一株具有调节肠道免疫失调症状的副干酪乳酪杆菌及其应用制造技术

本发明专利技术涉及功能微生物筛选与应用技术领域，具体提供了一株新型副干酪乳酪杆菌VHProbi F22株，其保藏号为CCTCC No：M2019941。本发明专利技术还提供所述副干酪乳酪杆菌在调节肠道免疫失调，以及清除DPPH自由基和胆固醇降解中的应用。所述副干酪乳酪杆菌VHProbi F22对人工肠胃液具有很强的耐受性，不产生溶血素，不溶解血细胞，对红霉素、四环素等常见的抗生素敏感，具有良好的生物安全性；能够耐受较高的盐度。该菌株抗氧化能力较强，还能有效降解胆固醇。另外，该菌株细胞表面疏水性为70.61％，有一定的黏附能力。所述副干酪乳酪杆菌VHProbi F22能有效缓解肠道免疫失调症状。F22能有效缓解肠道免疫失调症状。F22能有效缓解肠道免疫失调症状。

【技术实现步骤摘要】
一株具有调节肠道免疫失调症状的副干酪乳酪杆菌及其应用


[0001]本专利技术属于益生菌筛选与应用
，具体涉及一株具有调节肠道免疫失调症状的副干酪乳酪杆菌及其应用。

技术介绍

[0002]在过去的几十年里，受西方生活方式或工业化生活方式的影响，人类机体的过敏现象呈现急剧增长态势。过敏反应引发的疾病有鼻炎、哮喘、食物过敏、特应性皮炎和接触性皮炎等。有越来越多的证据表明，肠道菌群是影响免疫耐受性的重要环境因子。
[0003]肠道菌群群落结构建立的顺序发生改变时会导致辅助型T细胞分化出现改变，机体免疫系统中的Ⅰ型辅助T细胞(Th1细胞)和Ⅱ型辅助T细胞(Th2细胞)失衡，特别是平衡倾向于Th2细胞。例如在婴幼儿中，使用广谱抗生素会导致肠道菌群改变和肠道生态失调，过敏易感性增加。事实上，近些年来的流行病学调查研究显示，影响肠道菌群定植的环境因子与过敏风险具有一定的关联。
[0004]目前，过敏疾病主要以抗过敏药物和抗组织胺的治疗为主，但对于免疫力弱的患者不能从根本上解决，比如婴幼儿因肠道发育不完善导致的乳糖不耐症；另外组织胺会造成人体注意力降低、反应迟钝等不良反应。因此，寻找更合理的治疗过敏的方法具有重要意义。近些年来，通过益生菌治疗过敏性疾病已受到越来越多的关注。临床研究表明，益生菌能够诱导机体产生免疫应答和免疫耐受，通过胃肠粘膜呈递抗原可以提高免疫调节能力。益生菌可以增加IFN
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γ、IL
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2和IL
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12，促进T细胞向Th1分化，同时降低IL<br/>‑
4减少T细胞向Th2分化，调节Th1和Th2免疫平衡进而达到抗过敏的作用。
[0005]现有技术中已有一些关于益生菌调节过敏反应的相关研究。例如公开号为CN 111560330 A的中国专利技术专利公开了一株干酪乳杆菌，可以调节免疫、调节M1/M2型巨噬细胞平衡，增加Treg细胞的数量，可以改善小鼠结肠炎症状和抗宫颈癌；公开号为CN 102373173 B的中国专利技术专利公开了一株干酪乳杆菌，该菌株能够诱导巨噬细胞产生IL
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12、IL
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6，TNF
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α，具有增强免疫调节作用；公开号为CN 101139557 B的中国专利技术专利公开了一株干酪乳杆菌，能够对小鼠外周血T淋巴细胞亚群及其血清IgG水平及肠粘膜SigA水平产生影响，增强小鼠的细胞免疫、体液免疫和肠粘膜局部免疫功能。筛选具有调节免疫功能，缓解肠道免疫失调症状的益生菌具有非常重要的应用价值。

技术实现思路

[0006]本专利技术提供一株新型副干酪乳酪杆菌(Lacticaseibacillus paracasei)及其应用。所提供的副干酪乳酪杆菌能够降低促炎细胞因子水平，减轻肠道免疫失调症状，从而有效缓解过敏症状。
[0007]本专利技术所提供的副干酪乳酪杆菌，命名为副干酪乳酪杆菌VHProbi F22(Lacticaseibacillus paracasei VHProbi F22)，已于2019年11月18日保藏于中国武汉大学的中国典型培养物保藏中心，其保藏号为CCTCC No：M2019941。
[0008]本专利技术还提供所述的副干酪乳酪杆菌在调节肠道免疫失调中的应用。
[0009]本专利技术所提供的副干酪乳酪杆菌还可用于制备具有调节肠道免疫失调功效的功能性食品。
[0010]本专利技术提供的副干酪乳酪杆菌VHProbi F22对人工肠胃液具有很强的耐受性；VHProbi F22株不产生溶血素，不溶解血细胞，对红霉素、四环素等常见的抗生素敏感，具有良好的生物安全性；能够耐受较高的盐度，最大耐受盐浓度为6％。
[0011]该菌株抗氧化能力较强，该菌株还能有效降解胆固醇；另外，该菌株细胞表面疏水性为70％以上，有一定的黏附能力。
[0012]副干酪乳酪杆菌VHProbi F22具有较好的调节肠道免疫失调的功效。使用本专利技术提供的副干酪乳酪杆菌VHProbi F22有效缓解肠道免疫失调症状。
[0013]副干酪乳酪杆菌VHProbi F22的使用，能够有效降低肠道免疫失调模型小鼠血清中IL
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5、IL
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6、IFN
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γ、TNF
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α和OVA
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IgE,且益生菌预处理组效果优于后处理组效果。
[0014]从小鼠空肠组织HE染色结果来看，经副干酪乳酪杆菌VHProbi F22处理后，能够减轻空肠粘膜绒毛肿胀程度，减少上皮细胞脱落现象，减轻粘膜固有层萎缩程度，空肠粘膜绒毛有较好的完整性，且益生菌预处理组的效果优于后处理组。
[0015]副干酪乳酪杆菌VHProbi F22的使用，可以减少肠道的疣微菌门，增加拟杆菌门，益生菌大多属于拟杆菌门，过敏小鼠模型的肠道菌群结构更趋近于正常肠道，肠道菌群多样性也出现升高。
[0016]本专利技术提供的副干酪乳酪杆菌VHProbi F22，对机体无毒害作用，可添加到食品中，制备成具有缓解肠道免疫失调的功能性食品，具有广阔的应用前景。
附图说明
[0017]图1为培养菌落及光镜照片；
[0018]图2为蛋白指纹图；
[0019]图3为Riboprinter指纹图；
[0020]图4为RAPD指纹图；
[0021]图5为rep
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PCR指纹图；
[0022]图6为肠道免疫失调症状评分及湿便频率图，其中*为与肠道免疫失调组比较，P&lt;0.05；
[0023]图7为各组小鼠空肠HE染色结果图；
[0024]图8为各组细胞因子水平图，其中*与肠道免疫失调组比较，P&lt;0.05；
[0025]图9为物种多样性稀释曲线图；
[0026]图10为O1组和O2组具有统计学差异的物种丰度LAD值图；
[0027]图11为各组小鼠肠道菌群相对丰度柱形累加图。
具体实施方式
[0028]本专利技术所述筛选方法并不局限于实施例所述，已知的能够达到筛选目的的方法均可以，实施例的筛选说明只是对本专利技术的说明，并不是对本专利技术保护范围的限制。在不背离本专利技术精神和实质的情况下，对本专利技术方法、步骤或条件所作的修改或替换，均属于本专利技术
的范围。
[0029]下面结合具体实施例，对本专利技术做进一步阐述。
[0030]实施例1副干酪乳酪杆菌VHProbi F22的分离筛选
[0031]1、乳酸杆菌初筛
[0032]配制MRS(Man Rogosa Sharpe)琼脂培养基：纯化水1000mL，蛋白胨10g，牛肉浸取物10g，酵母提取物5.0g,乙酸钠5g，葡萄糖5g，磷酸二氢钾2g，吐温80 1.0mL，柠檬酸二胺2.0g,碳酸钙20g，七水硫酸镁0.58g，七水硫酸锰0.25g，琼脂15g，调pH 6.2
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6.5，121℃高压灭菌15min。
[003本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种副干酪乳酪杆菌，其特征在于，所述的副干酪乳酪杆菌的保藏编号为CCTCC No：M2019941。2.权利要求1所述的副干酪乳酪杆菌在调节肠道免疫失调中的应用。3.权利要求1所述的副干酪...

【专利技术属性】
技术研发人员：段治，崔洪昌，吴松洁，张景燕，张陆霞，
申请(专利权)人：青岛蔚蓝生物集团有限公司，
类型：发明
国别省市：