一种基于制造技术

本发明专利技术属于医药技术领域，具体属于一种基于

【技术实现步骤摘要】
一种基于UHPLC Q
‑
Exactive Orbitrap MS/MS平台快速鉴定“丹参
‑
山楂”药对中化学成分的方法


[0001]本专利技术属于医药
，具体属于一种基于
UHPLC Q
‑
Exactive Orbitrap MS/MS
平台快速鉴定“丹参
‑
山楂”药对中化学成分的方法
。

技术介绍

[0002]丹参
‑
山楂药对源于
《
施今墨对药
》
，由丹参
、
山楂二味中药配伍而成，是祖国传统医学活血化瘀理论治疗冠心病的临床经典验方
。
方中丹参味苦微寒，能通行血中之滞，祛瘀而生新；山楂酸甘微温，功善破气散瘀，化浊降脂；二药相须配伍，行气活血
、
祛瘀止痛之力益彰，为治疗胸痹心痛之心血瘀阻证的经典组合
。
然而，丹参
‑
山楂药对发挥药效作用物质基础尚不明确，限制了其相关制剂在临床的科学应用
、
市场占有率以及在国际上的推广
。
[0003]超高效液相色谱
(UHPLC)
与
Orbitrap
超高分辨率质谱联用具有高效
、
准确
、
灵敏的优点，本专利技术采用超高效液相
Q
‑
Exactive Orbitrap
超高分辨率质谱联用技术，对丹参
‑
山楂药对的化学物质进行系统性快速分析研究，可为该药对及相关制剂的药效物质基础
、
质量控制
、
基准物质研究等提供参考数据，也为中药药对化合物的快速鉴定提供方法参考
。
[0004]公开于该
技术介绍
部分的信息仅仅旨在增加对本专利技术的总体背景的理解，而不应当被视为承认或以任何形式暗示该信息构成已为本领域一般技术人员所公知的现有技术
。

技术实现思路

[0005]本专利技术的目的在于提供一种基于
UHPLC Q
‑
Exactive Orbitrap MS/MS
平台快速鉴定“丹参
‑
山楂”药对中化学成分的方法
。
[0006]为实现上述目的，本专利技术提供了如下技术方案：
[0007]一种基于
UHPLC Q
‑
Exactive Orbitrap MS/MS
平台快速鉴定“丹参
‑
山楂”药对中化学成分的方法，包括以下步骤：
[0008]S1.
制备丹参
‑
山楂药对样品
[0009]取丹参和山楂药材置烘箱中烘干；等量称取干燥的丹参和山楂药材，粉碎，过
40
目筛；等量称取丹参和山楂药粉，加入8倍量质量分数
70
％的乙醇，回流提取2次，每次
60min
，合并两次滤液，回收乙醇，浓缩至稠膏，置于冷冻干燥机中干燥，收集干粉；
[0010]称取干粉，加入提取液，涡旋
、
匀浆，冰水浴超声后静置，然后离心，取上清液经微孔滤膜过滤，
‑
80℃
储存；
[0011]S2.
质谱鉴定；
[0012]S3.
质谱分析
[0013]谱数据通过软件处理分析，对于有对照品的化合物，与对照品图谱中各已知成分的相对保留时间
、
准分子离子等比对，再依据各对照品二级碎片离子信息进一步确认；对于无对照品的化合物，初步进行推测，再结合文献报道
、
数据库中相同或类似成分的
MS2
碎片离子进行对比分析，保证对无对照品成分的准确鉴定
。
[0014]更为具体的，
S1
中提取液由甲醇和水按4：1的质量比组成，提取液的内标浓度为
10
μ
g/mL。
[0015]更为具体的，离心条件为：
12000rpm
，离心力：
13800
×
g
，半径
8.6cm
；微孔过滤膜的孔径为
0.22
μ
m。
[0016]更为具体的，
S2
中，色谱柱：
Waters
的
UPLC BEH C18
色谱柱；流动相：
0.1
％甲酸水溶液
A
，乙腈溶液
B
，梯度洗脱条件：0‑
3.5min
，
95
‑
85
％
A
；
3.5
‑
6min
，
85
‑
70
％
A
；6‑
6.5min
，
70
‑
70
％
A
；
6.5
‑
12min
，
70
‑
30
％
A
；
12
‑
12.5min
，
30
‑
30
％
A
；
12.5
‑
18min
，
30
‑0％
A
；
18
‑
25min
，0‑0％
A
；
25
‑
26min
，0‑
95
％
A
；
26
‑
30min
，
95
‑
95
％
A
；流速：
0.4mL/min
；进样量：5μ
L
；柱温：
35℃。
[0017]更为具体的，
S2
中，正离子模式：
HESI
‑Ⅱ
离子源，离子源温度
400℃
，喷雾电压
4.0kV
，
S
‑
Lens RF
电压
60V
，毛细管温度
400℃
，鞘气和辅助气均为高纯氮气，鞘气流速
45arb
，辅助气流速流速
15arb
；
[0018]负离子检出模式：
HESI
‑Ⅱ
离子源，离子源温度
400℃
，电离源电压
‑
3.6kV
，
S
‑
Lens RF
电压
60V
，鞘气和辅助气均为高纯氮气，鞘气流速
45arb
，辅助气流速本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.
一种基于
UHPLC Q
‑
Exactive Orbitrap MS/MS
平台快速鉴定“丹参
‑
山楂”药对中化学成分的方法，其特征在于，包括以下步骤：
S1.
制备丹参
‑
山楂药对样品取丹参和山楂药材置烘箱中烘干；等量称取干燥的丹参和山楂药材，粉碎，过
40
目筛；等量称取丹参和山楂药粉，加入8倍量质量分数
70
％的乙醇，回流提取2次，每次
60min
，合并两次滤液，回收乙醇，浓缩至稠膏，置于冷冻干燥机中干燥，收集干粉；称取干粉，加入提取液，涡旋
、
匀浆，冰水浴超声后静置，然后离心，取上清液经微孔滤膜过滤，
‑
80℃
储存；
S2.
质谱鉴定；
S3.
质谱分析质谱数据通过软件处理分析，对于有对照品的化合物，与对照品图谱中各已知成分的相对保留时间
、
准分子离子等比对，再依据各对照品二级碎片离子信息进一步确认；对于无对照品的化合物，初步进行推测，再结合文献报道
、
数据库中相同或类似成分的
MS2
碎片离子进行对比分析，保证对无对照品成分的准确鉴定
。2.
根据权利要求1所述的基于
UHPLC Q
‑
Exactive Orbitrap MS/MS
平台快速鉴定“丹参
‑
山楂”药对中化学成分的方法，其特征在于，
S1
中提取液由甲醇和水按4：1的质量比组成，提取液的内标浓度为
10
μ
g/mL。3.
根据权利要求1所述的基于
UHPLC Q
‑
Exactive Orbitrap MS/MS
平台快速鉴定“丹参
‑
山楂”药对中化学成分的方法，其特征在于，离心条件为：
12000rpm
，离心力：
13800
×
g
，半径
8.6cm
；微孔过滤膜的孔径为
0.22
μ
m。4.
根据权利要求1所述的基于
UHPLC Q
‑
Exactive Orbitrap MS/MS
平台快速鉴定“丹参
‑
山楂”药对中化学成分的方法，其特征在于，
S2
中，色谱柱：
Waters
的
UPLC BEH C18
色谱柱；流动相：
0.1
％甲酸水溶液
A
，乙腈溶液
B
，梯度洗脱条件：0‑
3.5min
，
95
‑
85
％
A
；
3.5

【专利技术属性】
技术研发人员：李骅，冯甜，徐琼，余喆，宋凡，
申请(专利权)人：中国人民解放军空军军医大学，
类型：发明
国别省市：