一种氯吲哚酰肼中间体光学异构体比例的分析方法技术

本发明专利技术属于化学分析领域，涉及一种氯吲哚酰肼中间体光学异构体比例的分析方法，包括如下步骤：

【技术实现步骤摘要】
一种氯吲哚酰肼中间体光学异构体比例的分析方法


[0001]本专利技术属于化工分析
，具体涉及了一种氯吲哚酰肼中间体光学异构体比例的分析方法，其中所述的氯吲哚酰肼中间体为
2,3,4,9
‑
四氢
‑1‑
甲基
‑
1H
‑
吡啶
[3,4
‑
B]吲哚
‑3‑
甲酸甲酯
。

技术介绍

[0002]随着立体化学的发展，手性药物的研究也备受关注，具有相同理化性质的农药手性异构体可能表现出截然不同的生物活性，在毒性
、
致畸
、
致癌等方面也可能表现出截然不同的性质
。
例如：喹禾灵原药中的
R
异构体被植物吸收的速度和在植物体内的移动性较高，不仅发挥药效的速度快，而且药效较为稳定，不易受温度
、
湿度等环境条件的影响，但是其无效体
S
体则不具备除草活性
。
[0003]氯吲哚酰肼是一类天然的吲哚生物碱，广泛存在于自然界中，这类化合物具有良好的抗肿瘤
、
抗病毒活性已经引起了广泛关注
。
南开大学汪清民等人应用
β
咔啉类生物碱成功合成出抗烟草花叶病毒的有效药物，应用前景广阔
。(1S,3S)
‑
2,3,4,9
‑
四氢
‑1‑
甲基
‑
1H
‑
吡啶
[3,4
‑
B]吲哚
‑3‑
甲酸甲酯作为氯吲哚酰肼的重要中间体，因其含有三个手性异构体
(SR
构型，
RS
构型，
RR
构型
)
，为了研究不同构型的活性差异，需要对不同构性异构体进行分离
。
现有技术中未发现该物质手性的分析方法
。
[0004]基于此，提出一种
2,3,4,9
‑
四氢
‑1‑
甲基
‑
1H
‑
吡啶
[3,4
‑
B]吲哚
‑3‑
甲酸甲酯的手性分析方法成为本领域的迫切需要
。

技术实现思路

[0005]本专利技术针对现有技术存在的不足之处，提供了一种氯吲哚酰肼中间体光学异构体比例的分析方法，包括如下步骤：
(1)
流动相配制：按照体积比
(80
‑
95)
：
(5
‑
20)
：
(0.1
‑
0.5)
的比例将正己烷
、
乙醇和三氟乙酸混合，得到流动相；
(2)
供试品溶液的配制：称取一定量的
2,3,4,9
‑
四氢
‑1‑
甲基
‑
1H
‑
吡啶
[3,4
‑
B]吲哚
‑3‑
甲酸甲酯样品，用流动相和甲醇混合溶解，配制成浓度为1‑
10mg/mL
的试样溶液；
(3)
检测：采用高效液相色谱法和紫外检测器对样品进行检测，检测波长为
250
‑
280nm
，色谱柱采用以硅胶表面涂敷有三
[3
，5‑
二甲基苯基氨基甲酸酯
]的
OD
‑
H
手性色谱柱，色谱柱温度为
25℃
‑
45℃。
本专利技术的检测方法操作简单，
2,3,4,9
‑
四氢
‑1‑
甲基
‑
1H
‑
吡啶
[3,4
‑
B]吲哚
‑3‑
甲酸甲酯的四个异构体分离良好，保留适合，灵敏度高，经方法验证表明该分析方法的准确度和精密度高，方法专属性和重现性良好，便于标准化操作，为研究单个手性
(1S,3S)
‑
2,3,4,9
‑
四氢
‑1‑
甲基
‑
1H
‑
吡啶
[3,4
‑
B]吲哚
‑3‑
甲酸甲酯提供了必要的分析支持
。
[0006]本申请的主要专利技术点在于以硅胶表面涂敷有三
[3
，5‑
二甲基苯基氨基甲酸酯
]的
OD
‑
H(250mm
×
4.6mm)
手性色谱柱，以及所选用的流动相及比例，能有效的分离
2,3,4,9
‑
四氢
‑1‑
甲基
‑
1H
‑
吡啶
[3,4
‑
B]吲哚
‑3‑
甲酸甲酯四个手性异构体，同时选择流动相及甲醇的混合溶剂溶解样品，在减少溶剂效应的同时，保持了样品的稳定性，选择相应的进样体积
(
以
5uL
最佳
)
以及温度
(
以
40℃
最佳
)
的色谱柱柱温，提高了色谱峰的对称性以及良好的色谱峰面积和峰高
。
[0007]本申请的具体技术方案如下：
[0008]一种氯吲哚酰肼中间体光学异构体比例的分析方法，所述氯吲哚酰肼中间体为
2,3,4,9
‑
四氢
‑1‑
甲基
‑
1H
‑
吡啶
[3,4
‑
B]吲哚
‑3‑
甲酸甲酯，具体包括如下步骤：
[0009]1)
配制样品溶液：称取一定量的待测
2,3,4,9
‑
四氢
‑1‑
甲基
‑
1H
‑
吡啶
[3,4
‑
B]吲哚
‑3‑
甲酸甲酯样品，用流动相和甲醇的混合溶剂溶解，配制成浓度为1‑
10mg/mL
的样品溶液；
[0010]2)
色谱分析：将高效液相色谱的检测波长设定至
240
‑
280nm
范围内，设置流速为
0.5
‑
2mL/min
，柱温
25
～
45℃
，按照进样量
0.1
‑
10uL
将样品溶液注入高效液相色谱仪进行分析
。
[0011]上述高效液相色谱分析方法中：采用以硅胶表面涂敷有三
[3
，5‑
二甲基苯基氨基甲酸酯
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【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.
一种氯吲哚酰肼中间体光学异构体比例的分析方法，其特征在于：所述氯吲哚酰肼中间体为
2,3,4,9
‑
四氢
‑1‑
甲基
‑
1H
‑
吡啶
[3,4
‑
B]
吲哚
‑3‑
甲酸甲酯，具体包括如下步骤：
1)
配制样品溶液：称取一定量的待测
2,3,4,9
‑
四氢
‑1‑
甲基
‑
1H
‑
吡啶
[3,4
‑
B]
吲哚
‑3‑
甲酸甲酯样品，用流动相和甲醇的混合溶剂溶解，配制成浓度为1‑
10mg/mL
的样品溶液；
2)
色谱分析：将高效液相色谱的检测波长设定至
240
‑
280nm
范围内，设置流动相流速为
0.5
‑
2mL/min
，柱温
25
～
45℃
，按照进样量
0.1
‑
10uL
将样品溶液注入高效液相色谱仪进行分析
。2.
根据权利要求1所述氯吲哚酰肼中间体光学异构体比例的分析方法，其特征在于：采用以硅胶表面...

【专利技术属性】
技术研发人员：王玉莹，祝国富，许百红，朱红玉，李兰兰，许慧斌，杨清，刘亚鲁，张晓会，向川，
申请(专利权)人：山东京博农化科技股份有限公司，
类型：发明
国别省市：