一种环磷腺苷葡胺注射液有关物质检测方法技术

本发明专利技术旨在提供一种分离度好的环磷腺苷葡胺注射液有关物质检测方法，该方法采用高效液相色谱法，色谱柱以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，流动相为磷酸氢二钾和乙腈作为溶液，磷酸氢二钾：乙腈为

【技术实现步骤摘要】
一种环磷腺苷葡胺注射液有关物质检测方法


[0001]本专利技术属于药物分析领域，具体涉及一种环磷腺苷葡胺注射液有关物质检测方法
。

技术介绍

[0002]环磷腺苷为参与调节细胞功能的第二信使物质，其作用非常广泛，注射大剂量的环磷腺苷，能使心肌收缩力增强，引起血压升高，心输出量增高，并能舒张平滑肌，扩张冠状动脉血管，改善肝功能，促进神经再生，抑制皮肤外层上皮细胞分裂及转化异常细胞的功能，促进呼吸链氧化酶的活性及改善心肌缺氧等
。
[0003]葡甲胺易溶于水，通过增强环磷腺苷脂溶性，提高环磷腺苷纯度，使得环磷腺苷发挥最大程度的药理作用
。
[0004]环磷腺昔微溶于水，在环磷腺中加入葡甲胺可增加其溶解性
。
环磷腺苷葡胺注射液为细胞信使，具有调节细胞多种功能，增强心肌收缩力，扩张心脑及外周血管，降低心肌耗氧量，改善心肌代谢等作用，并可促使受损窦房结功能的恢复
。
用于治疗病窦综合症，急性心肌炎，扩张型心肌病，冠心病心绞痛，各种病因所致的心力衰竭，对洋地黄不敏感或中毒的心衰患者疗效尤佳
。
[0005]环磷腺苷是以 5
′‑
腺苷酸为原料，在无水条件下通过内酯化反应而制得
。
在反应液中，若吡啶脱水不完全，有可能产生腺苷
[6]。
并且环磷腺苷易水解，其产物为 5
‑
磷酸腺苷， 该物质会使得溶液 pH 值降低，杂质含量升高
。
因此，我们探索条件，建立一种简便
、
快速
、
灵敏的高效液相色谱法测定环磷腺苷葡萄糖注射液的含量及有关物质，用于药物生产过程中质量控制
。
[0006]《
中国药典
》2020
年版仅收载了环磷腺苷原料药的有关物质检测方法，采用高效液相色谱法，我们参考环磷腺苷原料药有关物质检测方法及杂质控制情况，对中国药典中环磷腺苷原料药有关物质检测方法进行优化，得到最终的环磷腺苷葡胺注射液有关物质检测方法文献：
HPLC
法测定环磷腺昔葡萄糖注射液含量及有关物质，该方法某些特定杂质不能完全分开，不能对特定杂质进行检测，不能控制其杂质量
。
本专利技术方案通过优化后能对5个特定杂质进行很好的分离，从而对特定杂质进行控制，使方法更有特异性
。

技术实现思路

[0007]本专利技术旨在提供一种简单
、
高效
、
灵敏度及专属性强的环磷腺苷葡胺注射液有关物质检测方法
。
[0008]为实现上述专利技术目的，本专利技术一种环磷腺苷葡胺注射液有关物质检测方法，具体实施方案为：本专利技术所述一种环磷腺苷葡胺注射液有关物质检测方法，该方法采用高效液相色谱法，色谱柱以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，流动相为磷酸氢二钾和乙腈作为溶液，磷
酸氢二钾：乙腈比例为
86
‑
96
：4‑
14。
[0009]本专利技术所述一种环磷腺苷葡胺注射液有关物质检测方法，流动相磷酸氢二钾：乙腈比例为
90
‑
94
：6‑
10。
[0010]本专利技术所述一种环磷腺苷葡胺注射液有关物质检测方法，流动相磷酸氢二钾：乙腈为比例
94
：
6。
[0011]本专利技术所述一种环磷腺苷葡胺注射液有关物质检测方法，流动相磷酸氢二钾浓度为
0.02mol/l。
[0012]本专利技术所述一种环磷腺苷葡胺注射液有关物质检测方法，包括以下步骤：1）配制供试品溶液：以流动相为溶剂，溶解待测样品，配制得到供试品溶液；2）取供试品溶液和对照溶液分别进样，用高效液相色谱进行检测，记录色谱图
。
[0013]本专利技术所述一种环磷腺苷葡胺注射液有关物质检测方法，步骤2）所述的高效液相色谱条件为：色谱柱：十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；检测波长：
242
‑
260nm
；柱温：
25
‑
30℃
；流速：
1.0ml/min
；流动相：磷酸氢二钾
‑
乙腈
。
[0014]本专利技术所述一种环磷腺苷葡胺注射液有关物质检测方法，步骤2）所述的高效液相色谱条件为：色谱柱：十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，
SymmetryShield RP18
，5μ
m
，
4.6mm
×
250mm
；检测波长：
258nm
；柱温：
30℃
；流速：
1.0ml/min
；流动相：磷酸氢二钾
‑
乙腈比例为
94
：
6。
[0015]本专利技术所述一种环磷腺苷葡胺注射液有关物质检测方法，该方法供试品溶液中环磷腺苷及已知杂质与相邻杂质峰之间的分离度不小于
1.5。
[0016]本专利技术所述一种环磷腺苷葡胺注射液有关物质检测方法，该方法能有效分离的已知杂质为腺苷（
AR
）
、
腺嘌呤（
AD
）
、
布达地新杂质5（5’
AMP
）
、
腺苷2’3’‑
单磷酸混合异构体（2’
AMP
）
、
腺苷杂质
N9
（3’
AMP
）
。
[0017]本专利技术所述一种环磷腺苷葡胺注射液有关物质检测方法，该方法能有效分离的杂质结构式为：
。
[0018]本专利技术优势分析：现有文献方法杂质不能完全分离，本专利技术方案通过优化后能对5个特定杂质进行很好的分离，从而对特定杂质进行控制，使方法更有特异性，从而提高环磷腺苷葡胺注射液的质量控制
。
附图说明
[0019]图1：实施例1中系统适用性专属性色谱图图2：实施例1中空白溶液专属性色谱图图3：实施例1中空白辅料专属性色谱图
图4：实施例1中供试品专属性色谱图图5：实施例7中杂质3’
AMP、AD、AR、
环磷腺苷线性色谱图图6：实施例7中杂质2’
AMP
线性色谱图图7：实施例8中不同流速供试品色谱图图8：环磷腺苷线性图9：杂质
AD
线性图
10
：杂质
AR
线性图
11
：杂质5’
AMP
线性图
12
：杂质3’
AMP
线性图
13
：杂质2’
AMP
线性
。
实施方式
[0020]下面实施例只为进一步说明本专利技术技术方案，不以任何形式限制本专利技术范围
。
[0021]制剂供试品溶液配制：精密量取本品
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【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.
一种环磷腺苷葡胺注射液有关物质检测方法，该方法采用高效液相色谱法，其特征在于，色谱柱以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，流动相为磷酸氢二钾和乙腈混合溶液，磷酸氢二钾：乙腈比例为
86
‑
96
：4‑
14。2.
根据权利要求1所述一种环磷腺苷葡胺注射液有关物质检测方法，其特征在于，流动相磷酸氢二钾：乙腈比例为
90
‑
94
：6‑
10。3.
根据权利要求1所述一种环磷腺苷葡胺注射液有关物质检测方法，其特征在于，流动相磷酸氢二钾：乙腈比例为
94
：
6。4.
根据权利要求1‑3任一项所述一种环磷腺苷葡胺注射液有关物质检测方法，其特征在于，流动相磷酸氢二钾浓度为
0.02mol/l。5.
根据权利要求1‑4任一项所述一种环磷腺苷葡胺注射液有关物质检测方法，其特征在于，包括以下步骤：1）配制供试品溶液：以流动相为溶剂，溶解待测样品，配制得到供试品溶液；2）取供试品溶液和对照溶液分别进样，用高效液相色谱进行检测，记录色谱图
。6.
根据权利要求5所述一种环磷腺苷葡胺注射液有关物质检测方法，其特征在于，步骤2）所述的高效液相色谱条件为：色谱柱：十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；检测波长：
242
‑
260nm
；柱温：
25
‑
30℃<...

【专利技术属性】
技术研发人员：唐其祥，刘选，李多娇，杨世平，曹丽华，张静，刘娟，
申请(专利权)人：康普药业股份有限公司，
类型：发明
国别省市：