629A
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【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.
一种用于生产重组细小病毒的组合物，其特征在于，包括：用于翻译产生细小病毒
Rep
蛋白的第一表达盒；用于翻译产生细小病毒
Cap
蛋白的第二表达盒；以及，转基因序列和转基因序列两端的
AAV
反向末端重复序列；所述第一表达盒包括用于翻译产生细小病毒
Rep
蛋白的重叠开放阅读框，以及在感染早期至晚期持续驱动所述
Rep
蛋白的表达的第一启动子
。2.
如权利要求1所述的组合物，其特征在于，所述第一表达盒包括用于编码细小病毒
Rep78
蛋白和
/
或
Rep68
蛋白的核苷酸序列，还包括用于编码细小病毒
Rep52
蛋白和
/
或
Rep40
蛋白的核苷酸序列
。3.
如权利要求1所述的组合物，其特征在于，所述第二表达盒包含用于编码细小病毒
VP1
和
VP2/3
衣壳蛋白的核苷酸序列
。4.
如权利要求1所述的组合物，其特征在于，所述第一...

【专利技术属性】
技术研发人员：请求不公布姓名，请求不公布姓名，请求不公布姓名，请求不公布姓名，请求不公布姓名，请求不公布姓名，请求不公布姓名，
申请(专利权)人：劲帆生物医药科技武汉有限公司，
类型：发明
国别省市：