针对制造技术

本发明专利技术涉及与人

【技术实现步骤摘要】
针对CD40和CD137的多特异性抗体
[0001]本申请是基于申请日为
2017
年7月
14
日，优先权日为
2016
年7月
14
日，申请号为
201780043547.1
，专利技术名称为：“针对
CD40
和
CD137
的多特异性抗体”的专利申请的分案申请
。


[0002]本专利技术涉及与
CD40
和
CD137
结合的多特异性抗体，以及此类多特异性抗体的用途，特别是用于治疗癌症的用途
。

技术介绍

[0003]CD40
是肿瘤坏死因子
(TNF)
受体
(TNFR)
家族的成员，并且已知为在多种细胞类型上发现的共刺激蛋白
。CD40
由抗原呈递细胞
(APC)(
包括树突状细胞
(DC)、B
细胞和巨噬细胞
)
组成型表达
。
它也可以由内皮细胞
、
血小板
、
平滑肌细胞
、
成纤维细胞和上皮细胞表达
。
与其在正常细胞上的广泛表达一致，
CD40
也在多种肿瘤细胞上表达
。
[0004]在
MHC II
类分子的背景中将肽抗原呈递至抗原特异性
CD4
+
T
细胞，连同共刺激信号
(
来自
CD80
和
/
或
CD86)
，导致
CD4
+
T
细胞的活化以及
DC
许可因子
CD40
配体
(CD40L)
和淋巴毒素
‑
α1β
2(LT
α1β
2)
的上调
。CD40L
和
LT
α1β2在活化的抗原特异性
CD4
+
T
细胞上的表达通过
CD40
和
LT
β
受体
(LT
β
R)
诱导信号传导，并且这许可
DC
诱导
CD8
+
T
细胞应答
。CD40
信号传导导致白细胞介素
‑
12(IL
‑
12)
的产生和
CD70、CD86、4
‑
1BB
配体
(4
‑
1BBL)、OX40
配体
(OX40L)
和
GITR
配体
(GITRL)
的上调，而
LT
β
R
信号传导导致
I
型干扰素
(IFN)
的产生
。
控制核因子
kappaB(NF
‑
kB)
的活性的信号传导系统对几乎所有
TNFR
超家族成员都响应
。
病原体相关分子模式
(PAMP)
和损伤相关分子模式
(DAMP)
也有助于这些事件
。
通过
MHC I
类限制性肽引发
CD8
+
T
细胞导致
CD27、4
‑
1BB、OX40
和糖皮质激素诱导的
TNFR
相关蛋白
(GITR)
的上调
。
通过其同源
TNF
超家族配体与
IL
‑
12
和
I
型
IFN
组合刺激
CD8
+
T
细胞上的这些受体，导致强大的
CD8
+
T
细胞活化
、
增殖和效应功能，以及
CD8
+
T
细胞记忆的形成和维持
。CD40
抗体可以发挥不同的作用，通过诱导抗体依赖性细胞介导的细胞毒性
(ADCC)、
补体依赖性细胞毒性
(CDC)
或抗体依赖性细胞介导的吞噬作用
(ADCP)
来杀伤表达
CD40
的肿瘤细胞，诱导细胞信号传导以诱导直接细胞凋亡或生长停滞，并且不依赖于肿瘤细胞上的
CD40
表达通过许可
APC
刺激抗癌免疫反应
。
与
CD40
结合的抗体可以触发
APC
上的
CD40
以引发效应细胞毒性
T
淋巴细胞
(CTL)
并诱导这些细胞释放
IL
‑2，并间接活化
NK
细胞
。
刺激
CD40
的抗体已在现有技术中公开，包括
CP
‑
870,893
，人
IgG2
抗体
(WO 2003/040170)
；达西珠单抗
(dacetuzumab)
，一种人源化
IgG1
抗体
(WO 2000/075348)
和
Chi Lob 7/4
，一种嵌合
IgG1
抗体
(US2009/0074711)。
此外，已经公开了拮抗性
CD40
抗体鲁卡妥姆单抗
(lucatumumab)
，一种人
IgG1
抗体
(WO 2002/028481)。
[0005]CD137(4
‑
1BB)
也是
TNFR
家族的成员
。CD137
是
CD8
+
和
CD4
+
T
细胞
、
调节性
T
细胞
(Treg)、
自然杀伤
T
细胞
(NK(T)
细胞
)、B
细胞和嗜中性粒细胞上的共刺激分子
。
在
T
细胞上，
CD137
不是组成型表达，而是在
T
细胞受体
(TCR)
激活后诱导
(
例如，在肿瘤浸润淋巴细胞
(TIL)
上
(Gros et al.,J.Clin Invest2014
；
124(5):2246
‑
59))。...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.
多特异性抗体，其包含
(I)
与人
CD40
结合的第一抗原结合区，其中所述第一抗原结合区包含选自下组的重链和轻链可变区
CDR1、CDR2
和
CDR3
：
a)
分别具有
SEQ ID NO:1、2
和3所示的氨基酸序列的重链可变区
CDR1、CDR2
和
CDR3
，以及分别具有
SEQ ID NO:4、YTS
和5所示的氨基酸序列的轻链可变区
CDR1、CDR2
和
CDR3
；
b)
具有总共一至十二个突变的根据
a)
的重链和轻链可变区
CDR1、CDR2
和
CDR3
；和
c)
抗体的重链和轻链可变区
CDR1、CDR2
和
CDR3
，所述抗体
(i)
与包含根据
a)
或
b)
的重链和轻链可变区
CDR1、CDR2
和
CDR3
的抗体竞争与人
CD40
结合和
/
或
(ii)
具有包含根据
a)
或
b)
的重链和轻链可变区
CDR1、CDR2
和
CDR3
的抗体对
CD40
的特异性，和
(II)
与人
CD137
结合的第二抗原结合区
。2.
根据权利要求1的多特异性抗体，其中所述第一抗原结合区包含第一重链可变
(VH)
序列和第一轻链可变
(VL)
序列，所述第二抗原结合区包含第二
VH
序列和第二
VL
序列，并且所述第一和第二
VH
和
VL
序列各自包含三个
CDR
序列，分别是
CDR1、CDR2
和
CDR3
，以及四个框架序列，分别是
FR1、FR2、FR3
和
FR4。3.
根据前述权利要求中任一项的多特异性抗体，其中所述第一抗原结合区包含分别具有
SEQ ID NO:1、2
和3所示的序列的重链可变区
CDR1、CDR2
和
CDR3
，以及分别具有
SEQ ID NO:4、YTS
和5所示的序列的轻链可变区
CDR1、CDR2
和
CDR3。4.
根据权利要求2‑3中任一项的多特异性抗体，其中所述第一抗原结合区的
VH
序列包含与
SEQ ID NO:117
和6的至少一个具有至少
70
％
、
至少
75
％
、
至少
80
％
、
至少
85
％
、
至少
90
％
、
至少
95
％
、
至少
97
...

【专利技术属性】
技术研发人员：I，
申请(专利权)人：生物技术公司，
类型：发明
国别省市：