一种sgRNA、CRISPR/Cas9载体及其构建方法和用途技术

本发明专利技术属于分子技术领域，具体提供了一种sgRNA、CRISPR/Cas9载体及其构建方法和用途，其中sgRNA包括核苷酸序列如SEQ ID NO.2或SEQ ID NO.10所示的APOE

【技术实现步骤摘要】
一种sgRNA、CRISPR/Cas9载体及其构建方法和用途


[0001]本专利技术属于分子
，具体涉及一种sgRNA、CRISPR/Cas9载体及其构建方法和在APOE和LDLR双等位基因敲除的细胞株中的用途。

技术介绍

[0002]高脂血症是指血脂水平过高，可直接引起一些严重危害人体健康的疾病，如动脉粥样硬化、冠心病、胰腺炎等。低密度脂蛋白（Low Density Lipoprotein Receptor,LDLR），载脂蛋白E（ApolipoproteinE，ApoE）是目前高脂血症的主效基因。近年来通过对APOE和LDLR基因编辑，构建高血脂动物模型，用于高血脂症研究不断取得重大发展。例如南京医科大学制备了APOE编辑巴马小型猪，中国农业科学院动物科学研究所制备了APOE和LDLR编辑巴马小型猪，中国农业科学院北京畜牧兽医研究所制备了PCSK9基因编辑五指山小型猪，这几种编辑猪，在断奶后，自发性血浆胆固醇（TC）水平是野生型的3~5倍，低密度脂蛋白胆固醇（LDL
‑
C）是野生型的2~3倍。r/>[0003]基本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种sgRNA，其特征在于：它包括核苷酸序列如SEQ ID NO.2或SEQ ID NO.10所示的APOE
‑
sgRNA2，和核苷酸序列如SEQ ID NO.7或SEQ ID NO.15所示的LDLR
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sgRNA3。2.一种CRISPR/Cas9载体，其特征在于：它是连接有与APOE
‑
sgRNA2对应的双链DNA的载体，和连接有与LDLR
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sgRNA3对应的双链DNA的载体；所述APOE
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sgRNA2的核苷酸序列如SEQ ID NO.2或SEQ ID NO.10所示；所述LDLR
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sgRNA3的核苷酸序列如SEQ ID NO.7或SEQ ID NO.15所示。3.根据权利要求2所述的CRISPR/Cas9载体，其特征在于：所述载体为pX458质粒载体。4.一种权利要求2或3所述CRISPR/Cas9载体的构建方法，其特征...

【专利技术属性】
技术研发人员：杜嘉祥，
申请(专利权)人：成都中科奥格生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：