【技术实现步骤摘要】
果糖1,6
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二磷酸酶II突变体及其应用
[0001]本专利技术属于微生物工程
,具体地说,涉及果糖1,6
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二磷酸酶II突变体及其应用。
技术介绍
[0002]核苷是一类糖苷的总称。核苷是核酸和核苷酸的组成成分。核苷是由D
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核糖或D
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Z
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脱氧核糖与嘧啶碱或嘌呤碱缩合而成。核苷一般为无色结晶,不溶于普通有机溶剂,易溶于热水,熔点为160~240℃。由D
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核糖生成的核苷称核糖核苷,参与RNA组成;由D
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α
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脱氧核糖生成的核苷称脱氧核糖核苷,参与DNA组成。D
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核糖与腺嘌呤、鸟嘌呤、胞嘧啶、胸腺嘧啶或尿嘧啶缩合生成相应的腺嘌呤核糖核苷、鸟嘌呤核糖核苷、胞嘧啶核糖核苷、胸腺嘧啶核糖核苷和尿嘧啶核糖核苷,它们分别简称为腺苷(A)、鸟苷(G)、胞苷(C)、胸苷(T)和尿苷(U)。
[0003]鸟苷和肌苷在食品和医药行业有着广泛的作用。在食品领域,鸟苷和肌苷分别是鸟苷酸二钠和肌苷酸二钠的重要前体,而鸟苷酸二钠与肌苷酸二钠组合使用作为食品增鲜剂,广泛应用于鸡精、酱油等调味品中。在医药领域,鸟苷和肌苷可以作为多种抗病毒药物的医药中间体,如无环鸟苷、三氮唑核苷、三磷酸鸟苷钠等都需要鸟苷作为合成原料。肌苷是肌苷酸的重要前体,而肌苷酸可以作为合成腺苷酸(AMP)和鸟苷酸(GMP)的前体,适用于各种原因引起的白细胞减少症、血小板减少症、各种心脏疾患、急性 ...
【技术保护点】
【技术特征摘要】
1.果糖1,6
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二磷酸酶II突变体,其特征在于,所述突变体包含果糖1,6
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二磷酸酶II第175位氨基酸由R到H或P的突变;其中,果糖1,6
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二磷酸酶II在NCBI上的参考序列编号为NP_391590.1或CBI44672.1。2.编码权利要求1所述突变体的核酸分子或含有所述核酸分子的生物材料;所述生物材料为重组DNA、表达盒、转座子、质粒载体、病毒载体或工程菌。3.权利要求2所述核酸分子或所述生物材料的以下任一应用:(1)用于核苷的发酵生产;(2)用于提高核苷的发酵产量;(3)用于构建产核苷的基因工程菌。4.核苷生产菌株的构建方法,其特征在于,利用基因工程手段,在具有核苷生产能力的微生物基因组中引入突变,使其编码的果糖1,6
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二磷酸酶II包含R175H或R175P突变位点;其中,果糖1,6
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二磷酸酶II在NCBI上的参考序列编号为NP_391590.1或CBI44672.1。5.根据权利要求4所述的方法,其特征在于,所述微生物为芽孢杆菌属(Bacillus)菌种,优选枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)、解淀粉芽孢杆菌(Bacillus amyloliquefaciens)、短小芽孢杆菌(Bacillus pumilus)。6.产核苷的工程菌的构建方法,其特征在于,以权利要求4或5所述方法构建得到的核苷生产菌株作为出发菌株,采用如下
①
~
④
中的至少一种方法对出发菌株进行基因工程改造:
①
利用基因工程手段,在出发菌株中引入突变,使其编码的丙酮酸激酶包含T101K、T101R或T101P突变位点;其中,丙酮酸激酶在NCBI上的参考序列编号为NP_390796.1;
②
利用基因工程手段,在出发菌株中引入突变,使其编码丙酮酸羧化酶的pycA基因包含第一个碱基由T到G或A的突变;
③
利用基因工程手段,在出发菌株中引入突变,使其编码的磷酸烯醇式丙酮酸羧激酶包含K147R或K147H突变位点;其中,磷酸烯醇式丙酮酸羧激酶在NCBI上的参考序列编号为NP_3909...
【专利技术属性】
技术研发人员:吴涛,薛婷莉,栾明月,姚佳琪,张孟娟,赵津津,李岩,
申请(专利权)人:廊坊梅花生物技术开发有限公司,
类型:发明
国别省市:
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