本发明专利技术涉及一种大蒜有性生殖胚培养技术，提供了大蒜子房培养基和有性胚培养基，以及通过这种大蒜子房培养基和胚培养基的应用，成功获得大蒜有性生殖胚和完整植株的培育方法。本发明专利技术从受精的大蒜胚培育成完整的植株，无须经过实质性种子的阶段，无须栽培驯化，可缩短理论研究和杂交育种周期；适合多种栽培大蒜种质，应用范围广。
【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及大蒜有性培养的技术和方法，属于蔬菜科技领域。
技术介绍
由于在常规栽培条件下不能正常开花、结籽，不能进行有性杂交，所以长久以来只能靠种蒜瓣无性繁殖。不能进行有性繁殖，导致大蒜遗传背景狭窄，无法利用遗传背景不同的大蒜种质资源培养新品种；同时大蒜的连续无性繁殖，造成病毒在体内积累、导致蒜种“退化”严重，产量和品质下降。获得大蒜有性生殖胚和完整的植株是世界科技工作者攻关的热点。对研究大蒜有性生殖有重要的经济意义和学术价值。国外报道(Etho，1983)曾收集到可育大蒜种质，进行了自交或杂交获得过大蒜种子的研究，但他们搜集利用的可育种质多属野生近缘种，驯化困难，更难以利用。国内未见大蒜有性生殖成功的报道。
技术实现思路
本专利技术提供了大蒜子房培养基和有性胚培养基，以及通过这种大蒜子房培养基和胚培养基的应用，成功获得大蒜有性生殖胚和完整植株的培育方法。组织培养能否取得成功，培养基是关键步骤，以下为子房培养基和胚培养基。子房培养基B5+Macro-+Micro-+Sucrose 40-12g/L胚培养基MS+BA0.01-0.05mg/L+NAA0.05-0.1mg/L+Sucrose30-60g/L 以下为大蒜子房培养基和有性胚培养基的操作过程。子房培育操作过程选正常发育、明显膨大的大蒜子房，从花茎连接的基部切下，自来水冲洗30-40m.，75％酒精浸泡1-2s，0.1％升汞浸泡3-5m.，再用无菌水冲洗3遍。在超净工作台上用灭菌纸揩干子房上的水，将子房切口向下，接种在子房培养基上，置温度25±2℃，光照13-16h/d，相对湿度70-80％的培养室内培养。培养44-56d后，子房的胚珠有不同程度的生长发育，有长出不同发育阶段的幼胚，有的长出完整胚。胚培育操作过程无菌条件下，借助40倍解剖镜观察、剥离出不同发育阶段的幼胚和完整胚，接种在胚培养基上，置温度23±2℃，光照13-16h/d，相对湿度65-75％的培养室内培养。培养44d后幼胚发育成熟，完整胚发育成了小植株。本专利技术子房培养基中蔗糖(Sucrose)含量是该培养基的关键因素。应用该培养基培养的子房保持绿色，并膨大，其内的胚珠持续发育，形成了不同发育阶段的胚。在其它蔗糖(Sucrose)浓度低的培养基上的子房变黄，直至干枯、死亡。胚培养基中适当高的糖浓度和适当低的植物生长激素浓度利于胚发育。在其它蔗糖(Sucrose)浓度偏低和植物生长激素浓度偏高的培养基上的胚发育受到程度不同的抑制，如有的发育停滞，有的“玻璃化”等。本专利技术从受精的大蒜胚培育成完整的植株，无须经过实质性种子的阶段，无须栽培驯化，可缩短理论研究和杂交育种周期；适合多种栽培大蒜种质，应用范围广，克服了国际上现有技术搜集种质花费大量人力、物力和时间，应用范围窄，且驯化难的不足。具体实施例现以实施例说明本专利技术的实施方式方式实施例1子房培养的培养基B5+Macro-+Micro+Sucrose 26g/L有性胚培养的培养基MS+BA0.03mg/L+NAA0.07mg/L+Sucrose45/L选正常发育、明显膨大的大蒜子房，从花茎连接的基部切下，自来水冲洗30m.，75％酒精浸泡1s.，0.1％升汞浸泡3m.，再用无菌水冲洗3遍。在超净工作台上用灭菌纸揩干子房上的水，将子房切口向下，接种在子房培养基上，置温度25±2℃，光照13-16h/d，相对湿度75％的培养室内培养。培养52d后，子房的胚珠有不同程度的生长发育，有长出不同发育阶段的幼胚，有的长出完整胚。无菌条件下，借助40倍解剖镜观察、剥离出不同发育阶段的幼胚和完整胚，接种在胚培养基上，置温度23±2℃，光照13-16h/d，相对湿度65-70％的培养室内培养。培养50d后幼胚发育成熟，完整胚发育成了小植株。实施例2子房培养的培养基B5+Macro-+Micro+Sucrose 40g/L有性胚培养的培养基MS+BA0.01mg/L+NAA0.02mg/L+Sucrose30/L选正常发育、明显膨大的大蒜子房，从花茎连接的基部切下，自来水冲洗30m.，75％酒精浸泡1s.，0.1％升汞浸泡3m.，再用无菌水冲洗3遍。在超净工作台上用灭菌纸揩干子房上的水，将子房切口向下，接种在子房培养基上，置温度25±2℃，光照13-16h/d，相对湿度75％的培养室内培养。培养52d后，子房的胚珠有不同程度的生长发育，有长出不同发育阶段的幼胚，有的长出完整胚。无菌条件下，借助40倍解剖镜观察、剥离出不同发育阶段的幼胚和完整胚，接种在胚培养基上，置温度23±2℃，光照13-16h/d，相对湿度65-70％的培养室内培养。培养44d后幼胚发育成熟，完整胚发育成了小植株。实施例3子房培养的培养基B5+Macro-+Micro+Sucrose 12g/L有性胚培养的培养基MS+BA0.05mg/L+NAA0.1mg/L+Sucrose60/L选正常发育、明显膨大的大蒜子房，从花茎连接的基部切下，自来水冲洗30m.，75％酒精浸泡1s.，0.1％升汞浸泡3m.，再用无菌水冲洗3遍。在超净工作台上用灭菌纸揩干子房上的水，将子房切口向下，接种在子房培养基上，置温度25±2℃，光照13-16h/d，相对湿度75％的培养室内培养。培养43d后，子房的胚珠有不同程度的生长发育，有长出不同发育阶段的幼胚，有的长出完整胚。无菌条件下，借助40倍解剖镜观察、剥离出不同发育阶段的幼胚和完整胚，接种在胚培养基上，置温度23±2℃，光照13-16h/d，相对湿度65-70％的培养室内培养。培养45d后幼胚发育成熟，完整胚发育成了小植株，有的植株基部膨大，形成小鳞茎。本文档来自技高网...
【技术保护点】
一种大蒜有性生殖胚培养技术，其特征在于配制子房培养基和胚培养基，以及利用培养基成功获得大蒜有性生殖胚和完整植株的操作过程。
【技术特征摘要】
1.一种大蒜有性生殖胚培养技术，其特征在于配制子房培养基和胚培养基，以及利用培养基成功获得大蒜有性生殖胚和完整植株的操作过程。2.按照权利要求1所述大蒜有性生殖胚培养技术，其特征在于子房培养基B5+Macro-+Micro+Sucrose 40-12g/L3.按照权利要求1所述大蒜有性生殖胚培养技术，其特征在于胚培养基MS+BA0.01-0.05mg/L+NAA0.05-0.1mg/L+Sucrose30-60g/L4.按照权利要求1和2所述子房培养的操作过程将正常发育、明显膨大的大蒜子房，从花茎连接的基部切下，自来水...
【专利技术属性】
技术研发人员：徐培文，曲士松，杨崇良，崔德才，刘冰江，藤学芳，
申请(专利权)人：山东省农业科学院蔬菜研究所，
类型：发明
国别省市：88[中国|济南]
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