一种制造技术

本发明专利技术公开了一种

【技术实现步骤摘要】
一种DNA聚合酶热稳定性检测方法及系统


[0001]本专利技术涉及
DNA
聚合酶
，具体涉及一种
DNA
聚合酶热稳定性检测方法及系统
。

技术介绍

[0002]中国专利
CN111073871A
公开了一种热稳定性提高的
DNA
聚合酶突变体及其构建方法和应用
。
本专利技术提供的
DNA
聚合酶突变体包括单点突变体和组合突变体，与野生型
DNA
聚合酶
(AAA32368.1)
相比，其单点突变体和组合突变体在
65℃
下半衰期均更长；尤其是组合突变体，表现出单点突变体热稳定性的叠加效果，其半衰期大约是野生型
DNA
聚合酶
(AAA32368.1)
的3倍；
[0003]现有技术中，
DNA
聚合酶在进行热稳定性检测时，可能由于在对溶液体系进行温度等主要因素控制时，存在着不稳定等原因，从而对
DNA
聚合酶热稳定性检测产生误差，导致检测的结果不够准确地问题
。

技术实现思路

[0004]本专利技术的目的就在于解决上述
技术介绍
的问题，而提出一种
DNA
聚合酶热稳定性检测方法及系统
。
[0005]本专利技术的目的可以通过以下技术方案实现：
[0006]一种
DNA
聚合酶热稳定性检测系统，包括
:
[0007]检测模块，通过热稳定值对
DNA
聚合酶在温度变化的状态下进行检测分析；
[0008]该检测模块具体工作过程如下：
[0009]步骤1：获取到升温热稳定值
ZWS
和降温热稳定值
ZWJ
，通过公式
XW
＝
l n(a3*ZWS+a4*ZWJ)2，计算得到聚合酶热稳定系数
XW
；其中，
a3、a4
均为比例系数，
a3
取值为
1.02
，
a4
取值为
1.05
；
[0010]步骤2：将得到的聚合酶热稳定系数
XW
与聚合酶热稳定系数阈值进行比较；
[0011]若聚合酶热稳定系数
XW≤
聚合酶热稳定系数阈值时，生成稳定合格信号；
[0012]若聚合酶热稳定系数
XW>
聚合酶热稳定系数阈值时，生成稳定不合格信号；
[0013]分析模块，当得到检测模块的稳定不合格信号时，获取到聚合酶热稳定系数
XW
进行分析处理；
[0014]调控模块，当获取到热影响异常信号时，对温度进行调节，保证
DNA
聚合酶在热稳定检测时的稳定性
。
[0015]作为本专利技术进一步的方案：热稳定值包括
DNA
聚合酶在升温过程中以变温速度
VT
从初始温度
TC
到终止温度
TZ
时间段内的升温热稳定值，标记为
ZWS
，和在降温过程中
DNA
聚合酶以变温速度
VT
从初始温度
TC
到终止温度
TZ
时间段内的降温热稳定值
,
标记为
ZWJ。
[0016]作为本专利技术进一步的方案：升温热稳定值和降温热稳定值通过获取到
DNA
聚合酶活性值和半衰期值，并分别标记为
ZHm
和
ZSm
；以及，对应的
DNA
聚合酶活性标准值和半衰期
标准值，并分别标记为
ZHmb
和
ZSmb。
[0017]作为本专利技术进一步的方案：升温热稳定值和降温热稳定值分析通过以下公式计算得到的；具体为：
ZWS
＝
a1*(ZHm/ZHmb)+a2*(ZSm/ZSmb)
和
ZWJ
＝
a1*(ZHm/ZHmb)+a2*(ZSm/ZSmb)
；其中，
a1、a2
均为比例系数
。
[0018]作为本专利技术进一步的方案：分析模块具体工作过程如下：
[0019]步骤1：获取到检测时间段内，
DNA
聚合酶热稳定性检测的实时温度值和温度速度变化值，分别标记为
TJm
和
VTm
，并分别构建集合
A{TJ1
，
TJ2
，
…
，
TJm}
和集合
B{VT1
，
VT2
，
…
，
VTm}
，其中
m
表示时间间隔；
[0020]步骤2：根据集合
A
和集合
B
，获取到温度均值和温度速度变化均值，并分别标记为
TJJ
和
VTJ
，以及对应地集合中所有子集进行差值计算，而得到温度差值和温度速度变化差值，并分别标记为
TJC
和
VTC
；
[0021]步骤3：将得到的温度均值
TJJ、
温度速度变化均值
VTJ、
温度差值
TJC
和温度速度变化差值
VTC
，代入到公式
XR
＝
b1*(TJC/TJJ)+b2*(VTC/VTJ)
中，计算得到热影响系数
XR
；其中，
b1、b2
均为比例系数
。
[0022]作为本专利技术进一步的方案：将得到的热影响系数
XR
与热影响系数阈值进行比较；
[0023]若热影响系数
XR≤
热影响系数阈值时，生成热影响异常信号；
[0024]若热影响系数
XR>
热影响系数阈值时，生成热影响正常信号
。
[0025]作为本专利技术进一步的方案：调控模块具体工作过程如下：
[0026]步骤1：获取到变温速度
VT、
初始温度
TC、
终止温度
TZ、
温度均值
TJJ
和温度速度变化均值
VTJ
；通过公式
XT
＝
c1*(2TJJ)/(TC+TZ)+c2*VTJ/VT
，计算得到调节系数
XT
；
[0027]步骤2：获取到当前温度值，并标记为
ZTd
，通过公式
ZT
＝
(1+XT)*ZTd
，计算得到调节温度...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.
一种
DNA
聚合酶热稳定性检测系统，其特征在于，包括
:
检测模块，通过热稳定值对
DNA
聚合酶在温度变化的状态下进行检测分析；该检测模块具体工作过程如下：步骤1：获取到升温热稳定值
ZWS
和降温热稳定值
ZWJ
，通过公式
XW
＝
ln(a3*ZWS+a4*ZWJ)2，计算得到聚合酶热稳定系数
XW
；其中，
a3、a4
均为比例系数，
a3
取值为
1.02
，
a4
取值为
1.05
；步骤2：将得到的聚合酶热稳定系数
XW
与聚合酶热稳定系数阈值进行比较；若聚合酶热稳定系数
XW≤
聚合酶热稳定系数阈值时，生成稳定合格信号；若聚合酶热稳定系数
XW>
聚合酶热稳定系数阈值时，生成稳定不合格信号；分析模块，当得到检测模块的稳定不合格信号时，获取到聚合酶热稳定系数
XW
进行分析处理；调控模块，当获取到热影响异常信号时，对温度进行调节，保证
DNA
聚合酶在热稳定检测时的稳定性
。2.
根据权利要求1所述的一种
DNA
聚合酶热稳定性检测系统
,
其特征在于，热稳定值包括
DNA
聚合酶在升温过程中以变温速度
VT
从初始温度
TC
到终止温度
TZ
时间段内的升温热稳定值，标记为
ZWS
，和在降温过程中
DNA
聚合酶以变温速度
VT
从初始温度
TC
到终止温度
TZ
时间段内的降温热稳定值
,
标记为
ZWJ。3.
根据权利要求2所述的一种
DNA
聚合酶热稳定性检测系统
,
其特征在于，升温热稳定值和降温热稳定值通过获取到
DNA
聚合酶活性值和半衰期值，并分别标记为
ZHm
和
ZSm
；以及，对应的
DNA
聚合酶活性标准值和半衰期标准值，并分别标记为
ZHmb
和
ZSmb。4.
根据权利要求3所述的一种
DNA
聚合酶热稳定性检测系统
,
其特征在于，升温热稳定值和降温热稳定值分析通过以下公式计算得到的；具体为：
ZWS
＝
a1*(ZHm/ZHmb)+a2*(ZSm/ZSmb)
和
ZWJ
＝
a1*(ZHm/ZHmb)+a2*(ZSm/ZSmb)
；其中，
a1、a2
均为比例系数
。5.
根据权利要求4所述的一种
DNA
聚合酶热稳定性检测系统
,
其特征在于，分析模块具体工作过程如下：步骤1：获取到检测时间段内，
DNA
聚合酶热稳定性检测的实时温度值和温度速度变化值，分别标记为
TJm
和
VTm
，并分别构建集合
A{TJ1
，
TJ2
，
…
，
TJm}
和集合
B{VT1
，
VT2
，
…
，
VTm}
，其中
m
表示时间间隔；步骤2：根据集合
A
和集合
B
，获取到温度均值和温度速度变化均值，并分别标记为
TJ...

【专利技术属性】
技术研发人员：李森，张伦，黄策，李娇，
申请(专利权)人：通用生物南京有限公司，
类型：发明
国别省市：