乳腺癌相关的生物标志物及其应用制造技术

本发明专利技术提供了一种乳腺癌的生物标志物，所述生物标志物为自身抗体组合，其包括分别抗以下肿瘤相关抗原的自身抗体中的至少三个：

【技术实现步骤摘要】
乳腺癌相关的生物标志物及其应用


[0001]本专利技术涉及生物技术和医学诊断领域，具体而言，本专利技术涉及一种乳腺癌的自身抗体生物标志物
、
检测其的抗原组合以及相应地它们在乳腺癌检测中的应用
。

技术介绍

[0002]全球范围内，乳腺癌已成为女性癌症相关死亡的主要原因，在女性中乳腺癌的发病率和死亡率远远超过其他癌症
。
在中国，
50
岁以上的女性是患乳腺癌的高发人群，该年龄段的乳腺癌死亡人数占所有年龄段的
80
％以上
。
其中，三阴性乳腺癌
(Triple negative breast cancer
，
TNBC)
是乳腺癌的一种亚型，其特征是雌激素受体
(estrogen receptor
，
ER)、
孕激素受体
(progesterone receptor
，
PR)
和人表皮生长因子受体
2(human epidermal growth factor receptor 2
，
HER2)
在肿瘤组织中缺乏表达
。
这种乳腺癌被认为是恶性程度最高的乳腺癌类型之一，占所有乳腺癌的
12
‑
20
％，由于其耐药性强
、
复发率高
、
转移性强以及缺乏靶向治疗而具有更高致死风险
。
[0003]针对乳腺癌
、
特别是三阴性乳腺癌，当前最迫切的需求是提高尽早发现其存在的检测能力，以此减低这种疾病对人类的威胁，提升患者的生存率和生存质量
。
[0004]传统上采用影像学筛查技术对乳腺癌进行检测，例如乳房
x
线照相
、
超声检查
、
乳腺
MRI
检查
。
但是，这些影像学筛查技术的检测结果与医师的经验与技术质量有关，且存在分辨率低
、
特异性和敏感性无法保证等缺陷，因此需要开发更准确
、
操作简单
、
风险低且非侵入性的技术手段来补充或替代
。
此外，已经提出了检测肿瘤抗原标志物来进行乳腺癌的筛查，如人表皮生长因子受体
2(HER2)
抗原和糖类抗原
15
‑
3(CA15
‑
3)
；但是，难以证明这些标志物具有乳腺癌特异性，且易受肿瘤负荷影响，在早期筛查中价值有限
。
此外，还提出了可检测基因标志物例如
BRCA1
和
BRCA2
或者检测细胞外的循环
DNA(cell
‑
free DNA
，
cfDNA)
或微小
RNA(MicroRNAs
，
miRNAs)
，但是同样存在对降低乳腺癌死亡率并无帮助或方法不成熟等缺陷
。
[0005]自身抗体是指针对自身组织
、
器官
、
细胞及细胞成分的抗体
。
在癌症发生早期，肿瘤相关抗原的暴露即可被人体免疫系统识别，产生肿瘤相关自身抗体，甚至在外周血中也可维持高水平的自身抗体，可被本领域常规技术手段灵敏地检测到
。
本领域公认，肿瘤抗原产生的自身抗体是肿瘤早期诊断的较好指标，利用肿瘤诱导产生的自身抗体来反应患者肿瘤发生机疾病进展过程，正成为寻找用于肿瘤早期诊断及预后判断新靶标的重要方向
。
[0006]已有研究提出将单个自身抗体检测或若干种自身抗体的组合检测用于乳腺癌筛查中
。
例如
p53
自身抗体
、MUC1
自身抗体
、HSP60
自身抗体
、HSP90
自身抗体
、HER2
自身抗体等的单独检测以及几种自身抗体指标的联测检测，证明具有一定的敏感性和特异性
。
[0007]但是，实验证明，目前已经提出的自身抗体组合检测乳腺癌
、
尤其是早期乳腺癌仍存在敏感性不够高等缺点，仍有必要发现新的生物标志物，如乳腺癌特异性抗原相关的自身抗体组合，用于乳腺癌早期筛查和辅助早期诊断
。
并且，也需要提供新能更特异地筛查三阴性乳腺癌的新型自身抗体组合
。

技术实现思路

[0008]为了解决上述技术问题，本专利技术通过检测乳腺癌患者血液中针对不同抗原靶点的自身抗体，最终鉴定了一组可用于筛查乳腺癌
、
尤其是早期筛查的自身抗体
。
该自身抗体组合作为生物标志物，在特别是早期肿瘤检测中有足够高的敏感性，尤其是在实验的中国人群中；同时还具有足够高的检测特异性
。
[0009]因此，本专利技术的一个目的是提供一种乳腺癌的生物标志物，其为自身抗体组合
。
[0010]基于该自身抗体组合作为生物标志物，本专利技术的另一个目的是提供用于检测该自身抗体组合的试剂，例如抗原蛋白组合；以及提供该自身抗体组合或检测试剂在制备用于乳腺癌的患病风险预测
、
筛查
、
预后评估
、
治疗效果监测或复发监测等产品中的用途
。
[0011]本专利技术的再一个目的是提供试剂盒以及相应地用于乳腺癌的患病风险预测
、
筛查
、
预后评估
、
治疗效果监测或复发监测等的方法
。
[0012]本专利技术的技术方案如下
。
[0013]一方面，本专利技术提供一种乳腺癌的生物标志物，所述生物标志物为自身抗体组合，其包括分别抗以下肿瘤相关抗原
(Tumor
‑
associated antigen
，
TAA)
的自身抗体
(Tumor associated autoantibody
，
TAAb)
中的至少三个：
PARP1、TRIM21、P53、BRCA2、Annexin 11、ATAD2、NY
‑
ESO
‑1和
CAGE。
[0014]在本专利技术的上下文中，“肿瘤相关抗原”在
UniProt
数据库的登记号如下：
[0015]PARP1
：
P09874
[0016]TRIM21
：
P19474
[0017]P53
：
P04637
[0018]BRCA2
：
P51587
[0019]Annexin 11
：
P50995
[0020]ATAD2
：
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【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.
一种乳腺癌的生物标志物，所述生物标志物为自身抗体组合，其包括分别抗以下肿瘤相关抗原的自身抗体中的至少三个：
PARP1、TRIM21、P53、BRCA2、Annexin 11、ATAD2、NY
‑
ESO
‑1和
CAGE。2.
根据权利要求1所述的生物标志物，其特征在于，所述自身抗体组合包括分别抗以下肿瘤相关抗原的自身抗体：
PARP1、TRIM21
和
CAGE
；优选地，所述自身抗体组合还包括分别抗以下肿瘤相关抗原的自身抗体中的至少一个
、
至少两个
、
至少三个
、
至少四个或至少五个：
P53、BRCA2、Annexin 11、ATAD2
和
NY
‑
ESO
‑1；更优选地，所述自身抗体组合还包括抗以下肿瘤抗原的自身抗体中的至少一个
、
至少两个
、
至少三个或至少四个：
Annexin 11、ATAD2、NY
‑
ESO
‑1和
P53。3.
根据权利要求1或2所述的生物标志物，其特征在于，所述自身抗体组合包括分别抗以下肿瘤相关抗原的自身抗体：
(1)PARP1、TRIM21、CAGE
；
(2)PARP1、TRIM21、CAGE、P53
；
(3)PARP1、TRIM21、CAGE、Annexin 11
；
(4)PARP1、TRIM21、CAGE、ATAD2
；
(5)PARP1、TRIM21、CAGE、NY
‑
ESO
‑1；
(6)PARP1、TRIM21、CAGE、BRCA2
；
(7)PARP1、TRIM21、CAGE、Annexin 11、ATAD2
；
(8)PARP1、TRIM21、CAGE、Annexin 11、NY
‑
ESO
‑1；
(9)PARP1、TRIM21、CAGE、Annexin 11、P53
；
(10)PARP1、TRIM21、CAGE、ATAD2、NY
‑
ESO
‑1；
(11)PARP1、TRIM21、CAGE、ATAD2、P53
；
(12)PARP1、TRIM21、CAGE、NY
‑
ESO
‑
1、P53
；
(13)PARP1、TRIM21、CAGE、Annexin 11、ATAD2、NY
‑
ESO
‑1；
(14)PARP1、TRIM21、CAGE、Annexin 11、NY
‑
ESO
‑
1、P53
；
(15)PARP1、TRIM21、CAGE、ATAD2、NY
‑
ESO
‑
1、P53
；
(16)PARP1、TRIM21、P53、BRCA2、Annexin 11、ATAD2、NY
‑
ESO
‑
1、CAGE。4.
根据权利要求1至3中任一项所述的生物标志物，其特征在于，所述自身抗体为受试者的样本例如全血
、
血清
、
血浆
、
组织或细胞
、
组织间隙液
、
脑脊液或尿液中的自身抗体；其中优选地，所述组织或细胞为乳腺组织或细胞
、
乳腺癌组织或细胞或者乳腺癌的癌旁组织或细胞；优选地，所述受试者为哺乳动物，优选为灵长类哺乳动物，更优选为人；优选地，所述自身抗体为
IgA、IgM
或
IgG
；优选地，所述乳腺癌包括导管原位癌和浸润性乳腺癌；其中所述浸润性乳腺癌包括浸润性导管癌
、
浸润性微乳头状癌
、
浸润性小叶癌和粘液分泌癌；或者，所述乳腺癌包括三阴和非三阴乳腺癌
。5.
一种用于检测如权利要求1至4中任一项所述的生物标志物的试剂
。6.
根据权利要求5所述的试剂，其特征在于，所述试剂是用于酶联免疫吸附法
(ELISA)、
蛋白
/
肽段芯片检测
、
免疫印迹
、
微珠免疫检测或微流控免疫检测的试剂；
优选地，所述试剂用于通过抗原抗体反应对所述生物标志物进行检测，例如通过
ELISA
或荧光或化学发光免疫检测
。7.
根据权利要...

【专利技术属性】
技术研发人员：孙苏彭，周兴宇，隗啸南，杨盼盼，周静，孙立平，
申请(专利权)人：杭州凯保罗生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：