一种提高微生物对甲醛耐受性的方法技术

本发明专利技术公开了一种提高微生物对甲醛耐受性的方法。本发明专利技术通过降低或消除谷氨酸棒杆菌中的Cgl1590的活性或其编码基因的表达水平，可以提高菌株对甲醛的耐受性。此外，本发明专利技术还提供了一种构建甲醛耐受性菌株的方法，以及利用该方法构建的甲醛耐受性菌株。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于分子生物学和生物工程领域，具体涉及到一种提高微生物对甲醛的耐受性的方法，构建甲醛耐受性提高的菌株的方法，甲醛耐受性提高的重组菌株。

技术介绍

1、甲醇、甲酸等碳一(c1)化合物来源较为广泛，价格普遍低于葡萄糖，且原子经济型较高，可为细胞提供更多的还原力，利用微生物转化c1化合物生产大宗化学品不仅能够降低当前工业发酵中原料的生产成本，而且具有绿色环保的优势，是当前研究的热点，有望成为工业发酵的替代原料。目前，越来越多的研究已经开始关注c1化合物的生物转化和利用。

2、在甲醇等c1化合物的代谢过程中，甲醛是关键的中间化合物。然而，甲醛是一个亲电分子，与甲醇、甲酸等化合物相比，它是较为活泼的高毒性化合物，可与dna、蛋白质上的活性基团等发生交联反应，严重抑制菌株的生长[1]。目前，通过挖掘、改造c1代谢相关的酶，研究者开发了路径更短、体外碳源利用效率更高的甲醛同化途径，如chou等发现哺乳动物α氧化途径中的2-羟基酰基辅酶a裂解酶(hacl)，可催化甲酰辅酶a与含酮化合物的连接；lu等通过改造乙醇醛合成酶(gals)和磷酸酮醇酶(acp本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种提高微生物甲醛耐受性的方法，其特征在于，所述方法包括减弱微生物中Cgl1590蛋白的活性。

2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述方法具有如下(i)-(iii)至少一项所示的步骤：

3.根据权利要求1或2所述的方法，其特征在于，所述方法为敲除微生物中的Cgl1590蛋白的编码基因；或者，所述方法为使微生物的cgl1590基因第750位碱基插入G的突变或第535位碱基插入C的突变。

4.根据权利要求1-3任一项所述的方法，其特征在于，所述Cgl1590蛋白的编码基因的核苷酸序列如SEQ ID NO:2所示，或与SEQ ID NO:2所示核...

【技术特征摘要】

1.一种提高微生物甲醛耐受性的方法，其特征在于，所述方法包括减弱微生物中cgl1590蛋白的活性。

2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述方法具有如下(i)-(iii)至少一项所示的步骤：

3.根据权利要求1或2所述的方法，其特征在于，所述方法为敲除微生物中的cgl1590蛋白的编码基因；或者，所述方法为使微生物的cgl1590基因第750位碱基插入g的突变或第535位碱基插入c的突变。

4.根据权利要求1-3任一项所述的方法，其特征在于，所述cgl1590蛋白的编码基因的核苷酸序列如seq id no:2所示，或与seq id no:2所示核苷酸序列具有至少90％，可选至少95％，优选至少97％，更优选至少98％，最优选至少99％的序列同一性的多核苷酸。

5.根据权利要求1-3任一项所述的方法，其特征在于，所述微生物为棒杆菌属的微生物；优选地，所述棒杆菌属的微生物是谷氨酸棒杆菌；进一步优选地，所述谷氨酸棒杆菌是谷氨酸棒杆菌atcc13032、谷氨酸棒杆菌atcc13869、谷氨酸棒杆菌atcc14067或上述任一种的衍生菌株。

6.一种甲醛耐受性提高的微生物，其特征在于，所述微生物中cgl1590蛋白的活性减弱。

7.根据权利要求6所述的微生物，其特征在于，所述cgl1590蛋白的活性减弱具有如下(i)-(iii)至少一项所示的特征：

8.根据权利要求6或7所述的微生物，其特征在于，所述cgl1590蛋白的编码基因的核苷酸序列如seq id no:2所示，或与seq id no:2所示核苷酸序列具有至少90％，可选至少95％，优选至少97％，更优选至少98％，最优选至少...

【专利技术属性】
技术研发人员：郑平，王钰，孙际宾，张知慧，周文娟，凡立稳，
申请(专利权)人：中国科学院天津工业生物技术研究所，
类型：发明
国别省市：