【技术实现步骤摘要】
一种高温大曲二级菌剂的制备工艺
[0001]本专利技术涉及生物工程和酿酒
,具体涉及一种高温大曲二级菌剂的制备工艺
。
技术介绍
[0002]功能微生物对大曲的质量有重要影响,将功能微生物接种到大曲中,可优化大曲微生物结构,避免杂菌污染
。
目前一般将微生物制成固态菌剂再接种到大曲中,以麸皮等原料为载体
。
麸皮是微生物的良好载体,同时又对有益于酿酒生产,所以利用麸皮作为二级菌剂的载体是可行的
。
[0003]目前,主要将微生物制成菌剂接种到麸皮中,但微生物接种后存活时间较短,不适当的保藏方式也会造成微生物的死亡,难以应用到大曲生产过程中
。
技术实现思路
[0004]本专利技术的目的在于提供一种高温大曲二级菌剂的制备方法,先将选定的微生物制成冻干菌剂,再将菌种以冻干菌剂的方式接种到麸皮载体上
。
由于冷冻干燥后的微生物存活时间得到延长,冷冻过程中添加的保护剂降低了微生物的受损程度,使得二级菌剂中含有足够的微生物,能够作为母曲接种到大曲生产过程中
。
[0005]一种高温大曲二级菌剂的制备工艺,包括以下步骤:
[0006](1)
将
21
种微生物分为细菌类
、
霉菌类
、
酵母菌类;细菌类包括以下微生物:地衣芽孢杆菌
、
枯草芽孢杆菌
、
解淀粉芽孢杆菌
、
巨大芽孢杆菌
、 />蜡样芽孢杆菌
、
阿耶波多氏芽孢杆菌
、
甲基营养型芽孢杆菌
、
腐生葡萄球菌
、
面包乳杆菌
、
食窦魏斯氏菌
、
戊糖乳杆菌
、
醋酸杆菌
、
酒酿醋酸杆菌
、
维罗尼假单胞菌;霉菌类包括以下微生物:米曲霉
、
爪哇毛霉
、
米根霉和谢瓦曲霉;酵母菌类包括以下微生物:异常毕赤酵母和扣囊覆膜孢酵母
。
[0007](2)
将细菌类微生物中的
15
种微生物分别接种到牛肉膏蛋白胨琼脂固体培养基中恒温培养,然后转入牛肉膏蛋白胨液体培养基中摇床培养;将霉菌类微生物中的4种微生物分别接种到马铃薯葡萄糖琼脂固体培养基中恒温培养,然后转入马铃薯葡萄糖液体培养基中摇床培养;将酵母菌类微生物中的两种微生物分别接种到酵母浸出粉胨葡萄糖固体培养基中恒温培养,然后转入酵母浸出粉葡萄糖液体培养基中摇床培养
。
[0008](3)
将麸皮
、
稻壳和玉米芯磨碎,混合均匀,灭菌后,作为载体备用;
[0009](4)
将海藻糖
、
甘露醇
、
硫代硫酸钠和脱脂奶粉加入至无菌水中溶解,得到保护剂溶液,备用;
[0010](4)
将步骤
(1)
得到的细菌
、
霉菌和酵母菌分别加入至无菌生理盐水中,得到对应的菌悬液,然后将菌悬液和步骤
(2)
得到的载体加入至步骤
(3)
得到的保护剂溶液中,然后放入冰箱预冷,再转入液氮预冻,预冻完成后转移至冷冻干燥机,通过冷冻干燥机,真空干燥制成粉状冻干菌剂;
[0011](5)
将麸皮和水混合均匀后,灭菌,冷却,得到二级菌剂载体;将步骤
(4)
得到的细
菌
、
霉菌
、
酵母菌的粉状冻干菌剂分别加入到二级菌剂载体中,恒温培养,干燥,制得成品高温大曲二级菌剂
。
[0012]本专利技术先将各菌种在培养基上活化扩培后,接种到以麸皮
、
稻壳和玉米芯为原料的载体中,然后将载体放入以海藻糖
、
甘露醇
、
硫代硫酸钠和脱脂奶粉为成分的保护剂中,经冷冻干燥后制成冻干菌剂
。
之后将得到的粉状冻干菌剂接种到麸皮载体中,进行恒温培养,然后经干燥得到含有多种微生物的高温大曲二级菌剂
。
由于本专利技术制得高温大曲二级菌剂中的微生物是以冻干菌剂的方式接种的,延长了微生物菌种的存活时间,降低了菌种的受损程度,使该高温大曲二级菌剂能作为母曲接种到高温大曲生产过程中
。
[0013]进一步地,步骤
(1)
中,所述微生物包括细菌类
(
地衣芽孢杆菌
、
枯草芽孢杆菌
、
解淀粉芽孢杆菌
、
巨大芽孢杆菌
、
蜡样芽孢杆菌
、
阿耶波多氏芽孢杆菌
、
甲基营养型芽孢杆菌
、
腐生葡萄球菌
、
面包乳杆菌
、
食窦魏斯氏菌
、
戊糖乳杆菌
、
醋酸杆菌
、
酒酿醋酸杆菌
、
维罗尼假单胞菌
)、
霉菌类
(
米曲霉
、
爪哇毛霉
、
米根霉和谢瓦曲霉
)
和酵母菌类
(
异常毕赤酵母和扣囊覆膜孢酵母
)。
[0014]进一步地,步骤
(2)
中,细菌类培养条件为:在牛肉膏蛋白胨琼脂固体培养基上
37℃
培养
48h
,然后接种到牛肉膏蛋白胨液体培养基中,
37℃
,
120rpm
摇床培养
48h。
[0015]进一步地,步骤
(2)
中,霉菌类培养条件为:在马铃薯葡萄糖琼脂固体培养基上
30℃
培养
48h
,然后接种到马铃薯葡萄糖液体培养基中,
30℃
,
120rpm
摇床培养
48h。
[0016]进一步地,步骤
(2)
中,酵母菌类培养条件为:在酵母浸出粉胨葡萄糖固体培养基上
30℃
培养
48h
,然后接种到酵母浸出粉葡萄糖液体培养基中,
30℃
,
120rpm
摇床培养
48h。
[0017]进一步地,步骤
(3)
中,载体制备方法为:将麸皮
、
稻壳和玉米芯磨碎,过
50
目筛,然后
121℃
条件下灭菌,然后混合均匀,制成一级菌剂载体,载体中麸皮
、
稻壳和玉米芯的质量占比为
60
%,
30
%和
10
%
。
[0018]进一步地,步骤
(4)
中,保护剂制备方法为:将海藻糖
、
甘露醇本文档来自技高网...
【技术保护点】
【技术特征摘要】
1.
一种高温大曲二级菌剂的制备工艺,其特征在于,包含以下步骤:
(1)
将
21
种微生物分为细菌类
、
霉菌类
、
酵母菌类;细菌类包括以下微生物:地衣芽孢杆菌
、
枯草芽孢杆菌
、
解淀粉芽孢杆菌
、
巨大芽孢杆菌
、
蜡样芽孢杆菌
、
阿耶波多氏芽孢杆菌
、
甲基营养型芽孢杆菌
、
腐生葡萄球菌
、
面包乳杆菌
、
食窦魏斯氏菌
、
戊糖乳杆菌
、
醋酸杆菌
、
酒酿醋酸杆菌
、
维罗尼假单胞菌;霉菌类包括以下微生物:米曲霉
、
爪哇毛霉
、
米根霉和谢瓦曲霉;酵母菌类包括以下微生物:异常毕赤酵母和扣囊覆膜孢酵母;
(2)
将细菌类微生物中的
15
种微生物分别接种到牛肉膏蛋白胨琼脂固体培养基中恒温培养,然后转入牛肉膏蛋白胨液体培养基中摇床培养;将霉菌类微生物中的4种微生物分别接种到马铃薯葡萄糖琼脂固体培养基中恒温培养,然后转入马铃薯葡萄糖液体培养基中摇床培养;将酵母菌类微生物中的两种微生物分别接种到酵母浸出粉胨葡萄糖固体培养基中恒温培养,然后转入酵母浸出粉葡萄糖液体培养基中摇床培养;
(3)
将麸皮
、
稻壳和玉米芯磨碎,混合均匀,灭菌后,作为载体备用;
(4)
将海藻糖
、
甘露醇
、
硫代硫酸钠和脱脂奶粉加入至无菌水中溶解,得到保护剂溶液,备用;
(5)
将步骤
(2)
得到的细菌
、
霉菌和酵母菌分别加入至无菌生理盐水中,得到对应的菌悬液,然后将菌悬液和步骤
(3)
得到的载体加入至步骤
(4)
得到的保护剂溶液中,然后放入冰箱预冷,再转入液氮预冻,预冻完成后转移至冷冻干燥机,通过冷冻干燥机,真空干燥制成粉状冻干菌剂;
(6)
将麸皮和水混合均匀后,灭菌,冷却,得到二级菌剂载体;将步骤
(5)
得到的细菌
、
霉菌
、
酵母菌的粉状冻干菌剂分别加入到二级菌剂载体中,恒温培养,干燥,制得成品高温大曲二级菌剂
。2.
根据权利要求1所述的高温大曲二级菌剂制备工艺,其特征在于,步骤
(1)
中,
21
种微生物分为细菌类
、
霉菌类
、
酵母菌类;细菌类包括以下微生物:地衣芽孢杆菌
、
枯草芽孢杆菌
、
解淀粉芽孢杆菌
、
巨大芽孢杆菌
、
蜡样芽孢杆菌
、
阿耶波多氏芽孢杆菌
、
甲基营养型芽孢杆菌
、
腐生葡萄球菌
、
面包乳杆菌
、
食窦魏斯氏菌
、
戊糖乳杆菌
、
醋酸杆菌
、
酒酿醋酸杆菌
、
维罗尼假单胞菌;霉菌类包括以下微生物:米曲霉
、
爪哇毛霉
、
米根霉和谢瓦曲霉;酵母菌类包括以下微生物:异常毕赤酵母和扣囊覆膜孢酵母
。3.
根据权利要求2所述的高温大曲二级菌剂制备工艺,其特征在于,步骤
(1)
中,细菌类培养条件为:在牛肉膏蛋白胨琼脂固体培养基上
37℃
培养
48h
,然后接种到牛肉膏蛋白胨液体培养基中,
37℃
,
120rpm
摇床培养
48h。4.
根据权利要...
【专利技术属性】
技术研发人员:张楷正,张家彬,侯耀川,刘青松,卢昱洁,唐华,王新龙,
申请(专利权)人:四川轻化工大学,
类型:发明
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