一种用于在宿主细胞中表达目的基因的双AAV载体系统技术方案

本申请公开了一种用于在宿主细胞中表达目的基因的双AAV载体系统，包括第一载体和第二载体，其中：第一载体从5’端至3’端依次包括：5’端反向末端重复序列、启动子序列、目的基因序列的5’端、内含子第一序列、核酶第一序列、多聚腺苷酸转录终止序列以及3’端反向末端重复序列；第二载体从5’端至3’端依次包括：5’端反向末端重复序列、启动子序列、核酶第二序列、内含子第二序列、目的基因序列的3’端、多聚腺苷酸转录终止序列以及3’端反向末端重复序列。本申请提供的双AAV载体系统通过核酶的反式剪接作用定向将内含子的两个mRNA分子连接，产物的异质化程度会更低，能够更加高效的产生全长目的蛋白。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于基因工程领域，更具体地，涉及一种用于在宿主细胞中表达目的基因的双aav载体系统。

技术介绍

1、腺相关病毒(adeno-associated virus，aav)，也称腺伴随病毒，属于微小病毒科依赖病毒属，是目前发现的一类结构最简单的单链dna缺陷型病毒，需要辅助病毒(通常为腺病毒)参与复制。aav的基因组是一条单链线性dna，约4700bp，包括上下游两个开放阅读框(orf)：rep和cap，位于分别由145个核苷酸组成的2个t形反向末端重复序列(itr)之间。重组腺相关病毒(raav)由于具有宿主范围广、免疫原性低、安全性高、可介导外源基因在动物体内长期稳定表达等特点，是目前基因治疗领域最具应用前景的载体之一。然而，aav的装载能力有限，大约只有5kb，即亲本病毒基因组的大小，而对超过5kb的载体基因组进行包装会产生5'端被截断的包装基因组、长度异质化的基因组群以及较低的蛋白表达效率(wuz等，molecμlar therapy,2010,18(1):80-86)。

2、为了克服aav装载能力限制(＜5kb)，目前已经提出了利本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种用于在宿主细胞中表达目的基因的双AAV载体系统，包括第一载体和第二载体，其特征在于，其中：

2.如权利要求1所述的双AAV载体系统，其特征在于，所述5’端反向末端重复序列与所述3’端反向末端重复序列的反向末端重复序列的核苷酸序列衍生自AAV的同一血清型或不同血清型。

3.如权利要求2所述的双AAV载体系统，所述血清型为血清型2、血清型8、血清型5、血清型7或血清型9。

4.如权利要求1所述的双AAV载体系统，其特征在于，所述目的基因序列为报告基因或编码药物多肽的基因。

5.如权利要求4所述的双AAV载体系统，其特征在于，所述目的基因...

【技术特征摘要】

1.一种用于在宿主细胞中表达目的基因的双aav载体系统，包括第一载体和第二载体，其特征在于，其中：

2.如权利要求1所述的双aav载体系统，其特征在于，所述5’端反向末端重复序列与所述3’端反向末端重复序列的反向末端重复序列的核苷酸序列衍生自aav的同一血清型或不同血清型。

3.如权利要求2所述的双aav载体系统，所述血清型为血清型2、血清型8、血清型5、血清型7或血清型9。

4.如权利要求1所述的双aav载体系统，其特征在于，所述目的基因序列为报告基因或编码药物多肽的基因。

5.如权利要求4所述的双aav载体系统，其特征在于，所述目的基因序列为编码药物多肽的基因，所述药物多肽为脂蛋白酯酶、载脂蛋白、细胞因子、白细胞介素或干扰素中的至少一种。

【专利技术属性】
技术研发人员：请求不公布姓名，请求不公布姓名，请求不公布姓名，请求不公布姓名，请求不公布姓名，
申请(专利权)人：劲帆生物医药科技武汉有限公司，
类型：发明
国别省市：