一种早期肺癌联合诊断制造技术

本发明专利技术提出了一种早期肺癌联合诊断

【技术实现步骤摘要】
一种早期肺癌联合诊断RNA标志物及检测试剂盒


[0001]本专利技术涉及基因检测
，尤其涉及一种早期肺癌联合诊断
RNA
标志物及检测试剂盒
。

技术介绍

[0002]肺癌是世界上最常见的恶性肿瘤
。
早期肺癌生存率远远高于晚期肺癌，研究发现一期肺癌的一年存活率可达
85
％，是四期肺癌患者的五倍之多，因此降低肺癌患者死亡率的关键在于早期诊断和早期治疗
。
目前的肺癌检测技术中，传统的侵入性方法，例如组织活检，正逐渐被先进的非侵入性方法所取代，其中，基于生物标志物分子检测的液体活检技术在肺癌早期诊断中拥有广阔的应用前景
。
[0003]CN110699457A
公开了检测肺癌的引物组和试剂盒，其中
MMP1
检测的灵敏度和特异性较差，容易出现假阳性，为此需要一种检测灵敏度和特异性均较好的早期肺癌检测引物组和试剂盒
。

技术实现思路

[0004]有鉴于此，本专利技术提出了一种
MMP1
基因检测灵敏度和特异性均较好的早期肺癌联合诊断
RNA
标志物及检测试剂盒
。
[0005]本专利技术的技术方案是这样实现的：一方面，本专利技术提供了一种早期肺癌联合诊断
RNA
标志物，所述标志物包括
MALAT1、XIST1、MMP1
及
CP
基因，检测所述
MALAT1、XIST1、MMP1
及
CP
基因的引物组包括：
[0006]检测
MALAT1
基因的外引物，序列如
SEQ ID NO.1
‑2所示，检测
MALAT1
基因的内引物，序列如
SEQ ID NO.3
‑4所示；
[0007]检测
XIST1
基因的外引物，序列如
SEQ ID NO.5
‑6所示，检测
XIST1
基因的内引物，序列如
SEQ ID NO.7
‑8所示；
[0008]检测
MMP1
基因的外引物，序列如
SEQ ID NO.9
‑
10
所示，检测
MMP1
基因的内引物，序列如
SEQ ID NO.11
‑
12
所示；
[0009]检测
CP
基因的外引物，序列如
SEQ ID NO.13
‑
14
所示，检测
CP
基因的内引物，序列如
SEQ ID NO.15
‑
16
所示；
[0010]所述
SEQ ID NO.1
‑
16
所示的引物在5’
端均有锁核酸修饰，所述锁核酸从5’
端间隔修饰在引物上，所述
SEQ ID NO.1
‑
16
所示的引物上有3‑6个锁核酸修饰
。
[0011]另一方面，本专利技术提供了一种早期肺癌检测试剂盒，包括上述的引物组
。
[0012]在以上技术方案的基础上，优选的，所述试剂盒还包括
RNA
提取试剂
。
[0013]在以上技术方案的基础上，优选的，所述试剂盒还包括
RNA
逆转录试剂
。
[0014]在以上技术方案的基础上，优选的，所述试剂盒还包括
PCR
试剂
。
[0015]在以上技术方案的基础上，优选的，所述
PCR
扩增试剂包括预扩增
PCR
试剂和实时荧光定量
PCR
试剂；所述预扩增
PCR
试剂包括
SEQ ID NO.1
‑
2、SEQ ID NO.5
‑
6、SEQ ID NO.9
‑
10、SEQ ID NO.13
‑
14
所示的内引物；实时荧光定量
PCR
试剂包括
SEQ ID NO.3
‑
5、SEQ ID NO.7
‑
8、SEQ ID NO11
‑
12、SEQ ID NO.15
‑
16
所示的外引物
。
[0016]在以上技术方案的基础上，优选的，所述试剂盒的诊断方法为：
[0017]对待测者血清中的
MALAT1、XIST1、MMP1
及
CP
表达量进行检测，然后将检测值带入联合诊断预测模型，所述联合诊断预测模型如下公式所示：
[0018]y
＝
0.75
×
x1
‑
0.381
×
x2
‑
0.582
×
x3
‑
0.021
×
x3+3.468
，
AUG
＝
0.9538
；
[0019]y
表示联合预测因子，
x1
表示样本
MALAT1
基因的表达量，
x2
表示
XIST1
基因的表达量，
x3
表示
MMP1
基因的表达量，
x4
表示
CP
基因的表达量；
[0020]y
大于
0.6
时待测样本为阳性，
y
大于
0.3
小于6时待测样本为阴性
。
[0021]本专利技术的一种早期肺癌联合诊断
RNA
标志物及检测试剂盒相对于现有技术具有以下有益效果：本专利技术通过引入
LNA
核苷单体修饰技术，结合多重
PCR
扩增，实现
MALAT1、XIST1、MMP1
及
CP4
个标志物的高灵敏特异性检测
。
附图说明
[0022]为了更清楚地说明本专利技术实施例或现有技术中的技术方案，下面将对实施例或现有技术描述中所需要使用的附图作简单地介绍，显而易见地，下面描述中的附图仅仅是本专利技术的一些实施例，对于本领域普通技术人员来讲，在不付出创造性劳动的前提下，还可以根据这些附图获得其他的附图
。
[0023]图1为引物残留水平
。
具体实施方式
[0024]下面将结合本专利技术实施方式，对本专利技术实施方式中的技术方案进行清楚
、
完整地描述，显然，所描述的实施方式仅仅是本专利技术一部分实施方式，而不是全部的实施方式
。
基于本专利技术中的实施本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.
一种早期肺癌联合诊断
RNA
标志物，其特征在于：所述标志物包括
MALAT1、XIST1、MMP1
及
CP
基因，检测所述
MALAT1、XIST1、MMP1
及
CP
基因的引物组包括：检测
MALAT1
基因的外引物，序列如
SEQ ID NO.1
‑2所示，检测
MALAT1
基因的内引物，序列如
SEQ ID NO.3
‑4所示；检测
XIST1
基因的外引物，序列如
SEQ ID NO.5
‑6所示，检测
XIST1
基因的内引物，序列如
SEQ ID NO.7
‑8所示；检测
MMP1
基因的外引物，序列如
SEQ ID NO.9
‑
10
所示，检测
MMP1
基因的内引物，序列如
SEQ ID NO.11
‑
12
所示；检测
CP
基因的外引物，序列如
SEQ ID NO.13
‑
14
所示，检测
CP
基因的内引物，序列如
SEQ ID NO.15
‑
16
所示；所述
SEQ ID NO.1
‑
16
所示的引物在5’
端均有锁核酸修饰，所述锁核酸从5’
端间隔修饰在引物上，所述
SEQ ID NO.1
‑
16
所示的引物上有3‑6个锁核酸修饰
。2.
一种早期肺癌检测试剂盒，其特征在于：包括权利要求1所述的引物组
。3.
如权利要求2所述的一种早期肺癌检测试剂盒，其特征在于：所述试剂盒还包括
RNA
提取试剂
。4.
如权利要求3所述的一种早期肺癌检测试剂盒，其特征在于：所述试剂盒还包括
RNA
逆转录试剂
。5.
如权利要求4所述的一种早期肺癌检测试剂盒，其特征在于：所述试剂盒还包括
PCR

【专利技术属性】
技术研发人员：任建卫，杨敏，刘俊，
申请(专利权)人：深圳瑞科生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：