本发明专利技术提供了高耐受、低产异戊醇的库德里阿兹威毕赤酵母在白酒酿造及勾调中的应用，该菌株为库德里阿兹威毕赤酵母（Pichia kudriavzevii）M3，保藏编号为：CCTCC NO：M 2022254。该酵母具有高耐受性、高产乙醇低产杂醇油的能力，其菌落为圆形边缘呈锯齿状、形态较大。微隆起、外观呈乳白色，干燥，400倍显微镜下观察菌株的细胞形态特征呈椭圆或扁长形态，繁殖方式为芽殖。本发明专利技术将该酵母用于清香型白酒中勾调，能提升酒的纯净性和优品率。能提升酒的纯净性和优品率。能提升酒的纯净性和优品率。
【技术实现步骤摘要】
高耐受、低产异戊醇的库德里阿兹威毕赤酵母在白酒酿造及勾调中的应用
[0001]本专利技术为2022105907768的分案申请，母案申请日2022年5月27日。本专利技术涉及酿酒微生物领域，具体涉及一株耐受性好、高产乙醇、低产杂醇油的毕赤酵母菌株及应用。
技术介绍
[0002]高级醇是指那些含有三个以上碳原子的一元醇类物质的总称，其包括了正丙醇、异丁醇、异戊醇等；高级醇也是三大芳香族物质之一，酵母是酿酒过程中产生高级醇的主要微生物，在发酵前期底物充足，酵母大量增殖而高级醇又属于初级代谢产物，所以其主要生成于这一阶段；而进入发酵后期这些高级醇一部分会与以乙酸为主的酸类物质在酶的催化作用下生成相应的酯类化合物，一部分继续存在于酒体之中。在酒体中，适量的高级醇具有平衡口感和香气的作用，但是有研究表明酒体中过高的高级醇不仅会带来苦味和令人不愉快的“杂醇油味”，而且在饮用后会引起上头，恶心，心悸等严重的酒后应激效应。由于过量的高级醇存在的上述问题，降低酒体中高级醇的含量成了控制和提高酒质的重要手段，去除高级醇的方法主要包括了工艺控制，精馏分离，材料吸附，和选育低产高级醇的微生物等，相比于前几种方法后者能从源头解决发酵酒、蒸馏酒中高级醇含量过多的问题，选育优良的菌种也能直接的改善酒质，增加酒的优品率。
技术实现思路
[0003]本专利技术提供一株高耐受、低产异戊醇的库德里阿兹威毕赤酵母及其应用，该菌株具有耐糖、耐乙醇、耐酸、且高产乙醇和低产杂醇油的特性。
[0004]本专利技术的技术方案是，一株高耐受、低产异戊醇的库德里阿兹威毕赤酵母，该菌株为库德里阿兹威毕赤酵母(Pichia kudriavzevii)M3，保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏编号为：CCTCC NO：M 2022254。
[0005]进一步地，该菌株的DNA拼接序列如SEQ ID NO.1所示。
[0006]进一步地，该菌株菌落形态为圆形，边缘呈锯齿状，外观呈乳白色，干燥；显微镜下呈椭圆或扁长形态，繁殖方式为芽殖，处于繁殖中的细胞芽体清晰可见。
[0007]本专利技术还涉及所述毕赤酵母在酿酒领域和/或酵母制剂中的应用。
[0008]进一步地，所述酿酒为白酒酿造或黄酒酿造。
[0009]进一步地，在酿酒领域具体应用时，毕赤酵母应用于酿酒过程中的任一步骤，包括但不限于在制曲过程中与制曲原料混合；或与经糖化、糊化的酿酒原料混合；或在发酵中后期与酿酒酒醅混合。
[0010]本专利技术还涉及一种强化麸曲，该麸曲中含有所述的毕赤酵母。
[0011]进一步地，其以麦麸为原料，加水混匀并灭菌后，将毕赤酵母加生理盐水打散至细胞数在107‑
108之间，然后按6
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8wt％的比例接种到麸皮进行培养，干燥，即得毕赤酵母强化麸曲。
[0012]本专利技术还涉及一种用于勾调的酒，该酒制备过程中，采用所述的毕赤酵母或强化麸曲进行固态发酵。进一步地，将该用于勾调的酒与基酒混合，可以勾调制备清香型白酒。
[0013]本专利技术具有以下有益效果
[0014]本专利技术提供的一种毕赤酵母(Pichia kudriavzevii)菌株M3，具有极佳的生理耐受性和独特的高产乙醇低产杂醇油的能力。能不断地适应发酵过程中理化环境的变化。可广泛应用于酿酒领域特别是白酒领域和黄酒领域。同时由该毕赤酵母制作的强化麸曲与普通酒曲混合使用,能显著提高酒质，并降低原酒中杂醇油的含量。
[0015]本专利技术还提供一种由毕赤酵母(Pichia kudriavzevii)菌株M3纯种发酵而来的一种用于清香型白酒中勾调的酒,采用经过适当时间储存的这种酒与清香型白酒基酒进行勾调，能显著提升基酒的酯香味使酯香、粮香协调；降低糙辣感，苦涩感。以达到提升酒的纯净性和优品率的目的，并得到得到醇净、甘甜、不上头的优质酒。
附图说明
[0016]图1、多株低产杂醇油酵母菌株的耐受性分析图。
[0017]图2、库德里阿兹威毕赤酵母M3(Pichia kudriavzevii)在酵母浸出粉胨葡萄糖培养基(Yeast Extract Peptone Dextrose Medium,YEPD)上的菌落形态图。
[0018]图3、库德里阿兹威毕赤酵母M3(Pichia kudriavzevii)在400倍显微镜下菌体形态图(美蓝染色)。
[0019]图4、库德里阿兹威毕赤酵母M3(Pichia kudriavzevii)的遗传发育树图。
[0020]图5、库德里阿兹威毕赤酵母M3(Pichia kudriavzevii)发酵液中挥发性成分的GC
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MS总离子流色谱图。
具体实施方式
[0021]下面将结合实施例对本专利技术的实施方案进行详细描述，但是本领域技术人员将会理解，下列实施例仅用于说明本专利技术，而不应视为限定本专利技术的范围。
[0022]实施例1：
[0023]菌株的筛选
[0024]本专利技术涉及的高产乙醇、低产杂醇油的毕赤酵母分离筛选于优质酒醅，具体筛选方法如下：
[0025]首先在优质酒醅中筛选出60余株性能优良的酵母菌株，针对产乙醇和低产杂醇油进行定向筛选，将准备好的酵母浸出粉胨葡萄糖培养基(YEPD)平板平均分为六个区，事先准备多个平板，然后将全部菌株点种于平板上30℃培养两天后，将冷却至45℃的TTC培养基倒入酵母浸出粉胨葡萄糖培养基(YEPD)平板上层在暗处保存两小时后观察颜色变化，选出红色较深的菌株作为备选菌株(具体编号为Shao、FenⅡ、PD1、PT11、PT17、Y
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3、JY26、PF4、M3、M4、4
‑
16、2300、1312、10#)。然后将备选菌株置于酵母浸出粉胨葡萄糖培养基(YEPD)液体培养基中30℃，180r/min培养18h作为种子液，按照5％接种量接种至糖度为12Brix的高粱汁培养基中，30℃，180r/min培养12h后转为静置培养，每12h称重一次记录CO2失重，当失重小于0.2g时结束发酵，结束发酵后采用气相色谱法检测杂醇油，蒸馏法测乙醇选出乙醇产量高，杂醇油产量低的菌株并与生产菌株SC(某公司酿酒酵母，市售)进行比较，相比于某
Extract Peptone Dextrose Medium,YEPD)培养基中，倒置平板，放入30℃培养箱中培养48h，观察菌落形态特征：在YEPD平板中其菌落为圆形，边缘呈锯齿状，形态较大、微隆起、外观呈乳白色，干燥，具体参见图2。
[0037]于400倍显微镜下观察菌株的细胞形态其特征为：呈椭圆或扁长形态，繁殖方式为芽殖，处于繁殖中的细胞芽体清晰可见，具体参加图3。
[0038]实施例3：M3菌株分子生物学鉴定
[0039]将筛选得到的菌株送至华大基因科技有限公司进行18S rRNA基因测序，测序结果置于NCBI(National Center for Biotechnology Information)数据库中进行比对，本文档来自技高网...
【技术保护点】
【技术特征摘要】
1. 高耐受、低产异戊醇的库德里阿兹威毕赤酵母在白酒酿造中的应用，其特征在于：该毕赤酵母为库德里阿兹威毕赤酵母（Pichia kudriavzevii）M3，保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏编号为：CCTCC NO：M 2022254；具体白酒酿造时，取3000g高粱没入70
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80℃热水中，浸泡24h，清洗七至八遍后0.25MPa 高温高压蒸煮30min，第一次蒸过的高粱在 80℃热水中浸泡 30min，然后在0.16MPa 高温高压蒸煮 20min 至破皮开花，加入0.7wt%混合强化麸曲与酿酒曲混合比例为 1:1 的混合曲，搅拌均匀，糖化堆积 24 h，而后分别装入小坛，密封置于室温发酵 7d；发酵结束后，上甑蒸馏，上甑时两边比中间略高 1
‑
2cm，采用“掐头去尾”的方法收集馏分即得酿造白酒；其中强化麸曲以麦麸为原料，加水混匀并灭菌后，将毕赤酵母加生理盐水打散至细胞数在107‑
108之间，然后按6
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8wt%的比例接种到麸皮进行培养，干燥，即得。2...
【专利技术属性】
技术研发人员：蔡开云，冯向东，郭婷婷，郑裴，
申请(专利权)人：湖北稻花香酒业股份有限公司，
类型：发明
国别省市：
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