一种罗伊氏菌素的制备方法技术

技术编号:40312599 阅读:24 留言:0更新日期:2024-02-07 20:54
本发明专利技术涉及生物技术领域,提供了一种罗伊氏菌素的制备方法,通过制备基因工程菌株E.coli PS0010,E.coli RPS0020和E.coli RPS0030菌株并对其进行诱导培育,合成罗伊氏菌素,突破了当前菌种生产罗伊氏菌素的局限性,且E.coli RPS0020在25℃时相比37℃时同一条件处理下的L.reuteri ATCC 55730,生成的罗伊氏菌素产量高出26.3%。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及生物,具体涉及一种罗伊氏菌素的制备,以及罗伊氏菌素合成分子工程菌构建。


技术介绍

1、当今,益生菌发展迅速,因其作用能代替抗生素,且相比抗生素,无毒副作用,而益生菌代谢物更是研究的重点,在食品医药等方面均有很好的作用。罗伊氏菌素便是由肠道定殖益生菌罗伊氏乳杆菌产生一种特殊的非蛋白的代谢物,罗伊氏乳杆菌在糖酵解循环中,由依赖辅酶b12的甘油脱水酶代谢甘油产生罗伊氏菌素,具有广谱抑菌性,比其他小肽或蛋白质细菌代谢物相比,在广泛的ph范围内均可以保持稳定,且能抵抗肠道脂解酶和蛋白水解酶的作用,具有更好的稳定性,在药学方面十分具有前景。

2、而目前的罗伊氏菌素的生产包括化学方法和生物方法。化学法成本高、产量低且存在大量污染物;而生物法则指通过在自然界中的菌株在依赖辅酶b12的甘油脱水酶作用下将甘油转化为3-hpa而获得罗伊氏菌素。目前可以产生罗伊氏菌素的菌株包括罗伊氏乳杆菌、克雷伯氏菌属、柠檬酸杆菌属、芽孢杆菌属等,但是一些菌株产生的3-hpa只能作为代谢通路中一种中间代谢物短暂积累,在甘油脱氢酶的作用下,被快速还原成下一级产物1,3-p本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种罗伊氏菌素的制备,包括以下步骤:

2.根据权利要求1所述的一种罗伊氏菌素的制备,其特征在于,所述的诱导物由15 -20mL 100 -200mmol/L的甘油和20-40μmol/L的辅酶B12重悬细胞组成。

3.根据权利要求1所述的一种罗伊氏菌素的制备,其特征在于,所述的基因工程菌株E.coli RPS0020已保存至广东省微生物培养物保藏中心(GDMCC),保藏号为GDMCC 62266。

4.根据权利要求1所述的一种罗伊氏菌素的制备,其特征在于,所述的基因工程菌株E.coli PS0010,E. coli RPS0020和E. coli ...

【技术特征摘要】

1.一种罗伊氏菌素的制备,包括以下步骤:

2.根据权利要求1所述的一种罗伊氏菌素的制备,其特征在于,所述的诱导物由15 -20ml 100 -200mmol/l的甘油和20-40μmol/l的辅酶b12重悬细胞组成。

3.根据权利要求1所述的一种罗伊氏菌素的制备,其特征在于,所述的基因工程菌株e.coli rps0020已保存至广东省微生物培养物保藏中心(gdmcc),保藏号为gdmcc 62266。

4.根据权利要求1所述的一种罗伊氏菌素的制备,其特征在于,所述的基因工程菌株e.coli ps0010,e. coli rps0020和e. coli rps0030由质粒转入escherichia coli bl21(de3)菌株制备形成,escherichia coli bl21(de3)菌株储存于本实验室。

5.根据权利要求3所述的一种罗伊氏菌素的制备,其特征在于,所述的质粒为包含甘油脱水酶合成基因pducde的表达质粒。

6.根据权利要求1所述的一种罗伊氏菌素...

【专利技术属性】
技术研发人员:杨希
申请(专利权)人:广州一微生物科技有限公司
类型:发明
国别省市:

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