一种氨基糖苷类抗生素的中间体微生物限度检测方法技术

一种氨基糖苷类抗生素的中间体微生物限度检测方法，通过使用薄膜过滤法，加入中和剂，优化调整中和剂的比例、中和方式，培养基中加入中和剂等，有效消除了氨基糖苷类抗生素中间体中氨基糖苷类抗生素和抑菌剂的抑菌性，保证了检测结果的准确性，同时也填补了在氨基糖苷类抗生素产品中间体微生物限度检测方面的空白，进一步保证了在严苛的质量标准要求下氨基糖苷类抗生素中间体微生物限度检查方法的科学性。同时本发明专利技术提供的检测方法可以满足微生物限度不超过不超过10cfu/100ml的标准要求。物限度不超过不超过10cfu/100ml的标准要求。

【技术实现步骤摘要】
一种氨基糖苷类抗生素的中间体微生物限度检测方法


[0001]本专利技术涉及医药
，尤其涉及一种氨基糖苷类抗生素的中间体微生物限度检测的方法。

技术介绍

[0002]医药产品的微生物污染是潜在的不安全因素之一，为保证临床应用和上市后患者用药的安全性，目前各国药品生产质量管理规范(Good Manufacture Practice，GMP)及药典不仅对无菌制剂的产品规定必须进行无菌检查，对生产过程中中间环节产生中间体的微生物污染水平也有严格的控制要求。
[0003]如果药品的中间体受到微生物的严重污染将直接影响到最终产品的无菌特性。受微生物污染的药品在通过各种给药途径进入人体后，由于体液等对药物的中和，以及人体内环境给微生物生长提供了良好的营养条件，其中所污染的微生物会迅速复苏、繁殖、危及生命。
[0004]虽然无菌药品在生产过程中会经过各种工艺步骤的处理来降低药品中间过程中的微生物水平，将药品中间体微生物数量控制在极低的范围，才能保证最终药品的无菌和安全，但是如果检测方法因产品原辅料抑菌活性以及抑菌剂的添加导致不够准确，那么就会造成检测结果的假阴性产生，无法检测出中间体的真实的微生物数量和种类。那么一个准确的微生物限度检测方法就至关重要了。
[0005]同时，因产品在处方中除了有原料等强抑菌成份外，还加入苯扎氯铵等防腐成分，使药品中间产品有了很强的抑菌活性。对具有强抑菌活性的药品进行微生物限度检查时，应首先消除其抑菌活性，并通过实验验证抑菌活性去除的是否彻底，以保证检验结果的有效性。/>[0006]妥布霉素滴眼液是适用于敏感细菌所致的外眼及附属器的局部感染治疗。对于妥布霉素滴眼液中间体进行有效的微生物限度检查是目前药品检验工作中的一个难题。而妥布霉素滴眼液中间体，由于检测样品量大，使其抑菌性更强，其检验难度大。目前，现有技术中暂无对于妥布霉素滴眼液中间体微生物限度检查方法的详细描述，因此对于妥布霉素滴眼液中间产品微生物限度检查研究十分有必要。

技术实现思路

[0007]为了消除妥布霉素滴眼液中间体本身的抑菌性，解决妥布霉素滴眼液中间体抑菌活性强对微生物限度检测准确性的影响，检查出妥布霉素滴眼液中间体中微生物的数量，从而有效地检测出被耐药菌等微生物污染的妥布霉素滴眼液。
[0008]本专利技术中，所述氨基糖苷类抗生素的中间体是指氨基糖苷类抗生素生产过程中产生的液体制剂，含有氨基糖苷类抗生素、抑菌剂和缓冲剂及其它辅料。
[0009]根据某些具体实施方式，所述抑菌剂为苯扎氯氨或苯扎溴铵。
[0010]本专利技术实施例提供一种氨基糖苷类抗生素的中间体微生物限度检测包括，利用包
含具有消除、减弱抑菌剂效果的组分、2价金属盐、氯化钠的中和液对氨基糖苷类抗生素的中间体进行中和预处理；
[0011]对所述中和预处理后的样品进行菌数计数操作。
[0012]根据某些具体实施方式，所述具有消除、减弱抑菌剂效果的组分为聚山梨酯
‑
80、大豆卵磷脂。
[0013]根据某些具体实施方式，所述聚山梨酯
‑
80的质量百分浓度为0.5wt％～3wt％。聚山梨酯
‑
80的含量不宜过低，否则无法消除抑菌剂的影响，同时由于聚山梨酯
‑
80为油性成分，其含量不宜过高，否则容易使过滤膜发生堵膜。
[0014]优选地，所述聚山梨酯
‑
80的质量百分浓度为1wt％。
[0015]根据某些具体实施方式，所述大豆卵磷脂的质量百分浓度为0.05wt％～1wt％。大豆卵磷脂的含量不宜过低，否则无法消除抑菌剂的影响，同时由于大豆卵磷脂的颗粒较大，其含量不宜过高，否则容易使过滤膜发生堵膜。
[0016]优选地，所述大豆卵磷脂的质量百分浓度为0.1wt％。
[0017]根据某些具体实施方式，所述2价金属盐为钙盐或镁盐中的至少一种。
[0018]根据某些具体实施方式，所述2价金属盐为2价金属氯盐。
[0019]根据某些具体实施方式，所述2价金属盐为六水氯化镁，在中和液的制备中，使用氯化镁溶液造成过滤膜发黑导致过滤效果不好，而使用六水氯化镁可以避免该问题。
[0020]根据某些具体实施方式，所述六水氯化镁的质量百分浓度为0.5wt％～5wt％。
[0021]优选地，所述六水氯化镁的质量百分浓度3.2wt％。
[0022]根据某些具体实施方式，所述氯化钠的质量百分浓度0.85wt％～0.95wt％。
[0023]优选地，所述氯化钠的质量百分浓度0.9wt％。
[0024]根据某些具体实施方式，所述中间体与所述中和液体积比2/1～1/10。具体的所述体积比为2/1、1/1、1/2、1/3、1/4、1/5、1/6、1/7、1/8、1/9或1/10等等。
[0025]根据某些具体实施方式，所述菌为需氧菌。
[0026]根据某些具体实施方式，所述需氧菌为金黄色球菌、铜绿假单胞菌、枯草芽孢杆菌、白色念珠菌或黑曲霉菌。
[0027]根据某些具体实施方式，所述中和预处理还包括，对中和后的中间体用过滤膜进行过滤。
[0028]根据某些具体实施方式，过滤后，对过滤后的所述过滤膜用所述中和液进行至少一次冲洗。
[0029]根据某些具体实施方式，通过薄膜过滤法测定菌数的方法进行所述菌数计数操作。
[0030]根据某些具体实施方式，将过滤膜贴于培养基，平行制备平皿，然后通过薄膜过滤法测定菌数的方法进行所述菌数计数操作，根据某些具体实施方式，培养基为胰酪大豆胨琼脂培养基。
[0031]根据某些具体实施方式，所述培养基包含2价金属盐，例如钙盐或镁盐，根据某些具体实施方式所述镁盐为六水氯化镁，根据某些具体实施方式，所述培养基中还包括氯化钠。根据某些具体实施方式，所述培养基由胰酪大豆胨琼脂与六水氯化镁的氯化钠溶液混合制备，所述六水氯化镁的浓度为1～3mol/L,具体的例如1mol/L、1.5mol/L、2mol/L、
2.5mol/L或3mol/L，所述氯化钠的质量百分浓度为0.85wt％～0.95wt％，更好的为0.9wt％。
[0032]根据某些具体实施方式，所述检测方法包括以下步骤：
[0033]将中间体与中和液按混合，作为供试液，所述中和液包含聚山梨酯
‑
80、大豆卵磷脂、六水氯化镁、氯化钠；
[0034]取供试液过滤膜过滤后，用中和液冲洗过滤膜，按薄膜过滤法测定其菌数，取过滤膜贴于胰酪大豆胨琼脂培养基，所述培养基含2mol/L的六水氯化镁，平行制备平皿。
[0035]根据某些具体实施方式，所述氨基糖苷类抗生素中间体为妥布霉素中间体。
[0036]根据某些具体实施方式，所述每100ml氨基糖苷类抗生素的中间体含有100～500mg氨基糖苷类抗生素、1～50mg苯扎氯铵、500～2000mg缓冲剂等其他辅料，进一步，所述每100ml氨基糖苷类抗生素的中间本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种氨基糖苷类抗生素的中间体微生物限度检测方法，其特征在于，包括，利用包含具有消除、减弱抑菌剂效果的组分、2价金属盐、氯化钠的中和液对氨基糖苷类抗生素的中间体进行中和预处理；对所述中和预处理后的样品进行菌数计数操作。2.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于，所述具有消除、减弱抑菌剂效果的组分为聚山梨酯
‑
80、大豆卵磷脂。3.根据权利要求2所述的检测方法，其特征在于，所述聚山梨酯
‑
80的质量百分浓度为0.5wt％～3wt％。4.根据权利要求2所述的检测方法，其特征在于，所述大豆卵磷脂的质量百分浓度为0.05wt％～1wt％。5.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于，所述2价金属盐的质量百分浓度为0.5wt％～5wt％。6.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于，所述2价金属盐为钙盐或镁盐中的至少一种。7.根据权利要求6所述的检测方法，其特征在于，所述2价金属盐为六水氯化镁。8.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于，所述氯化钠的质量百分浓度为0.85wt％～0.95wt％。9.根据...

【专利技术属性】
技术研发人员：刘晔，张世龙，费菁菁，曹颖，任红锦，郭继亮，
申请(专利权)人：苏州欧康维视生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：