一种辅助鉴定具有优良性状的小麦的方法技术

本发明专利技术公开了一种辅助鉴定具有优良性状的小麦的方法。本发明专利技术提供的方法，包括如下步骤：以待测小麦的基因组ＤＮＡ为模板，用序列表的序列３所示ＤＮＡ和序列表的序列４所示ＤＮＡ组成的引物对进行ＰＣＲ扩增，然后进行如下１）至６）中任一所述的判断：１）能扩增出ＤＮＡ片段的小麦的千粒重在统计学上大于不能扩增出ＤＮＡ片段的小麦；２）能扩增出ＤＮＡ片段的小麦的粒径在统计学上大于不能扩增出ＤＮＡ片段的小麦；３）能扩增出ＤＮＡ片段的小麦的穗粒重在统计学上大于不能扩增出ＤＮＡ片段的小麦；４）能扩增出ＤＮＡ片段的小麦的穗粒数在统计学上大于不能扩增出ＤＮＡ片段的小麦；５）能扩增出ＤＮＡ片段的小麦的旗叶面积在统计学大于不能扩增出ＤＮＡ片段的小麦；６）能扩增出ＤＮＡ片段的小麦的旗叶宽度在统计学大于不能扩增出ＤＮＡ片段的小麦。本发明专利技术提供的方法可以应用于小麦的育种，实现早期筛选，节省时间和资源。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及。
技术介绍
长期以来，小麦产量一直是育种家改良和培育品种中最为重要的目标，但产量总 体上受环境影响较大，尤其是水肥条件的影响较大，因此培育广适性品种则成为提高小 麦产量的主要运用手段。近些年，随着分子生物学技术的快速发展，与产量性状相关的 多个QTL位点也逐渐被发现和定位。Groos等(Groos C, Robert N, Bervas Ε, Charmet G.Genetic analysis of grain protein-content, grain yield andthousand—kernel weight in bread wheat. Theor. Appl. Genet. 2003，106 :1032_1040)在小麦的 7D 染色体 上发现了控制小麦产量的QTL，而在染色体7A和7D上则发现了控制籽粒千粒重的QTL。 Quarrie 等(Quarrie SA, Steed A, Calestani C, et al. A high density genetic map of hexaploid wheat(Triticumaestivum L.)from the cross Chinese Spring χ SQl and its use to compare QTLsfor grain yield across a range of environments. Theor. Appl. Genet. 2005,110 865-880 ；Quarrie SA, Pekic Quarrie S, Radosevic R, et al. Dissecting a wheatQTL for yield present in a range of environments :from the QTL to candidategenes, J Exp. Botany 2006，57 :2627_2637)则在一个 DH 群体中发现了 多个控制产量性状的QTL位点，其中7AL和7BL上的QTL贡献最大，尤其是对小麦穗粒数的 贡献率最高，他还在7AL上发现了控制小麦粒重的QTL。Wilkinson φ (Wilkinson Μ, Wan Y, Tosi P, et al. Identification and geneticmapping of variant forms of puroindoline b expressed in developing wheat grain. J Cereal Sci，2008，48 :722_728)在小麦的 cDNA 中发现了三种与 puroindoline b基因相似性达72%的基因，并将其定位在7A染色体的长臂上，进一步分析表明，该 基因可能能够调控硬质小麦SKCS硬度5-7左右。Chen等(Chen F，Brian B, Morris CF. Puroindoline b~2 in wheat. Theoretical and applied genetics,2009,D0I10. 1007/ s00122-009-1195-y)对上述三个基因进行了命名，分别为Pinb_2vl、Pinb_2v2和 Pinb-2v3，并发现了一种新的基因类型，命名为Pinb-2v4，利用非整倍体进行物理定位后发 现，Pinb-2vl位于7DL染色体上，Pinb_2v2位于7BL染色体上，Pinb_2v3位于7B染色体 上，Pinb-2v4则位于7AL染色体上，且Pinb_2vl和Pinb_2v4出现在调查的所有品种中，而 Pinb-2v2和Pinb-2v3则分别出现在不同的品种中。
技术实现思路
本专利技术的目的是提供。本专利技术提供的辅助鉴定具有不同性状小麦的方法，包括如下步骤以待测小麦的 基因组DNA为模板，用序列表的序列3所示DNA和序列表的序列4所示DNA组成的引物对 进行PCR扩增，然后进行如下1)至6)中任一所述的判断1)能扩增出DNA片段的小麦的千粒重在统计学上大于不能扩增出DNA片段的小 麦；2)能扩增出DNA片段的小麦的粒径在统计学上大于不能扩增出DNA片段的小麦；3)能扩增出DNA片段的小麦的穗粒重在统计学上大于不能扩增出DNA片段的小 麦；4)能扩增出DNA片段的小麦的穗粒数在统计学上大于不能扩增出DNA片段的小 麦；5)能扩增出DNA片段的小麦的旗叶面积在统计学大 于不能扩增出DNA片段的小 麦；6)能扩增出DNA片段的小麦的旗叶宽度在统计学大于不能扩增出DNA片段的小麦。1)至6)中，所述DNA片段具体可为398bp的DNA片段。本专利技术还保护序列表的序列3所示DNA和序列表的序列4所示DNA组成的引物对。所述引物对在制备辅助鉴定具有不同性状小麦的试剂盒中的应用也属于本专利技术 的保护范围；所述性状为千粒重、粒径、穗粒数、每穗粒重(穗粒重)、旗叶面积和旗叶宽度 中的至少一种。本专利技术还保护一种辅助鉴定具有不同性状小麦的试剂盒，包括所述引物对；所述 性状为千粒重、粒径、穗粒数、每穗粒重、旗叶面积和旗叶宽度中的至少一种。本专利技术提供的另一种辅助鉴定具有不同性状小麦的方法，是检测待测小麦的基因 组DNA中是否具有序列表的序列2所示核苷酸，然后进行如下1)至6)中任一所述的判断1)基因组DNA中具有序列表的序列2所示核苷酸的小麦的千粒重在统计学上小于 基因组DNA中不具有序列表的序列2所示核苷酸的小麦；2)基因组DNA中具有序列表的序列2所示核苷酸的小麦的粒径在统计学上大于基 因组DNA中不具有序列表的序列2所示核苷酸的小麦；3)基因组DNA中具有序列表的序列2所示核苷酸的小麦的穗粒重在统计学上大于 基因组DNA中不具有序列表的序列2所示核苷酸的小麦；4)基因组DNA中具有序列表的序列2所示核苷酸的小麦的穗粒数在统计学大大于 基因组DNA中不具有序列表的序列2所示核苷酸的小麦；5)基因组DNA中具有序列表的序列2所示核苷酸的小麦的旗叶面积在统计学大于 基因组DNA中不具有序列表的序列2所示核苷酸的小麦；6)基因组DNA中具有序列表的序列2所示核苷酸的小麦的旗叶宽度在统计学大于 基因组DNA中不具有序列表的序列2所示核苷酸的小麦。本专利技术提供的第三种辅助鉴定具有不同性状小麦的方法，是检测待测小麦的基因 组DNA中是否具有序列表的序列2自5’端第42至439位所示核苷酸，然后进行如下1)至 6)中任一所述的判断1)基因组DNA中具有序列表的序列2自5，端第42至439位所示核苷酸的小麦的 千粒重在统计学上大于基因组DNA中不具有序列表的序列2自5’端第42至439位所示核 苷酸的小麦；2)基因组DNA中具有序列表的序列2自5，端第42至439位所示核苷酸的小麦的粒径在统计学上大于基因组DNA中不具有序列表的序列2自5’端第42至439位所示核苷 酸的小麦；3)基因组DNA中具有序列表的序列2自5，端第42至439位所示核苷酸的小麦的 穗粒重在统计学上大于基因组DNA中不具有序列表的序列2自5’端第42至439位所示核 苷酸的小麦；4)基因组DNA中具有序列表的序列2自5’端第42至439位所示核苷酸的小麦的 穗粒数在统计学上大于基因组DNA中本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种辅助鉴定具有不同性状小麦的方法，包括如下步骤：以待测小麦的基因组ＤＮＡ为模板，用序列表的序列３所示ＤＮＡ和序列表的序列４所示ＤＮＡ组成的引物对进行ＰＣＲ扩增，然后进行如下１）至６）中任一所述的判断：１）能扩增出ＤＮＡ片段的小麦的千粒重在统计学上大于不能扩增出ＤＮＡ片段的小麦；２）能扩增出ＤＮＡ片段的小麦的粒径在统计学上大于不能扩增出ＤＮＡ片段的小麦；３）能扩增出ＤＮＡ片段的小麦的穗粒重在统计学上大于不能扩增出ＤＮＡ片段的小麦；４）能扩增出ＤＮＡ片段的小麦的穗粒数在统计学上大于不能扩增出ＤＮＡ片段的小麦；５）能扩增出ＤＮＡ片段的小麦的旗叶面积在统计学大于不能扩增出ＤＮＡ片段的小麦；６）能扩增出ＤＮＡ片段的小麦的旗叶宽度在统计学大于不能扩增出ＤＮＡ片段的小麦。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：陈锋，崔党群，许海霞，詹克慧，程西永，董中东，
申请(专利权)人：河南农业大学，
类型：发明
国别省市：41[中国|河南]