【技术实现步骤摘要】
一种噬菌体的分离办法
[0001]本专利技术涉及生物工程
，具体涉及一种噬菌体的高通量分离办法，并获得一株新型大肠杆菌噬菌体WBW3，经鉴定属于Drexlerviridae科Braunvirinae亚科。
技术介绍
[0002]噬菌体为病毒的其中一种，广泛存在于自然界中，可以感染原核生物，寄生在活细菌中，具有抗菌活性，但公共数据库显示分离到的噬菌体相对于总量来说很少，仅占一小部分，而在20世纪初变开始研究使用噬菌体治疗细菌感染，而随着抗生素的过度使用，导致细菌对抗生素的耐药性增加，因此噬菌体治疗便可弥补这一不足，来治疗那些耐药性细菌，且相比抗生素具有很多优势，但也有一些局限性，目前对其仍处于研究中，还不能应用在药物治疗中，所以需要建立大型的噬菌体资源库以供研究，而从资源丰富的自然界中分离到针对特定宿主的噬菌体并不容易，包括样品处理和宿主的选择，目前使用富集分离法和直接分离法为最常见的两种方法，但是富集分离法会限制分离到的噬菌体的多样性，因为最有效传播的噬菌体往往占主导地位造成实验偏差。而直接分离法仅适用于噬菌体浓度较高...
【技术保护点】
【技术特征摘要】
1.一种噬菌体的分离办法，该噬菌体为噬菌体WBW3，保藏于广东省微生物菌种保藏中心，保藏编号为GDMCC NO:62267
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B1，其分离方法包含以下步骤：a.样品处理b.噬菌体滴度的测定c.用已知噬菌体滴度的样品分离噬菌体得到单个独立菌斑d.进行高通量富集。2.根据权利要求1所述的一种噬菌体的分离办法，其特征在于，所述的分离方法在环境样品中分离得到了51株噬菌体。3.根据权利要求1所述的一种噬菌体的分离办法，其特征在于，所述的噬菌体WBW3为优势噬菌体。4.根据权利要求1所述的一种噬菌体的分离办法，其特征在于，所述的步骤d首先采用双层板培养皿获得独立噬菌斑，再采用96孔深孔板（2 mL）进行噬菌体富集培养。每个孔中加入 LB培养基与宿主菌，加入20
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30μL 0.25 MM CaCl2，振荡培养12
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14h，得到噬菌体富集液。5.根据权利要求4所述的一种噬菌体的分离办法，其特征在于，所述的固体培养基与培养的宿主菌为体积比为100
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110:1
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3。6.根据权利要求4所述的一种噬菌体的分离办法，其特征在于，所述...
【专利技术属性】
技术研发人员：杨希，
申请(专利权)人：广州一微生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：
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