一种靶向曲妥珠单抗的抗体及其用途制造技术

本申请提供了一种靶向曲妥珠单抗的抗体及其用途

【技术实现步骤摘要】
一种靶向曲妥珠单抗的抗体及其用途


[0001]本申请通常涉及抗体领域
。
更具体地，本申请涉及一种靶向曲妥珠单抗的抗体的制备和用途
。

技术介绍

[0002]表皮生长因子受体家族 (epidermal growth factor receptor family, ErbB family) 包括
erbB1(EGFR,HER1)
，
erbB2(HER2)
，
erbB3(HER3)
和
erbB4 (HER4)
四个家族成员
。HER2
蛋白具有酪氨酸蛋白激酶活性，与
EGFR
家族其它成员异源二聚化发挥信号传导功能
。HER2
过表达导致受体胞质内酪氨酸残基自磷酸化，启动信号通路，导致细胞异常增殖，在乳腺癌
、
胃癌
、
结肠直肠癌和肺癌等肿瘤的发生发展过程发挥重要作用，
HER2
因而成为理想的肿瘤治疗靶点
。
[0003]曲妥珠单抗是
1990
年开发的第一个抗
HER2
单克隆抗体，通过抑制受体二聚化
、
受体内化和降解
、
抑制 PI3K
‑
AKT
信号通路等多种机制干扰
HER2
信号传导通路
。
临床试验证实化疗联合曲妥珠单抗可提高 HER2
阳性转移性乳腺癌女性的总生存期，因此曲妥珠单抗成为转移性和早期
HER2
阳性乳腺癌的一线治疗药物
。
[0004]随着曲妥珠单抗在临床肿瘤应用范畴的不断扩大，需要检测血液中抗体的含量，进行药物的药代动力学分析；监测抗药抗体
(Anti
‑
drug antibody
，
ADA)
的产生情况，指导临床合理用药，因此制备出能够抗曲妥珠单抗的抗体非常有必要
。
抗曲妥珠单抗的抗体识别曲妥珠单抗的可变区，并产生特异性结合的抗体
。
抗曲妥珠单抗的抗体可以分为竞争型
(
抗原阻断型
)
和非竞争型
(
抗原非阻断型
)
两种
。

技术实现思路

[0005]为满足临床患者曲妥珠单抗的检测需求，本文中提供一种靶向曲妥珠单抗的独特型抗体
。
具体而言，本申请提供了以下技术方案
。
[0006]在第一方面，本申请提供了特异性结合曲妥珠单抗的抗体或其抗原结合部分，其包含重链可变区和轻链可变区，所述重链可变区包含
HCDR1、HCDR2
和
HCDR3
，其中按照
Kabat
编号系统，所述轻链可变区包含
LCDR1、LCDR2
和 LCDR3
，其中所述
HCDR1
的氨基酸序列如
SEQ ID NO:1
所示，所述
HCDR2
的氨基酸序列如
SEQ ID NO:2
所示，所述
HCDR3
的氨基酸序列如
SEQ ID NO:3
所示，所述
LCDR1
的氨基酸序列如
SEQ ID NO:4
所示，所述
LCDR2
的氨基酸序列如
SEQ ID NO:5
所示，并且所述
LCDR3
的氨基酸序列如
SEQ ID NO:6
所示；或者按照
IMGT
编号系统，所述
HCDR1
的氨基酸序列如
SEQ ID NO:9
所示，所述
HCDR2
的氨基酸序列如
SEQ ID NO:10
所示，所述
HCDR3
的氨基酸序列如
SEQ ID NO:11
所示，所述
LCDR1
的氨基酸序列如
SEQ ID NO:12
所示，所述
LCDR2
的氨基酸序列如
SEQ ID NO:14
所示，并且所述
LCDR3
的氨基酸序列如
SEQ ID NO:13
所示
。
[0007]在第二方面，本申请提供了核酸分子，其编码第一方面所述的抗体或其抗原结合部分
。
[0008]在第三方面，本申请提供了表达载体，其包含第二方面所述的核酸分子
。
[0009]在第四方面，本申请提供了宿主细胞，其包含第二方面所述的核酸分子或第三方面所述的表达载体
。
[0010]在第五方面，本申请提供了制备第一方面所述的抗体或其抗原结合部分的方法，其包括：
a) 培养第四方面所述的宿主细胞；和
b) 从所述宿主细胞中或所述宿主细胞的培养物上清中回收所述抗体或其抗原结合部分
。
[0011]在第六方面，本申请提供了检测试剂或试剂盒，其包含第一方面所述的抗体或其抗原结合部分
。
[0012]在第七方面，本申请提供了第一方面所述的抗体或其抗原结合部分用于检测受试者的生物样品中的曲妥珠单抗的用途
。
[0013]在第八方面，本申请提供了第一方面所述的抗体或其抗原结合部分用于测定施用了曲妥珠单抗的患者的生物样品中的曲妥珠单抗的含量的用途
。
[0014]本申请制备的特异性结合曲妥珠单抗的抗体不但可以为血液中药物浓度监测提供技术支持，而且还可以作为
ADA
检测的阳性参照
。
附图说明
[0015]图1显示了曲妥珠单抗经
Ide S
酶切前后的
SDS
‑
PAGE
电泳图，其中
M: 蛋白
Marker
；
1,2
：非还原条件和还原条件下的曲妥珠单抗；
3,4
：非还原条件和还原条件下的曲妥珠单抗
F(ab
’
)2
片段
;
图2显示了本申请制备的抗曲妥珠单抗的抗体
9G6
影响
Her2
阳性乳腺癌细胞
SKBR3
与曲妥珠单抗结合的流式细胞术检测结果，其中曲妥珠单抗与
SKBR3
细胞结合，峰图右移，加入免疫小鼠的血清阳性对照后峰图左移，
9G6
克隆抗体的结果与免疫血清相似，峰图左移
;
图3显示了采用
HEK293
细胞表达的抗曲妥珠单抗的抗体
9G6
的
SDS
‑
PAGE
电泳图和亲和力测定
。A
：抗曲妥珠单抗的抗体
9本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.
特异性结合曲妥珠单抗的抗体或其抗原结合部分，其包含重链可变区和轻链可变区，所述重链可变区包含
HCDR1、HCDR2
和
HCDR3
，所述轻链可变区包含
LCDR1、LCDR2
和 LCDR3
，其中按照
Kabat
编号系统，所述
HCDR1
的氨基酸序列如
SEQ ID NO:1
所示，所述
HCDR2
的氨基酸序列如
SEQ ID NO:2
所示，所述
HCDR3
的氨基酸序列如
SEQ ID NO:3
所示，所述
LCDR1
的氨基酸序列如
SEQ ID NO:4
所示，所述
LCDR2
的氨基酸序列如
SEQ ID NO:5
所示，并且所述
LCDR3
的氨基酸序列如
SEQ ID NO:6
所示；或者按照
IMGT
编号系统，所述
HCDR1
的氨基酸序列如
SEQ ID NO:9
所示，所述
HCDR2
的氨基酸序列如
SEQ ID NO:10
所示，所述
HCDR3
的氨基酸序列如
SEQ ID NO:11
所示，所述
LCDR1
的氨基酸序列如
SEQ ID NO:12
所示，所述
LCDR2
的氨基酸序列如
SEQ ID NO:14
所示，并且所述
LCD...

【专利技术属性】
技术研发人员：欧伦，王雪莉，王变珍，谢新遥，
申请(专利权)人：军科正源北京药物研究有限责任公司，
类型：发明
国别省市：