牛奶外泌体装载烷基化美容肽及在化妆品中的应用制造技术

本发明专利技术提供了牛奶外泌体装载烷基化美容肽及在化妆品中的应用，本发明专利技术提供了一种装载有烷基化美容肽的牛奶外泌体制剂，包括烷基化美容肽和牛奶外泌体，所述烷基化美容肽的烷烃链插入到牛奶外泌体的磷脂双分子层膜中，所述烷基化美容肽在牛奶外泌体制剂中的包封率大于25%。所述烷基化美容肽装载到牛奶外泌体过程中pH满足以下条件：

【技术实现步骤摘要】
牛奶外泌体装载烷基化美容肽及在化妆品中的应用


[0001]本专利技术属于化妆品领域，尤其涉及牛奶外泌体装载烷基化美容肽及在化妆品中的应用。

技术介绍

[0002]多肽和蛋白质是氨基酸聚合物。肽是短氨基酸链。peptide这个名字来源于pepton [peptos:消化的(希腊语)]。天然存在的人类多肽用于细胞通讯，如蛋白质调节、细胞增殖、细胞迁移、炎症、血管生成和黑素生成，这导致了各种各样的生理过程，包括防御、免疫、应激、生长、内稳态和繁殖。第一个肽是由埃米尔
·
费舍尔和霍夫迈斯特在19世纪早期描述的。1901年，Fischer和Fourneauin发表了第一个肽合成。Fischer将第一个肽描述为甘氨酸，并在他的讲座中解释了更多的肽结构，如二肽，三肽和多肽。几年之后，科学家合成了新的多肽，发现了更多的天然多肽，并对它们的功能有了更多的了解。除了不断增长的关于天然和合成肽的知识外，还开发了不同的合成肽。甘氨酸
‑
组氨酸
‑
赖氨酸铜(Cu
‑
GHK)是由洛伦
·
皮卡德(Loren Pickard)于1973年开发的。在80年代末，第一个铜肽被纳入到护肤品中。直到2000年初，开发了棕榈酰五肽
‑
4，从那时起，研究和工业开发了许多短的、稳定的合成肽，在细胞外基质合成，色素沉着，先天免疫和炎症中起作用。这些肽用于胶原蛋白刺激、伤口愈合、“肉毒杆菌样”平滑皱纹，以及抗氧化、抗菌和美白效果。
[0003]美容肽是一类高效的化妆品活性原料，其透皮能力却往往有限。过去的研究表明，只有满足相对苛刻条件的美容肽才有一定的透皮能力：分子量低于500Da，在辛醇/水的分配系数的中对数在1到3之间，融点低于200℃，水溶解度>1mg/mL，分子结构中基本没有极性中心。而大部分的肽并不能满足上述条件。另一方面，抗衰老、美白等作用都需要活性分子深入到真皮层才能发挥作用。肽类产品的透皮效果不佳，极大地限制了其在化妆品中的应用，造成了原料的浪费。
[0004]之前的研究结果披露，牛奶外泌体具有保湿修护、抗光老化及美白祛斑的护肤功效，可以应用于保湿修护、紧致抗皱及美白祛斑的化妆品中。此外，作为天然的细胞间信息传递载体，牛奶外泌体具有良好的透皮功能。

技术实现思路

[0005]为了克服现有技术的缺陷，实现利用牛奶外泌体的天然透皮功能，本专利技术将烷基化美容肽装载到外泌体上，协助递送美容肽透过表皮，到达真皮层的目标靶细胞，可以一方面发挥牛奶外泌体的协同美容功效，另一方面高效利用肽，避免原料浪费。
[0006]本专利技术提供了一种装载有烷基化美容肽的牛奶外泌体制剂，所述制剂包含有烷基化美容肽和牛奶外泌体，所述烷基化美容肽的烷烃链插入到牛奶外泌体的磷脂双分子层膜中，所述烷基化美容肽在牛奶外泌体制剂中的包封率大于25%。所述装载有烷基化美容肽的牛奶外泌体制剂的包封率优选为25%、30%、35%、40%。
[0007]优选的，获得所述装载有烷基化美容肽的牛奶外泌体制剂，在牛奶外泌体与烷基
、100μg/mL 、200μg/mL、300μg/mL、400μg/mL、500μg/mL 、600μg/mL 、700μg/mL 、800μg/mL 、900μg/mL 、1 mg/mL、1.5 mg/mL、2 mg/mL、2.5 mg/mL、3 mg/mL、3.5 mg/mL、4 mg/mL、4.5 mg/mL、5 mg/mL、6 mg/mL、7 mg/mL、8 mg/mL、9 mg/mL、10 mg/mL。
[0014]上述任一项优选的是，所述烷基化美容肽包括棕榈酰三肽
‑
1、棕榈酰五肽
‑
4、棕榈酰四肽
‑
7、棕榈酰六肽
‑
12、肉豆蔻酰六肽
‑
5、棕榈酰六肽
‑
15、棕榈酰二肽
‑
7，棕榈酰六肽
‑
14，棕榈酰三肽
‑
5，棕榈酰三肽
‑
8，棕榈酰四肽
‑
10，棕榈酰四肽
‑
5，棕榈酰五肽
‑
5，肉豆蔻酰五肽
‑
4中的至少一种。本专利技术优选的烷基化美容肽均为药监局允许添加在化妆品中的，并且能够通过商业化途径购买获得的烷基化美容肽。
[0015]上述任一项优选的是，所述烷基化美容肽为棕榈酰三肽
‑
1。为获得装载有棕榈酰三肽
‑
1的牛奶外泌体制剂，牛奶外泌体与棕榈酰三肽
‑
1混合后的混合溶液的pH满足以下条件：
①
所述牛奶外泌体制剂在电镜下能观察到外泌体形态，本专利技术所述外泌体形态为完整清晰的外泌体，即典型的茶托状外泌体。HPLC测得的纯度在55%以上，并且
②
所述棕榈酰三肽
‑
1的饱和浓度≥10μg/mL。
[0016]进一步优选的，装载有棕榈酰三肽
‑
1的牛奶外泌体制剂的制备方法为：所述在牛奶外泌体中，添加棕榈酰三肽
‑
1使之达到或未达到过饱和状态，优选的棕榈酰三肽
‑
1添加量为5μg/mL
‑
10mg/mL，5μg/mL
‑
1mg/mL， 1
‑
5mg/mL，4
‑
10mg/mL,或6
‑
10 mg/mL。优选的牛奶外泌体颗粒数1
×
10
11
‑1×
10
12
颗粒/mL，或优选的牛奶外泌体蛋白浓度200
‑
500μg/mL。调整混合溶液的pH值，使满足：所述牛奶外泌体制剂在电镜下能观察到完整清晰的外泌体，HPLC测得的纯度在55%以上，并且所述烷基化美容肽的饱和浓度≥10μg/mL，优选的pH为4
‑
6；37℃以下温度条件搅拌，以物理方式装载1
‑
12h后，除去游离的棕榈酰三肽
‑
1，添加冻干保护剂冻干保存。优选的物理装载方式为搅拌孵育或者静置孵育，优选的除去游离的棕榈酰三肽
‑
1的方式为分子筛、超滤等分离手段。
[0017]上述任一项优选的是，所述烷基化美容肽为棕榈酰五肽
‑
4。为获得装载有棕榈酰五肽
‑
4的牛奶外泌体制剂，牛奶外泌体与棕榈酰五肽
‑
4混合后的混合溶液的pH满足以下条件：
①
所述牛奶外泌体制剂在电镜下能观察到外泌体形态，本专利技术所述外泌体形态为完整清晰的外泌体，即典型的茶托状外泌体。HPLC测得的纯度在55%以上，并且
②
所述棕榈酰五肽
‑
4的饱和浓度≥10μg/mL。
[0018]进一步优选的，装载有棕榈酰五肽
‑
...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种装载有烷基化美容肽的牛奶外泌体制剂，包括烷基化美容肽和牛奶外泌体，其特征在于，所述烷基化美容肽的烷烃链插入到牛奶外泌体的磷脂双分子层膜中，所述烷基化美容肽在牛奶外泌体制剂中的包封率大于25%。2.如权利要求1所述的牛奶外泌体制剂，其特征在于，牛奶外泌体的蛋白浓度为200
‑
500μg/mL，或外泌体颗粒数为1
×
10
11
‑1×
10
12
颗粒/mL。3.如权利要求2所述的牛奶外泌体制剂，其特征在于，所述烷基化美容肽的添加量为5ug/mL
‑
10mg/mL。4.如权利要求3所述的牛奶外泌体制剂，其特征在于，所述烷基化美容肽包括棕榈酰三肽
‑
1、棕榈酰五肽
‑
4、棕榈酰四肽
‑
7、棕榈酰六肽
‑
12、肉豆蔻酰六肽
‑
5、棕榈酰六肽
‑
15、棕榈酰二肽
‑
7，棕榈酰六肽
‑
14，棕榈酰三肽
‑
...

【专利技术属性】
技术研发人员：葛啸虎，董凤伟，陆路，王淼，柏玮，祁冬丽，黄德亿，韩春乐，
申请(专利权)人：天津外泌体科技有限公司，
类型：发明
国别省市：