用于检测膀胱癌的组合物及其用途制造技术

本申请提供了一种用于检测膀胱癌的组合物及其用途，所述组合物包括：用于检测目标基因甲基化状态的核酸，其中，所述目标基因为

【技术实现步骤摘要】
用于检测膀胱癌的组合物及其用途


[0001]本申请属于分子生物学领域，涉及基因检测，具体的是涉及一种用于检测膀胱癌相关基因甲基化的核酸组合物及其相应的试剂盒和用途
。

技术介绍

[0002]膀胱癌是泌尿系统最常见的恶性肿瘤之一
。
世界范围内，膀胱癌发病率位居恶性肿瘤的第9位，男性恶性肿瘤的第7位
(9.5/10
万
)
，女性为
10
位以后
(2.410/10
万
)
；死亡率居恶性肿瘤的第
13
位，男性死亡率为
(3.2/10
万
)
，女性为
(0.9/10
万
)。
膀胱癌存在地域
、
种族及性别的差异
。
各年龄段均可发病，高发年龄
50
～
70
岁，男性发病率为女性的3～4倍
。
相同分期的膀胱癌患者，男性预后优于女性患者
。
膀胱癌是严重威胁人民健康的恶性肿瘤之一，早期膀胱癌患者如果能得到及时诊断，可以增加手术保留膀胱的机会，提高患者生活质量和总体生存率
。
[0003]目前临床上应用于膀胱癌筛查和诊断的手段主要包括尿细胞学检查，肿瘤标记物检查以及影像学检查
(
包括超声检查
、CT
及
CT
尿路造影
(computedtomogr aphy urography
，
CTU)、MRI
及磁共振尿路成像
(magnetic resonance urography
，
MRU)、
静脉尿路造影
(intravenousurography
，
IVU)、
胸部
X
线摄片或胸部
CT
等
)。
其中，尿脱落细胞学检查的敏感性为
13
％～
75
％，特异性为
85
％～
100
％
。
其敏感性与肿瘤分级呈正相关，高级别肿瘤
(
包括原位癌
)
阳性率达
84
％；
G1
和低级别肿瘤的敏感性为
16
％
。
另外，因尿液肿瘤标志物检测的敏感性高但特异性较低，临床上尚未广泛应用
。
目前膀胱镜检查和活检是诊断膀胱癌最可靠的方法
。
但这种有创筛查有可能引起泌尿男生殖系统感染
、
尿道及膀胱出血
、
尿道损伤和尿道狭窄等并发症
。
因此目前我们急需要找到一种无创且准确率较高的筛查手段
。
[0004]液体活检技术是以血液
、
唾液
、
尿液等体液为检材，以肿瘤标志物等为检测指标，实现对癌症的早筛早诊，辅助分期，预后和复发监测，用药指导等，具有无创
、
高效
、
准确等优点
。
其中，以
DNA
甲基化水平的异常变化作为肿瘤分子诊断的标志物是目前的研究热点之一，并逐渐成为科学界和医学界的共识
。

技术实现思路

[0005]基于此，针对现有膀胱癌检测技术存在的问题，本申请提供了一种用于检测膀胱癌的组合物，本申请提供的组合物能够灵敏和特异地检测膀胱癌，本申请还提供了包含所述组合物的试剂盒以及其在检测膀胱癌中的用途
。
本申请提供的试剂盒具有良好的膀胱癌检测灵敏性，能够方便
、
快捷
、
有效地检测膀胱癌
。
[0006]本申请提供了一种用于体外检测膀胱癌的组合物
、
试剂盒及其用途，以及基于该试剂盒来执行检测的方法，以及用于检测膀胱癌
。
[0007]具体的，本申请采用如下技术方案，
[0008]1.
一种用于体外检测膀胱癌的组合物，所述组合物包括：
[0009]用于检测目标基因甲基化状态的核酸，
[0010]其中，所述目标基因甲基化状态由所述目标基因的靶序列的甲基化来表征，
[0011]其中，所述目标基因为
GATA2
基因
。
[0012]2.
根据项1所述的组合物，其中，所述
GATA2
基因的靶序列为如
SEQ ID NOs:1
‑4中任一项所示的序列或包含
SEQ ID NOs:1
‑4中任一项所示的序列
。
[0013]3.
根据项1‑2中任一项所述的组合物，其中，所述用于检测目标基因甲基化状态的核酸包括：
[0014]引物，所述引物为所述目标基因的靶序列中的至少9个核苷酸的片段，
[0015]所述片段包含至少一个
CpG
二核苷酸序列；
[0016]优选地，所述至少9个核苷酸的片段，其为如
SEQ ID NO:5
和
SEQ ID NO:6
所示的序列，
[0017]优选地，所述用于检测目标基因甲基化状态的核酸包括：
[0018]探针，所述探针为在中等严紧或严紧条件下杂交于所述目标基因的靶序列中的至少
15
个核苷酸的片段，
[0019]所述片段包含至少一个
CpG
二核苷酸序列；
[0020]优选地，所述至少
15
个核苷酸的片段，其为如
SEQ ID NO:7
所述的序列；
[0021]优选地，其还包括：
[0022]将目标基因的靶序列的5位未甲基化胞嘧啶碱基转化为尿嘧啶的试剂
。
[0023]4.
一种用于体外检测膀胱癌的寡核苷酸，其包括：
[0024]SEQ ID NO:1
或
SEQ ID NO:2
或
SEQ ID NO:3
或
SEQ ID NO:4
或其互补序列中的至少9个核苷酸且包含至少一个
CpG
二核苷酸序列的片段
。
[0025]5.
根据项4所述的寡核苷酸，其还包括：
[0026]在中等严紧或严紧条件下杂交于所述
SEQ ID NO:1
或
SEQ ID NO:2
或
SEQ ID NO:3
或
SEQ ID NO:4
或其互补序列中的至少
15
个核苷酸且包含至少一个
CpG
二核苷酸序列的片段
。
[0027]6.
一种用于体外检测膀胱癌的寡核苷酸，其包括：<本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.
一种用于体外检测膀胱癌的组合物，所述组合物包括：用于检测目标基因甲基化状态的核酸，其中，所述目标基因甲基化状态由所述目标基因的靶序列的甲基化来表征，其中，所述目标基因为
GATA2
基因
。2.
根据权利要求1所述的组合物，其中，所述
GATA2
基因的靶序列为如
SEQ ID NOs:1
‑4中任一项所示的序列或包含
SEQ ID NOs:1
‑4中任一项所示的序列
。3.
根据权利要求1‑2中任一项所述的组合物，其中，所述用于检测目标基因甲基化状态的核酸包括：引物，所述引物为所述目标基因的靶序列中的至少9个核苷酸的片段，所述片段包含至少一个
CpG
二核苷酸序列；优选地，所述至少9个核苷酸的片段，其为如
SEQ ID NO:5
和
SEQ ID NO:6
所示的序列，优选地，所述用于检测目标基因甲基化状态的核酸包括：探针，所述探针为在中等严紧或严紧条件下杂交于所述目标基因的靶序列中的至少
15
个核苷酸的片段，所述片段包含至少一个
CpG
二核苷酸序列；优选地，所述至少
15
个核苷酸的片段，其为如
SEQ ID NO:7
所述的序列；优选地，其还包括：将目标基因的靶序列的5位未甲基化胞嘧啶碱基转化为尿嘧啶的试剂
。4.
一种用于体外检测膀胱癌的寡核苷酸，其包括：
SEQ ID NO:1
或
SEQ ID NO:2
或
SEQ ID NO:3
或
SEQ ID NO:4
或其互补序列中的至少9个核苷酸且包含至少一个
CpG
二核苷酸序列的片段
。5.
根据权利要求4所述的寡核苷酸，其还包括：在中等严紧或严紧条件下杂交于所述
SEQ ID NO:1
或
SEQ ID NO:2
或
SEQ ID NO:3
或
SEQ ID NO:4
或其互补序列中的至少
15
个核苷酸且包含至少一个
CpG
二核苷酸序列的片段
。6.
一种用于体外检测膀胱癌的寡核苷酸，其...

【专利技术属性】
技术研发人员：吴宁宁，刘斯文，蔡海利，吴振，周光朋，杨亚东，李永君，
申请(专利权)人：博尔诚北京科技有限公司，
类型：发明
国别省市：