【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】经表面修饰的红细胞及其产生方法
[0001]本申请要求2021年1月29日提交的SG10202101003S的优先权，其内容和要素出于所有目的通过引用并入本文。
专利
[0002]本专利技术总体上涉及分子生物学领域。具体地，本专利技术涉及修饰红细胞的细胞表面蛋白的方法及其用途。
技术介绍
[0003]产生用于治疗用途的经表面修饰红细胞的方法遇到了许多挑战。大多数传统方法，如化学官能化或遗传工程改造的红细胞，必须在对红细胞长期存活有害的苛刻化学处理和祖细胞的非常昂贵的遗传工程改造和培养之间折衷。如果没有事先的遗传工程改造，现有的酶促方法效率低下。因此，对于提供产生用于治疗用途的经表面修饰红细胞的有效方法存在未满足的需求。
[0004]鉴于上述考虑而设计了本专利技术。
技术实现思路
[0005]最一般地，本披露涉及修饰去核后的红细胞的方法，并且涉及包含去核后表面缀合效应物分子的经修饰的红细胞。具体地，本披露涉及修饰未经遗传修饰的红细胞的方法。
[0006]在一个方面，本披露提供了一种方法，其...
【技术保护点】
【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】1.一种方法，其包括：(a)在连接酶存在下，在合适的条件下，使红细胞(RBC)与肽接触足够的时间，以允许所述肽与所述RBC连接以形成RBC
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肽缀合物；其中所述肽包含C末端连接酶识别序列。2.如权利要求1所述的方法，其中所述连接酶是OaAEP1连接酶，优选OaAEP1
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Cys247Ala。3.如权利要求1或权利要求2所述的方法，其中所述肽是效应物分子。4.如权利要求3所述的方法，其中所述效应物分子具有选自NGL、NDL、NPL、NAL、NCL、NEL、NFL、NHL、NKL、NIL、NLL、NQL、NRL、NSL、NTL、NVL、NWL、NYL、NSLD、NSLAN或NG，优选NGL、NPL或NDL的C末端连接酶识别序列。5.如权利要求1或权利要求2所述的方法，其中所述肽是接头肽。6.如权利要求5所述的方法，其中所述接头肽包含C末端连接酶识别序列和用于缀合至效应物分子的基序，其中用于缀合至另一分子的基序是N末端连接酶识别序列、点击化学官能团或生物素部分。7.如权利要求6所述的方法，其中所述RBC
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肽缀合物是RBC
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接头肽缀合物，并且其中所述方法还包括：(b)使所述RBC
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接头肽缀合物与效应物分子在合适的条件下接触足够的时间以使所述效应物分子与所述RBC
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接头肽缀合以形成RBC
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接头
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效应物分子缀合物。8.如权利要求7所述的方法，其中所述接头肽包含N末端连接酶识别序列，并且其中所述C末端连接酶识别序列是Xaa1GG，其中Xaa1是除G之外的任何氨基酸或具有序列NG或NCL。9.如权利要求8所述的方法，其中所述N末端连接酶识别序列是G、GG、GL、GGG、GLG或GGL。10.如权利要求8或权利要求9所述的方法，其中所述效应物分子包含选自由以下组成的组的C末端连接酶识别序列：NGL、NDL、NPL、NAL、NCL、NEL、NFL、NHL、NKL、NIL、NLL、NQL、NRL、NSL、NTL、NVL、NWL、NYL、NSLD、NSLAN或NG，优选NGL、NPL或NDL。11.如权利要求8
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10中任一项所述的方法，其中使所述RBC
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接头肽缀合物与所述效应物分子在合适的条件下接触足够的时间以使所述效应物分子与所述RBC
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接头肽连接以形成RBC
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接头
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效应物分子缀合物。12.如权利要求11所述的方法，其中(a)中的连接酶与(b)中的连接酶相同，优选为OaAEP1连接酶，更优选为OaAEP1
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Cys247Ala。13.如权利要求6所述的方法，其中所述接头包含点击化学官能团和选自由以下组成的组的C末端连接酶识别序列：NGL、NDL、NPL、NAL、NCL、NEL、NFL、NHL、NKL、NIL、NLL、NQL、NRL、NSL、NTL、NVL、NWL、NYL、NSLD、NSLAN或NG，优选NGL、NPL或NDL。14.如权利要求13所述的方法，其中所述点击化学官能团包含叠氮化物部分、四嗪部分、甲基四嗪部分、二芳基环辛炔(DBCO)部分或反式环辛炔(TCO)部分。15.如权利要求14所述的方法，其中所述效应物分子包含互补点击化学官能团。16.如权利要求13至权利要求15所述的方法，其中使所述RBC
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接头缀合物与所述效应物分子在合适的条件下接触足够的时间以使所述效应物分子与所述RBC
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接头缀合物通过无铜点击化学缀合。
17.如权利要求6所述的方法，其中所述RBC
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