一种富硒酵母培养物的生产方法技术

本发明专利技术涉及一种富硒酵母培养物生产方法。其特征在于：选用并筛选耐受高硒的热带假丝酵母菌和酿酒酵母菌，通过液体－固体两相发酵方法进行生产。方法流程包括：菌种筛选、菌种逐级扩大培养、液体发酵转化无机硒、固体有氧发酵与厌氧发酵破壁、干燥。干燥后的成品含有有机硒０．０５％～０．５％。利用本发明专利技术技术无机硒转化成有机硒的比例在９８％以上。本发明专利技术具有方法简单、生产成本低、产品质量好等特点，生产出的富硒酵母培养物兼有有机硒与益生饲料的双重作用，可用于畜禽水产饲料。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及微生物培养物及其微生物发酵方法，具体地说涉及一种富硒酵母培养物的生产方法。
技术介绍
硒是动物必需的微量元素。由于无机硒具有毒性，利用率低，出于环保要求，添加量受到限制，提倡使用有机硒。目前有机硒主要有硒代蛋氨酸，纳米硒和酵母硒。酵母硒是将酵母细胞培养在含无机硒培养基中，通过生物转化将无机硒转变成有机硒而得到的。主要结合形式包括取代含硫氨基酸中的硫以及以共价键同肽、蛋白结合，少量同多糖结合。 目前国际上酵母硒产品，多通过液体发酵、固体吸附方法进行生产。该类方法存在以下不足(1)酵母发酵生成的益生成分有限；(2)投资额度大；(3)无机硒的转化率较低，因而生产成本高；(4)存在废液废渣排放的问题，有必要加以进一步改进。 CN1836545涉及富硒禽饲料制备方法，特征在于如何使用酵母硒，并未涉及发酵方法；CN101139554涉及中草药酵母硒的固态发酵制备方法，特征在于结合中草药固体发酵，重点在中草药，很难保证获得稳定的硒转化率；CN1618316涉及奶牛热应激缓解剂及其制备方法和应用，特征在于如何使用酵母硒，并未涉及发酵方法。 本专利技术采取的方法是在液体发酵的基础上，引入固体发酵，采用液体与固体两相发酵方法，在固体发酵阶段对富硒酵母进行破壁，生产富硒酵母培养物。酵母培养物(Yeastculture)方法不同于常见的活细胞酵母方法，要在菌体达到一定数量后进行破壁，酵母培养物不含许多活酵母菌，而以酵母发酵的代谢产物、变性培养基、酵母细胞壁和酵母内容物为主。目前还没有采用液体_固体两相发酵方法，将酵母培养物与硒转化结合在一起的现有技术。 专利技术内容本专利技术要解决的技术问题是提供一种能够实现充分富硒的通过液体与固体两相发酵生产富硒酵母培养物的方法。 在一个实施方案中，所述生产酵母培养物的方法包括 (1)菌种筛选通过酵母在无机硒或有机硒培养基中的生长表现确定所用菌株； (2)利用(1)中确定的菌株进行菌种逐级扩大培养； (3)在含有无机硒或有机硒的液体培养基中用酵母菌进行液体发酵转化； (4)液体发酵后，将液体发酵液与固体培养基混合，进行固体发酵，所述固体发酵包括先进行固体有氧发酵，再进行固体厌氧发酵并对酵母进行破壁； (5)对固体发酵产物进行干燥得到成品。 在一个实施方案中，本专利技术所述酵母为热带假丝酵母或酿酒酵母。 在一个实施方案中，本专利技术所述无机硒为正四价无机硒或正六价无机硒，优选为亚硒酸钠。 在一个实施方案中，本专利技术所述有机硒为蛋白硒、氨基酸硒或多糖硒。 本专利技术方法中的菌种筛选步骤中，可通过酵母在高浓度正四价或正六价无机硒培养基中的生长表现确定所用菌株，所述浓度优选为0. 1% 0. 5%重量。 本专利技术的菌种扩大培养可以是逐级扩大培养，可包括斜面培养、摇瓶扩大培养和种子罐扩大培养，优选包括平皿培养和斜面、摇瓶培养。 在本专利技术的液体发酵转化步骤中，液体培养基中无机硒或有机硒含量可以为0. 05% 0. 4%重量，优选0. 1% 0. 2%重量。 在本专利技术的液体发酵转化步骤中，液体发酵转化时间可以为12 48小时，优选18 48小时。 在本专利技术的固体发酵步骤中，可以将液体发酵液与固体培养基按i : 3 1.5 : i重量，优选i : 2重量的比例混合。 本专利技术所述固体培养基可以含有豆粕(饼)、棉粕(饼)、菜粕(饼)、花生粕(饼)、胡麻粕(饼)、甜菜粕(饼)、麦麸、稻糠、次粉、木薯粉、大豆皮、玉米酒精糟、玉米或大米，或者其中一种或多种的混合物；优选含有豆粕(饼)、棉粕(饼)、菜粕(饼)、玉米或麦麸，或者其中一种或多种的混合物。 本专利技术方法中所用的固体培养基可以直接使用或经过灭菌处理后使用。 本专利技术的固体发酵可以利用堆放、容器、袋或固体发酵反应器进行。 在本专利技术方法的一个实施方案中，所述固体有氧发酵进行16-36小时，优选24-36小时。 在本专利技术方法的一个实施方案中，所述固体厌氧发酵并对酵母进行破壁的过程在40 6(TC，优选在5(TC下进行。该过程可进行6 24小时，优选12小时。 本专利技术方法中，对固体发酵产物进行干燥得到成品。所述干燥包括流化床、气流、滚筒干燥。可干燥至成品水分低于15%重量，优选低于13%重量。 本领域技术人员可以理解，本专利技术各实施方案中的技术特征可以相互组合，得到多种实施方案。 在一个优选实施方案中，本专利技术提供了一种能够实现充分富硒的通过液体-固体两相发酵生产酵母培养物的方法，所述方法包括 (1)菌种筛选用热带假丝酵母或酿酒酵母，经过在高浓度正四价无机硒(0. 1% 0. 5% )培养基中的生长表现确定所用菌株； (2)菌种逐级扩大培养经过斜面、摇瓶和种子罐扩大培养； (3)液体发酵转化液体培养基中正四价无机硒含量为0.05% 0.4%，优选0. 1% 0. 2% ;液体发酵转化时间为12 48小时，优选18 26小时； (4)液体发酵液与固体培养基混合，液体发酵结束后，培养液与固体培养基按i : 3 1.5 : i，优选i : i重量比例混合，进入固体发酵阶段。这里所述的固体培养基是指含有豆粕(饼)、棉粕(饼)、菜粕(饼)、花生粕(饼)、胡麻粕(饼)、甜菜粕(饼)、麦麸、稻糠、次粉、木薯粉、大豆皮、玉米酒精糟、玉米、大米中的一种或多种混合物，优选豆粕(饼)、棉粕(饼)、菜粕(饼)、玉米、麦麸中的一种或多种混合物； 这里所述的固体发酵是指对固体培养基直接或灭菌处理后，利用堆放、容器、袋或固体发酵反应器进行的发酵生产过程，又分为有氧和厌氧发酵两个阶段。 (5)固体有氧发酵有氧发酵16-36小时，优选16_24小时； (6)固体厌氧发酵固体有氧发酵结束后，对酵母进行破壁，条件是保持40 6(TC，固体厌氧发酵6 24小时，优选5(TC发酵6 10小时； (7)成品对固体发酵产物进行干燥得到成品；这里所述的干燥是指流化床、气流、滚筒干燥。成品水分低于15%，优选低于13%，有机硒0.05% 0. 3%，气味芳香。 在本专利技术方法的另一个优选实施方案中，培养基中无机硒含量为0. 1% ;液体发酵转化时间为18小时；培养液按1 : l重量比例同固体培养基混合；固体培养基其特征在于含有豆粕(饼)、棉粕(饼)、菜粕(饼)、玉米、麦麸中的一种或多种混合物；固体有氧发酵24小时；固体厌氧发酵50°C， 10小时；成品干燥到水分13%以下。 在本专利技术方法的另一个优选实施方案中，所述液体培养基中无机硒或有机硒含量为0. 2%重量，且液体发酵转化时间为48小时，其中所述固体发酵步骤中，液体发酵液与固体培养基按l : 3重量的比例混合，其中所述固体有氧发酵进行36小时，且所述固体厌氧发酵并对酵母进行破壁的过程在5(TC以下进行12小时。 本专利技术方法所得成品，可包含有机硒0. 05% 0. 5%重量，且气味芳香。 在一个实施方案中，本专利技术提供由本专利技术的富硒酵母培养物生产方法生产的富硒酵母培养物，该富硒酵母培养物包含有机硒0. 05% 0. 5%重量，且气味芳香。 通过固体发酵微生物在固体培养基继续增殖，扩大产品变性培养基、代谢产物、酵母细胞壁、内容物等益生成分比例，硒得以进一步随着酵母裂殖均匀分散，提升产品生物学价值。 本专利技术的产品与方法相对于现有技术的优点 (1)本专利技术吸取有关微本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种生产富硒酵母培养物的方法，所述方法包括：　　（１）菌种筛选：通过酵母在无机硒或有机硒培养基中的生长表现确定所用菌株；　　（２）利用（１）中确定的菌株进行菌种逐级扩大培养；　　（３）在含有无机硒或有机硒的液体培养基中用酵母菌进行液体发酵转化；　　（４）液体发酵后，将液体发酵液与固体培养基混合，进行固体发酵，所述固体发酵包括：先进行固体有氧发酵，再进行固体厌氧发酵，并对酵母进行破壁；　　（５）对固体发酵产物进行干燥得到成品。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：潘军，
申请(专利权)人：广州市博善生物饲料有限公司，
类型：发明
国别省市：81[中国|广州]