细胞毒性的质谱确定制造技术

本发明专利技术涉及一种确定分析样品对动物细胞，包括人类细胞的细胞毒性作用的方法

【技术实现步骤摘要】
细胞毒性的质谱确定


[0001]本专利技术涉及一种用于确定细胞毒性因子对动物细胞的细胞毒性作用的质谱方法
。

技术介绍

[0002]常规微生物实验室的两个主要任务是微生物病原体的鉴定和细菌和真菌的抗菌素敏感性测试
(
即抗性测试
)。
[0003]近年来，为此各种质谱方法已经大量进入研究实验室和常规微生物实验室
。
尤其是在微生物实验室，一种特殊的质谱
(MS)
方法，“基质辅助激光解吸电离
‑
飞行时间”(MALDI
‑
ToF)
质谱法，近年来已经建立起来，并且在过去十年中，大多数微生物实验室都配备了相应的
MALDI
‑
ToF MS
仪器
。
然而，到目前为止，这种方法的常规应用只集中于细菌和真菌的病原体鉴定
。
此外，还有确定细菌和真菌的抗性的首次应用
。
到目前为止，这些方法大多数仍处于开发阶段
。
例如，<br/>WO2018本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.
一种用于确定分析样品对动物细胞
(23)
的细胞毒性作用
(46)
的方法，包括以下步骤：
‑
样品提供步骤
A(S 1)
，其中包括动物细胞
(23)、
营养介质和潜在具有细胞毒性因子的分析样品的质谱样品
(11)
被提供在质谱样品支架
(6)
的至少一个样品点
(16)
上；
‑
培养步骤
(S2)
，其中质谱样品
(11)
在培养装置
(24)
中，在质谱样品支架
(6)
的样品点
(16)
上培养；
‑
液体去除步骤
(S3a)
，其中将质谱样品
(11)
的残余液体从样品点
(16)
中去除；
‑
测量步骤
A(S4b)
，其中通过空间分辨质谱仪
(1)
在样品点
(16)
的至少一个部分区域
(34)
内的多个测量位置
(33)
处记录空间分辨质谱
(38)
，其中，当使用基于基质的空间分辨质谱仪
(21)
时，在测量步骤
A(S4b)
中记录空间分辨质谱
(21)
之前，在前置的样品制备步骤
A(S4a)
中，通过在样品点
(16)
的至少所述一个部分区域
(34)
上空间离散地施加基质
(29)
来对样品点
(16)
进行制备；
‑
第一评估步骤
A(S5)
，其中分析每个空间分辨质谱
(38)
是否存在动物细胞
(23)
的细胞特异性质谱特征
(41)
，并为每个测量位置
(33)
分配一个细胞存在值
(42)
；
‑
第二评估步骤
A(S6a)
，其中根据测量位置
(33)
的细胞存在值
(42)
，确定动物细胞
(23)
对样品点
(16)
的至少所述部分区域
(34)
的覆盖程度
(45)
；
‑
和
/
或第三评估步骤
A(S7)
，其中增殖能力由确定的覆盖程度
(45)
中导出；
‑
第四评估步骤
A(S8)
，其中分析样品对动物细胞
(23)
的细胞毒性作用
(46)
间接或直接地由第二评估步骤
A(S6a)
中确定的覆盖程度
(45)
导出，其中为此，分析样品对动物细胞
(23)
的细胞毒性作用
(46)
由两个步骤：第二评估步骤
A(S6a)
，第三评估步骤
A(S7)
的至少一个的结果导出
。2.
一种用于确定分析样品对动物细胞
(23)
的细胞毒性作用
(46)
的方法，包括以下步骤：
‑
样品提供步骤
A(S 1)
，其中包括动物细胞
(23)、
营养介质和潜在具有细胞毒性因子的分析样品的质谱样品
(11)
被提供在质谱样品支架
(6)
的至少一个样品点
(16)
上；
‑
培养步骤
(S2)
，其中质谱样品
(11)
在培养装置
(24)
中，在质谱样品支架
(6)
的样品点
(16)
上培养；
‑
液体去除步骤
(S3a)
，其中将质谱样品
(11)
的残余液体从样品点
(16)
中去除；
‑
测量步骤
C(S204b)
，其中通过质谱仪在分布在样品点
(16)
的至少一个部分区域
(34)
上的多个测量位置
(33)
处记录质谱
(20)
，其中，当使用基于基质的质谱仪时，在测量步骤
C(S204b)
中记录质谱
(20)
之前，在前置的样品制备步骤
A(S4a)
中，通过在样品点
(16)
的至少所述一个部分区域
(34)
上空间离散地施加基质
(29)
来对样品点
(16)
进行制备；
‑
第一评估步骤
C(S205)
，其中每个质谱
(20)
被分析是否存在动物细胞
(23)
的细胞特异性质谱特征
(41)
；
‑
第二评估步骤
C(S206a)
，其中根据第一评估步骤
C(S205)
的结果，确定动物细胞
(23)
对样品点
(16)
的至少所述部分区域
(34)
的覆盖程度
(45)
；
‑
第四评估步骤
C(S208)
，其中分析样品对动物细胞
(23)
的细胞毒性作用
(46)
由第二评估步骤
C(S206a)
确定的覆盖程度
(45)
中导出
。3.
一种用于确定分析样品对动物细胞
(23)
的细胞毒性作用
(56)
的方法，包括以下步
骤：
‑
样品提供步骤
B(S 101)
，其中包括动物细胞
(23)、
营养介质和潜在具有细胞毒性因子的分析样品的质谱样品
(11)
被提供在质谱样品支架
(6)
的至少一个样品点
(16)
上，其中所述样品点
(16)
具有第一和第二部分区域
(47
，
48)
，其中在样品点
(16)
的第一部分区域
(47)
上提供动物细胞
(23)
，而在样品点
(16)
的第二部分区域
(48)
上没有提供动物细胞
(23)
，并且其中剩余的质谱样品
(11)
被提供在两个部分区域
(47
，
48)
上；
‑
培养步骤
(S2)
，其中质谱样品
(11)
在培养装置
(24)
中在质谱样品支架
(6)
的样品点
(16)
上培养；
‑
液体去除步骤
(S3a)
，其中将质谱样品
(11)
的残余液体从样品点
(16)
中去除；
‑
测量步骤
B(S104b)
，其中通过空间分辨质谱仪
(1)
在样品点
(16)
的至少两个测量位置
(56
，
57)
记录空间分辨质谱
(38)
，其中第一测量位置
(33
，
56)
仍有动物细胞
(23)
，而第二测量位置
(33
，
57)
没有动物细胞
(23)
，其中，两个测量位置
(56
，
57)
都位于从参考点
(51)
开始的延伸方向
(50)
上，其中，当使用基于基质的空间分辨质谱仪
(1)
时，在测量步骤
B(S104b)
中记录空间分辨质谱
(38)
之前，在前置的样品制备步骤
B(S104a)
中，通过将基质
(29)
空间离散地施加到样品点
(48)
的两个部分区域
(47
，
48)
的至少一部分来进行样品点
(16)
的制备；
‑
第一评估步骤
A(S5)
，其中每个空间分辨质谱
(38)
被分析是否存在动物细胞
(23)
的细胞特异性质谱特征
(41)
，并为每个测量位置
(33
，
56
，
57)
分配一个细胞存在值
(42)
；
‑
第二评估步骤
B(S106a)
，其中从参考点
(51)
到转变点
(52)
的至少一个距离确定细胞扩展距离
(53)
，其中每个转变点
(52)
至少从第一和第二测量位置
(56
，
57)
计算；
‑
第四评估步骤
B(S108)
，其中分析样品的细胞毒性作用
(46)
由前一评估步骤的结果导出
。4.
根据权利要求1或进一步的权利要求之一所述的方法，其特征在于，所述动物细胞
(23)
是粘附生长的动物细胞
。5.
根据权利要求
1、2
或4所述的方法，其特征在于，多个测量位置
(33)
空间分布在样品点
(...

【专利技术属性】
技术研发人员：叶夫根尼，
申请(专利权)人：布鲁克，
类型：发明
国别省市：