一种猴痘病毒制造技术

本发明专利技术公开了一种猴痘病毒

【技术实现步骤摘要】
一种猴痘病毒A29L蛋白单克隆抗体及其应用


[0001]本专利技术属于分子免疫学领域，更具体地，涉及一种猴痘病毒
A29L
蛋白单克隆抗体及其应用
。

技术介绍

[0002]猴痘病毒
(monkeypox virus
，
MPXV)
亦称猴天花，是一种人畜共患的包膜双链
DNA
病毒，属于痘病毒科的正痘病毒属
。
猴痘病毒发源于非洲热带雨林，其病毒大小为
200
‑
300nm
，外周有
30nm
的外膜，内核为匀质的核心体，表现出卵球形或矩形砖状特征，可以独立复制
。
感染猴痘病毒后可引起类似于天花病的症状如水疱疹
、
全身症状如发烧
、
全身僵硬
、
头痛
、
肌肉疼痛和淋巴结肿大，虽这些症状通常是轻微的，但在免疫功能低下的人群中可能更为严重，由于其症状与天花病的症状类似，目前临床上难以准确区分猴痘和天花病的病例
。
[0003]至今全球已有超过
2.6
万例猴痘病例，在
80
多个国家发现了这种病毒，
2023
年7月
23
日，世界卫生组织宣布猴痘为国际突发公共卫生事件
。
目前猴痘已经列入我国传染病控制管理体系中，其中对
MPXV
感染病例的诊断是疫情防控过程中的关键环节，如血清学诊断方法，即利用猴痘病毒特异性抗原检测猴痘血清抗体，但血清学诊断方法适合于疾病爆发的流行病学评估以及回顾性人群研究，可以回顾性地确定爆发的范围
。
[0004]目前社会对于猴痘病毒治疗机制还处于研究阶段，而基于猴痘病毒关键靶点抗原抗体的免疫学检测试剂也在逐步研究推进中，如专利
CN 115975012 A
一种抗猴痘病毒
A29L
蛋白的单克隆抗体及其用途，该专利中抗体为单抗，其检测猴痘病毒时通常需纯化抗原，一般难以满足
MPXV
临床诊断的需求；专利
CN 116239680 A
猴痘病毒
A29
小鼠单克隆包被抗体及检测抗体，该专利中抗体包括包被抗体和检测抗体，可以用于制备含有这两种抗体的双抗检测试剂盒，但目前猴痘病毒检测试剂盒种类较少，且往往只针对一种动物，另外正痘病毒属还包括天花病毒
、
痘苗病毒和牛痘病毒，这些病毒在病毒形态
、
生命周期和结构上表现出高度的相似性，蛋白组之间的同源性达到
92
‑
95
％
。
因此，寻找更多能有效识别猴痘病毒的抗体具有重要意义，尤其是能够配对的双抗抗体，利于准确
、
快速的筛查和诊断猴痘病例
。

技术实现思路

[0005]针对现有技术的以上缺陷或改进需求，本专利技术提供了一种猴痘病毒
A29L
蛋白单克隆抗体及其应用，其目的在于通过免疫原
A29L
蛋白刺激小鼠，结果在其体内发现两种高效价的抗体，且这两种抗体能够配对，通过该对抗体可变区基因克隆及测序，获得该对抗体对应重链和轻链互补决定区的氨基酸序列以及其重链和轻链的氨基酸序列，以此为基础制备猴痘病毒单克隆抗体并制备猴痘病毒检测试剂盒，由此解决现有猴痘病毒检测试剂盒种类较少，尤其是双抗检测试剂盒少的技术问题
。
[0006]为实现上述目的，按照本专利技术的一个方面，提供了一种猴痘病毒
A29L
蛋白单克隆
抗体，其包括抗体一号；
[0007]所述抗体一号，其重链
CDR1
包括
SEQ ID NO:1
所示的氨基酸序列或由其组成，重链
CDR2
包括
SEQ ID NO:2
所示的氨基酸序列或由其组成，重链
CDR3
包括
SEQ ID NO:3
所示的氨基酸序列或由其组成；
[0008]所述抗体一号，其轻链
CDR1
包括
SEQ ID NO:4
所示的氨基酸序列或由其组成，轻链
CDR2
包括
SEQ ID NO:5
所示的氨基酸序列或由其组成，轻链
CDR3
包括
SEQ ID NO:6
所示的氨基酸序列或由其组成
。
[0009]优选地，所述猴痘病毒
A29L
蛋白单克隆抗体，其所述抗体一号，其重链可变区还包括以下氨基酸序列或由其序列组成：
[0010]包括如
SEQ ID NO:7
，8，9，
10
所示的氨基酸序列；
[0011]或者与
SEQ ID NO:7
，8，9，
10
所示的序列具有至少
80
％，
85
％，或
90
％序列同一性的序列，优选具有至少
91
％，
92
％，
93
％，
94
％，
95
％，
96
％，
97
％，
98
％，
99
％或
100
％序列同一性的序列；
[0012]或者与
SEQ ID NO:7
，8，9，
10
所示的氨基酸序列相比具有一个或多个氨基酸突变的序列，优选具有
1、2、3、4、5、6、7、8、9
或
10
个氨基酸突变的氨基酸序列
。
[0013]优选地，所述猴痘病毒
A29L
蛋白单克隆抗体，其所述抗体一号，其轻链可变区还包括以下氨基酸序列或由其序列组成：
[0014]包括如
SEQ ID NO:11
，
12
，
13
，
14
所示的氨基酸序列；
[0015]或者与
SEQ ID NO:11
，
12
，
13
，
14
所示的序列具有至少
80
％，
85
％，或
90
％序列同一性的序列，优选具有至少
91
％，
92
％，
93
％，
94
％，
95
％，
96
％，
97
％，
98
％，
99
％或
100
％序列同一性的序列；
[0016]或者与
SEQ ID NO:11
，
12
...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.
一种猴痘病毒
A29L
蛋白单克隆抗体，其特征在于，包括抗体一号；所述抗体一号，其重链
CDR1
包括
SEQ ID NO:1
所示的氨基酸序列或由其组成，重链
CDR2
包括
SEQ ID NO:2
所示的氨基酸序列或由其组成，重链
CDR3
包括
SEQ ID NO:3
所示的氨基酸序列或由其组成；所述抗体一号，其轻链
CDR1
包括
SEQ ID NO:4
所示的氨基酸序列或由其组成，轻链
CDR2
包括
SEQ ID NO:5
所示的氨基酸序列或由其组成，轻链
CDR3
包括
SEQ ID NO:6
所示的氨基酸序列或由其组成
。2.
如权利要求1所述的猴痘病毒
A29L
蛋白单克隆抗体，其特征在于，所述抗体一号，其重链可变区还包括以下氨基酸序列或由其序列组成：包括如
SEQ ID NO:7
，8，9，
10
所示的氨基酸序列；或者与
SEQ ID NO:7
，8，9，
10
所示的序列具有至少
80
％，
85
％，或
90
％序列同一性的序列，优选具有至少
91
％，
92
％，
93
％，
94
％，
95
％，
96
％，
97
％，
98
％，
99
％或
100
％序列同一性的序列；或者与
SEQ ID NO:7
，8，9，
10
所示的氨基酸序列相比具有一个或多个氨基酸突变的序列，优选具有
1、2、3、4、5、6、7、8、9
或
10
个氨基酸突变的氨基酸序列
。3.
如权利要求2所述的猴痘病毒
A29L
蛋白单克隆抗体，其特征在于，所述抗体一号，其轻链可变区还包括以下氨基酸序列或由其序列组成：包括如
SEQ ID NO:11
，
12
，
13
，
14
所示的氨基酸序列；或者与
SEQ ID NO:11
，
12
，
13
，
14
所示的序列具有至少
80
％，
85
％，或
90
％序列同一性的序列，优选具有至少
91
％，
92
％，
93
％，
94
％，
95
％，
96
％，
97
％，
98
％，
99
％或
100
％序列同一性的序列；或者与
SEQ ID NO:11
，
12
，
13
，
14
所示的氨基酸序列相比具有一个或多个氨基酸突变的序列，优选具有
1、2、3、4、5、6、7、8、9
或
10
个氨基酸突变的氨基酸序列
。4.
如权利要求1至3任意一项所述的猴痘病毒
A29L
蛋白单克隆抗体，其特征在于，所述抗体一号，其重链如
SEQ ID NO:15
所示的氨基酸序列，其轻链如
SEQ ID NO:16
所示的氨基酸序列
。5.
一种猴痘病毒
A29...

【专利技术属性】
技术研发人员：吴川，漆彦婷，潘家豪，吴亚辉，
申请(专利权)人：中南大学，
类型：发明
国别省市：