一种稳定性提高的碱性蛋白酶突变体及其应用制造技术

本发明专利技术涉及基因工程与蛋白质改造技术领域，具体涉及一种稳定性提高的碱性蛋白酶突变体及其应用。本发明专利技术以来源于克劳氏芽孢杆菌的野生型碱性蛋白酶AprE为基础，提供了包含选自T22S、S99A、S101G、P127Q、N138Q、G172A、F183D、V197I、P219W、A226G、N232D中所述突变位点的突变体。所述突变体在洗涤剂中的酶活稳定性比野生型有显著提高，从而有利于碱性蛋白酶在洗涤领域的广泛应用。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及蛋白质工程，具体涉及一种稳定性提高的碱性蛋白酶突变体及其应用。

技术介绍

1、碱性蛋白酶能够水解各类蛋白质污垢，如血液、汗渍、牛奶污渍等，并能够释放蛋白质包裹的污垢或因蛋白质加强对基底粘附力的污渍，与表面活性剂起到良好的协同去污能力。不同于粉状洗涤剂，液体洗涤剂是典型的酶失活环境，成分复杂，液体洗涤剂中碱性蛋白酶暴露于溶液中，与表面活性剂、螯合剂、漂白剂及其他助剂直接接触并作用，这使得蛋白酶的稳洗涤定性成为行业难题，稳定性提升策略成为研究热点。

2、表面活性剂也是合成洗涤剂的主要活性成分，能显著地降低液体的表面张力，使得油性液体污垢更容易从织物表面脱离；且表面活性剂能够吸附到固体不溶性 污垢表面，使其从基底转移到液体中，并随后通过搅拌作用冲洗去除。除此之外，表面活性剂还有增溶、乳化、分散和絮凝等作用。非离子表面活性剂是另一类使用量较高的活性物质，它通常与阴离子表面活性剂复配使用。阴离子表面活性剂会通过静电相互作用结合到洗涤剂中蛋白酶表面带有正电的氨基残基上并对其产生抑制作用，评估新筛选得到的碱性蛋白酶是否有应用于洗涤剂行业的潜力的本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种碱性蛋白酶突变体，其特征在于，所述突变体包含与SEQ ID NO:1具有至少95%同一性的氨基酸序列，且与SEQ ID NO:1相比在选自下组中的至少一个位置上包含氨基酸的取代：22，99，101，127，138，172，183，197，219，226，232。

2.如权利要求1所述的碱性蛋白酶突变体，其特征在于，所述突变体包含下组中至少一个氨基酸的取代：T22S，S99A，S101G，P127Q，N138Q，G172A，F183D，V197I，P219W，A226G，N232D。

3.如权利要求2所述的碱性蛋白酶突变体，其特征在于，所述突变体包含下组中至...

【技术特征摘要】

1.一种碱性蛋白酶突变体，其特征在于，所述突变体包含与seq id no:1具有至少95%同一性的氨基酸序列，且与seq id no:1相比在选自下组中的至少一个位置上包含氨基酸的取代：22，99，101，127，138，172，183，197，219，226，232。

2.如权利要求1所述的碱性蛋白酶突变体，其特征在于，所述突变体包含下组中至少一个氨基酸的取代：t22s，s99a，s101g，p127q，n138q，g172a，f183d，v197i，p219w，a226g，n232d。

3.如权利要求2所述的碱性蛋白酶突变体，...

【专利技术属性】
技术研发人员：张霞，许伟，李玉强，鲍锴，
申请(专利权)人：青岛蔚蓝生物集团有限公司，
类型：发明
国别省市：