【技术实现步骤摘要】
一种植物乳杆菌细菌素及其制备方法和抗菌用途
[0001]本专利技术属于食品生物
,具体涉及一种植物乳杆菌细菌素及其制备方法和抗菌用途
。
技术介绍
[0002]食品腐败在我们的日常生活中随处可见,通常引起食物变质的原因是微生物的作用,如金黄色葡萄球菌
、
枯草芽孢杆菌等食源性致病菌造成的食品污染;现今食品中应用最广泛的防腐剂为化学防腐剂,化学防腐剂的出现虽然可有效缓解由微生物引起的食品腐败问题,但是化学防腐剂长期食用危害人体健康,所以开发天然无毒无害的食品防腐剂成为了食品领域研究的重点
。
[0003]植物乳杆菌细菌素是由植物乳杆菌产生的一种具有抑菌生物活性的多肽或蛋白质类物质,可作为生物防腐剂减少食源性病原体的污染,提高食品的安全性
。
且因其安全
、
无毒
、
易被人体消化,不产生耐药性,显示出了细菌素作为生物防腐剂在食品保鲜方面的巨大潜力
。
目前研究最为深入的细菌素是乳酸链球菌素
Nisin
【技术保护点】
【技术特征摘要】
1.
一种植物乳杆菌细菌素的制备方法,其特征在于包括以下步骤:
1)
将培养至生长对数期的植物乳杆菌
WZS02
的种子液,接种至
MRS
培养基进行发酵,所得的发酵液离心,获得发酵上清液;其中,所述植物乳杆菌
WZS02
的保藏编号为
CCTCC NO:M 20231103
,保藏单位为中国典型培养物保藏中心,保藏地址为中国武汉武汉大学,保藏时间
2023
年
06
月
27
日;
2)
发酵上清液用乙酸乙酯萃取,收集有机相,旋蒸除去乙酸乙酯后用蒸馏水复溶得到蛋白质粗提液;
3)
蛋白质粗提液经过阳离子交换层析柱,用含
NaCl
的
40
‑
60mM
的乙酸钠容液作为洗脱液进行梯度洗脱,收集目标洗脱峰溶液经过透析除盐,得到蛋白质初步纯化液;
4)
所述蛋白质初步纯化液经过半制备反相高效液相色谱纯化,获得植物乳杆菌
WZS02
细菌素
。2.
如权利要求1所述的一种植物乳杆菌细菌素的制备方法,其特征在于步骤
1)
发酵的步骤为:将所述种子液以
1.5
‑
2.5
%的接种量接种到
pH
为
5.0
‑
7.0
的
MRS
液体培养基中,
30
‑
37℃
温度下静置厌氧培养
20
‑
30h。3.
如权利要求2所述的一种植物乳杆菌细菌素的制备方法,其特征在于所述发酵的具体步骤为:将所述种子液以2%的接种量接种到
pH
为
6.0
的
MRS
液体培养基中,
37℃
温度下静置厌氧培养
24h。4.
如权利要求1所述的一种植物乳杆菌细菌素的制备方法,其特征在于步骤
2)
的过程为:将发酵上清液浓缩为原来体积的
40
‑
60
%,浓缩液中加入
0.5
‑
1.5
倍体积的乙酸乙酯,充分混合后静置分液,收集有机相,将水相重复萃取的操作1‑3次,有机相合并后旋蒸除去乙酸乙酯后用蒸馏水复溶得到蛋白质粗提液
。5.
如权利要求1所述的一种植物乳杆菌细菌素的制备方法,其特征在于步骤
3)
的具体过程为:将蛋白质粗提液经过阳离子交换层析柱,在
180
‑
250min
内使通入至阳离子交换层析柱中的
40
‑
60mM
【专利技术属性】
技术研发人员:章银军,石佳玉,李逸超,童美君,魏春,汪钊,
申请(专利权)人:浙江工业大学,
类型:发明
国别省市:
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