含有热休克蛋白gp96的多肽、药物组合物和用途制造技术

本发明专利技术属于生物医药领域，涉及一种含有热休克蛋白gp96的多肽、药物组合物和用途。具体地，本发明专利技术涉及一种分离的多肽，其结构如下面的式I所示，其中：A表示gp96蛋白或gp96蛋白活性片段；B表示一个多肽片段，其结构如下面的式II所示，其中：m选自0、1、2、3、4、5，n选自1、2、3、4、5，r选自0、1、2、3、4、5，并且m和r不同时为0；B和A直接连接或通过连接片段连接。本发明专利技术的多肽能够显著地提高gp96蛋白的生物学活性，这对于靶向调节性T细胞的功能具有很大的提升，从而适合自身免疫性疾病的治疗，具有重要的临床应用价值。B——A式I(GGGGS)m

【技术实现步骤摘要】
含有热休克蛋白gp96的多肽、药物组合物和用途


[0001]本专利技术属于生物医药领域，涉及一种含有热休克蛋白gp96的多肽、药物组合物和用途。

技术介绍

[0002]调节性T细胞(Treg)在维持免疫稳态中发挥着关键作用，其中转录因子Foxp3决定了Treg细胞的发育和功能。foxp3基因缺陷可诱导人体Treg细胞功能障碍，从而导致免疫失调、多内分泌病、肠病和X染色体连锁综合征等一系列疾病的发生。Treg细胞功能缺陷或exTreg细胞发育与自身免疫性疾病呈正相关，如系统性红斑狼疮(SLE)、多发性硬化症(MS)、强直性脊柱炎(AS)等。
[0003]热休克蛋白(Heat shock protein，HSP)是一类在生物进化中高度保守且广泛存在于原核及真核生物中的蛋白质。HSP根据同源程度及分子量大小可分为HSP110、HSP90、HSP70、HSP60、HSP40、小分子HSP及泛素等多个亚家族。人类热休克蛋白90家族(HSP90)包括HSP90α,HSP90β,gp96(grp94)和Trap
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1四个成员。gp96(GRP94)为内质网HSP90家族的代表，与细胞质HSP90高度同源，主要生物学功能有：分子伴侣，参与新合成蛋白的折叠与组装；与细胞内的其他肽类蛋白质尤其是变性蛋白的结合，参与细胞的抗损伤、修复和热耐受过程；参与蛋白质水解过程；结合抗原肽，加工提呈肿瘤抗原及维持细胞内环境稳定等作用；对细胞的生长、发育、分化及死亡具有一定的调节作用。
[0004]gp96由于具有显著的生物学活性，特别是在免疫学方面同时具有刺激特异性杀伤T细胞的作用和抑制调节T细胞的作用。研究表明，gp96可以通过调节性T细胞(Treg)和CD14+HLA
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DR
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/low抑制体内的免疫反应。这为治疗自身免疫类疾病提供了新的思路。然而，gp96的免疫学功能却有待进一步提高。

技术实现思路

[0005]本专利技术人经过深入的研究和创造性的劳动，得到了一种分离的多肽。进一步地，所述分离的多肽形成二聚体形式的蛋白。本专利技术人惊奇地发现，该多肽或蛋白能够显著地提高gp96蛋白的生物学活性特别是免疫学功能。这对于靶向调节性T细胞的功能具有很大的提升，从而适合自身免疫性疾病的治疗，具有重要的临床应用价值。由此提供了下述专利技术：
[0006]本专利技术的一个方面涉及一种分离的多肽，其结构如下面的式I所示：
[0007]B——A
[0008]式I；
[0010]其中：
[0011]A表示gp96蛋白或gp96蛋白活性片段；
[0012]B表示一个多肽片段，其结构如下面的式II所示：
[0013](GGGGS)m
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(GGGGSC)n
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(GGGGS)r
[0014]式II
[0015]，其中：
[0016]m选自0、1、2、3、4、5，
[0017]n选自1、2、3、4、5，
[0018]r选自0、1、2、3、4、5，
[0019]并且m和r不同时为0；
[0020]B和A直接连接或通过连接片段连接；
[0021]并且式I的N端或C端连接有或不连接蛋白纯化标签例如4
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8个His或6个His。
[0022]在本专利技术的一些实施方式中，所述的分离的多肽，其中，式I的N端连接有或不连接蛋白纯化标签例如4
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8个His或6个His。
[0023]在本专利技术的一些实施方式中，所述的分离的多肽，其中，式I的C端连接有或不连接蛋白纯化标签例如4
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8个His或6个His。
[0024]在本专利技术的一些实施方式中，所述的分离的多肽，其中，A的氨基酸序列如SEQ ID NO:1所示。
[0025]MDDEVDVDGTVEEDLGKSREGSRTDDEVVQREEEAIQLDGLNASQIRELREKSEKFAFQAEVNRMMKLIINSLYKNKEIFLRELISNASDALDKIRLISLTDENALSGNEELTVKIKCDKEKNLLHVTDTGVGMTREELVKNLGTIAKSGTSEFLNKMTEAQEDGQSTSELIGQFGVGFYSAFLVADKVIVTSKHNNDTQHIWESDSNEFSVIADPRGNTLGRGTTITLVLKEEASDYLELDTIKNLVKKYSQFINFPIYVWSSKTETVEEPMEEEEAAKEEKEESDDEAAVEEEEEEKKPKTKKVEKTVWDWELMNDIKPIWQRPSKEVEEDEYKAFYKSFSKESDDPMAYIHFTAEGEVTFKSILFVPTSAPRGLFDEYGSKKSDYIKLYVRRVFITDDFHDMMPKYLNFVKGVVDSDDLPLNVSRETLQQHKLLKVIRKKLVRKTLDMIKKIADDKYNDTFWKEFGTNIKLGVIEDHSNRTRLAKLLRFQSSHHPTDITSLDQYVERMKEKQDKIYFMAGSSRKEAESSPFVERLLKKGYEVIYLTEPVDEYCIQALPEFDGKRFQNVAKEGVKFDESEKTKESREAVEKEFEPLLNWMKDKALKDKIEKAVVSQRLTESPCALVASQYGWSGNMERIMKAQAYQTGKDISTNYYASQKKTFEINPRHPLIRDMLRRIKEDEDDKTVLDLAVVLFETATLRSGYLLPDTKAYGDRIERMLRLSLNIDPDAKVEEEPEEEPEETAEDTTEDTEQDEDEEMDVGTDEEEETAKESTAE(SEQ ID NO:1)
[0026]SEQ ID NO:1对应的编码核酸的序列如SEQ ID NO:2所示。
[0027]atggatgacgaggtggatgtggatggtaccgtggaggaggacttgggtaagagcagggagggtagccgcactgatgacgaggttgttcagcgtgaggaggaggctattcagttggacggtttgaacgcaagccagattagggagctgcgtgagaagagcgagaagttcgctttccaggctgaggtgaaccgcatgatgaagttgatcattaacagcttgtacaagaacaaggagatcttcctgagagagctgatctcaaacgcttccgacgccctggacaagatccgcctgatctccctgactgacgagaacgccctgtccggcaacgaagaactgaccgtgaaaatcaaatgcgacaaagaaaagaacctgctccacgttaccgataccggtgtgggcatgacccgcgaggagctcgtgaagaacctgggtaccatcgctaagagcggaacctcggaatttctgaacaagatga本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种分离的多肽，其结构如下面的式I所示：B——A式I；其中：A表示gp96蛋白；B表示一个多肽片段，其结构如下面的式II所示：(GGGGS)m
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(GGGGSC)n
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(GGGGS)r式II，其中：m选自0、1、2、3、4、5，n选自1、2、3、4、5，r选自0、1、2、3、4、5，并且m和r不同时为0；B和A直接连接或通过连接片段连接；并且式I的N端或C端连接有或不连接蛋白纯化标签例如4
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8个His或6个His。2.根据权利要求1所述的分离的多肽，其中，A的氨基酸序列如SEQ ID NO:1所示。3.根据权利要求1至2中任一权利要求所述的分离的多肽，其中：m为0，n为1或2，并且r为1或2；或者m为1或2，n为1或2，并且r为1或2；优选地，B的氨基酸序列如SEQ ID NOs:3
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6中任一序列所示。4.根据权利要求1至3中任一权利要求所述的分离的多肽，其氨基酸序列如SEQ ID NOs:11
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14中任一序列所示。5.一种分离的蛋白，其为权利要求1至4中任一权利要求所述的分离的多肽的...

【专利技术属性】
技术研发人员：王子豪，武岳，程放，鞠莹，李鑫，徐玉秀，梁振涛，
申请(专利权)人：佛山热休生物技术有限公司，
类型：发明
国别省市：