脱氢水飞蓟宾双醚用于制备防治白血病的药物的用途制造技术

本发明专利技术“脱氢水飞蓟宾双醚用于制备防治白血病的药物的用途”涉及一种木质素黄酮水飞蓟宾防治慢性髓性白血病的医药用途，具体而言，本发明专利技术涉及一个７位和２０位１－丁烯取代的脱氢水飞蓟宾双醚或其可药用盐在制备防治慢性髓性白血病药物中的应用。该化合物可以由天然产物水飞蓟宾经简单步骤合成制备而得。经药理实验证明，该化合物对人慢性髓源性白血病细胞株（Ｋ５６２）及其阿霉素耐药株（Ｋ５６２／ＡＤＲ）体外增殖均有强效抑制作用，其ＩＣ５０值分别为１１．９±１．６微摩尔和１５．９±１．２微摩尔。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及天然药物化学和药理学领域，具体而言，本专利技术涉及7位和20位1-丁 烯取代的脱氢水飞蓟宾双醚或其可药用盐在制备防治白血病药物的用途，本专利技术发现该 化合物对人慢性髓源性白血病细胞株(K562)及其阿霉素耐药株(K562/ADR)体外增殖具有 强效抑制作用，可以预期用于制备治疗相关的人慢性髓源性白血病药物的用途。
技术介绍
随着社会的飞速发展，罹患肿瘤疾病的人群数目越来越庞大。我国肿瘤年发病已 经接近200万例，跃居发病率与死亡率前列。世界范围内情路昂同样严峻，发达国家政府持 续多年投入了巨额经费意欲攻克之，然效果尚不十分理想。目前肿瘤发病率居高不下，治疗 上除了正在逐渐兴起的基因治疗外，常规的药物治疗结合化疗还是一线治疗手段。干细胞 治疗尚需时日，故而研发新型的更有效的治疗用药物仍是近期研发之热点。抗癌植物药是 抗肿瘤药物中的一大类，研究者们从植物药中发现了多种一线抗肿瘤用药，如紫杉醇和多 烯紫杉醇，三尖杉酯碱，喜树碱，冬凌草甲素，莪术油等等。说明以大自然为依托，以天然产 物为先导化合物，是可以寻找出许多符合抗肿瘤要求的治疗用药的。 肿瘤多药耐药(multidrug resistance, MDR)是指一种药物作用于肿瘤使之产 生耐药性后，对其未接触过的、结构无关、机制各异的多种抗肿瘤药物也具有交叉耐药性， 也即肿瘤细胞对结构、细胞靶点和作用机理迥然不同的抗癌药物同时产生耐药的现象，是 肿瘤化疗失败的最主要原因之一。MDR的形成机制非常复杂，目前研究报道显示，MDR可 能跟P.糖蛋白(PgP)、多药耐药相关蛋白(MRP)、谷胱甘肽-s-转移酶(GST)、拓扑异构酶 II (Topo II)、蛋白激酶C(PKC) 、二氢叶酸还原酶(DHFR)和DNA损伤修复相关酶等的表达及 活性改变有关。MDR逆转剂的使用是现期克服多药耐药性的一种重要的解决途径。故此，寻 找MDR逆转剂、探讨先导化合物逆转MDR和抗MDR的机理有着重要的理论意义和实用价值。 近年来研究者发现了多种化学逆转剂，如维拉帕米(VRP)、环孢菌素A(CsA)、三苯 氧胺等，但这些化学逆转剂大都存在作用靶点单一，体内应用可引起不同程度的不良反应 或逆转效果不佳等问题，从而限制了其临床应用。于是国内外许多学者转向从天然药物中 寻找高效、低毒、多靶点的逆转剂，并已在白血病、肝癌、乳腺癌、口腔上皮样癌等肿瘤对长 春新碱(VCR)、阿霉素(ADR)、柔红霉素(DNR)、依托泊苷(VP-16)等多种化疗药物的MDR逆 转方面取得一定的疗效。因此，从植物药有效成分中发掘肿瘤MDR逆转剂、并对其作用机理 进行深入研究成为植物药MDR逆转剂研究的热点之一。 慢性髓性白血病是中国多发和常见肿瘤疾病，白血病细胞耐药是临床白血病化疗 的难点之一，而白血病细胞一旦发生耐药，细胞的许多生物学特性发生改变，且对多种药物 交叉耐药。人类红白血病细胞系K562是由Lozzio等于1975年从1例处于原始细胞危象 中的慢性髓系白血病患者的胸膜渗出液中建立的，具有费城染色体(Ph)。因其在受到多种 因素的诱导时，具有向红系，单核系或巨核细胞系分化的能力，还可以借其观察对血红蛋白 合成量的影响，故多作为细胞分化研究的细胞模型。人K562细胞常作为筛选慢性髓性白血3病的重要细胞毒模型。 本专利技术采用国际通用准则，将K562细胞与临床治疗慢性髓性白血病的一线用药 阿霉素(ADR)共同培养，逐渐增加药物浓度，最后建立耐阿霉素的细胞K562/ADR株。以此 为体外筛选模型，本专利技术人继而从天然药物及其衍生物中寻找对人慢性髓源性白血病细胞 株(K562)及其阿霉素耐药株(K562/ADR)体外增殖均具有抑制活性的MDR逆转活性先导化 合物。 综上所述，从新的天然药物来源中，利用对多药耐药性MDR细胞有效抑制的药效 学模型，发现新的先导化合物，是本专利技术的思路。依此思路，本专利技术人选择了从菊科植物中 寻找人慢性髓源性白血病MDR细胞逆转性先导化合物为新药研发和本专利技术的主线。菊科植 物是我国广泛分布的具药用价值之植物，我们业已从该科植物中分离得到许多对体外培养 肿瘤细胞株具细胞毒性的活性化合物，发现了一批结构新颖的抗肿瘤活性化合物 。 菊科植物水飞蓟是作为抗自由基天然产物在临床上广泛应用的天然药 物。三十多年的临床实验证明该药具有确切的疗效和低毒性(参阅Flora K.等 人，Am. J. Gastroenterol, 1998,93， 139-143 ;Saller R.等人，Drugs, 2001 ， 61 (14)， 2035-2063)。水飞蓟中水飞蓟宾含量最多，活性也相对最高。故关于水飞蓟宾之药效学研 究最为广泛。国家药品监督管理局制订的国家药品标准水飞蓟素一栏中，要求含水飞蓟素 以水飞蓟宾计算，不得少于68% 。该天然药物作用主要有以下几点( 一 )抗自由基活性 水飞蓟素对于由CC^，半乳糖胺、醇类和其他肝毒素造成的肝损害具有保护作用。1990年 Lotteron等人报道了在小鼠肝微粒体内，水飞蓟素能减少由四氯化碳代谢引起的体外脂质 过氧化及由还原型辅酶单独引起的过氧化作用这些都表明水飞蓟素为链中断抗氧化剂或 为自由基清除剂。(二 )保护肝细胞膜通过抗脂质过氧化反应维持细胞膜的流动性，保护 肝细胞膜。还能阻断真菌毒素鬼笔毒环肽和a-鹅膏蕈碱等与肝细胞上特异受体的结合， 抑制其对肝细胞的攻击及跨膜转运，中断其肝肠循环，从而增强肝细胞膜对于多种损害因 素的抵抗力。(三)促进肝细胞的修复和再生水飞蓟宾进入细胞后可以与雌二醇受体结 合，并使之激活，活化的受体可以增强肝细胞核内RNA聚合酶1的活性，使RNA转录增强，促 进酶及蛋白质的合成，并间接促进DNA的合成，有利于肝细胞的修复和再生。(四)抗肿瘤 作用各种活性氧能氧化鸟嘌呤形成8-羟基鸟嘌呤，造成DNA损伤，进而引起肿瘤，水飞蓟 宾作为一个有效的抗自由基物质也显示了预防和治疗肿瘤的作用。水飞蓟宾类化合物具 有确切的疗效，故而寻找水飞蓟宾类新的衍生物，使其能够具有更高或者更新的药理活性， 以期获取自主知识产权的新药，实属必要。如专利技术人在水飞蓟宾的B环上引入甲氧基就显 著提高了其清除超氧阴离子自由基的活性(杨雷香，赵昱等，"Synthesis andAntioxidant Properties Evaluation of Novel Silybin Analogue，，， Journal of Enzymelnhibition and Medicinal Chemistry,2006，21(4)，399-404)。 因此，以水飞蓟宾为母体化合物，制备并测试其衍生物对K562及K562/ADR细胞株 生长具有抑制活性的MDR逆转活性先导化合物，对于发展菊科植物活性成分水飞蓟宾之衍 生物成为治疗该类难治性肿瘤新药有着积极的意义。 我们采用了MTT法，对由天然 产物水飞蓟宾为母体合成制备出之7位和20位1- 丁烯取代的脱氢水飞蓟宾双醚针对人慢 性髓源性白血病细胞株(K562)及其阿霉素耐药株(K562/ADR)体外增殖进行了生长抑制活 性测试，发现了其对K562和K562/ADR细胞体外增殖均具有抑制活性，说明了该化合物的 M本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种具有式（Ⅰ）所示结构的７位和２０位１－丁烯取代的脱氢水飞蓟宾双醚或其可药用盐在制备防治白血病药物中的用途；＊＊＊式（Ⅰ）其中，式（Ⅰ）化合物称为７，２０－双（１－丁烯基）－脱氢水飞蓟宾醚；１０，１１位同时为Ｒ构型或同时为Ｓ构型。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：巫秀美，彭芳，肖怀，刘光明，杨晓莉，杨雷香，赵昱，
申请(专利权)人：大理学院，
类型：发明
国别省市：53[中国|云南]