那西肽厡粉的提取方法技术

本发明专利技术公开一种那西肽厡粉的提取方法，把原有的用离心机分离发酵液的方法，改用板框过滤，这样大大提高了单位时间处理量，减少设备投资；在粗品结晶步骤，利用那西肽不溶于水的性质，在浓缩结束时加入一定量的水，既不增加成本，又可大幅度提高收率（目前现有的收率为６０％左右，本发明专利技术的收率达到７５％以上）；精制步骤由原来的丁醇提取改用水洗，以达到提纯的目的，改进后的精制工艺生产的那西肽厡粉效价可达９２０－９８０ｕｇ／ｍｇ，不仅大幅度提高了产品含量而且由溶剂提取改用酸水洗涤还能大幅度降低生产成本。本发明专利技术的提取工艺具有方法简单，收率高，品质好等优点，具备工业化生产条件。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于生物制药领域，涉及一种动物用抗生素的提取方法，具体涉及一种制备含 硫多肽类抗生素那西肽原粉的提取方法。 技术背景-随着人类物质文明的不断进步及人们对自然界认识的不断深化，人类的健康发展越来 越备受关注，食品的安全问题也就至关重要。肉鱼蛋奶完全是用饲料换来的，要保证"吃" 和"喝"的放心，就要保证鱼肉蛋奶的安全，因此，饲料的安全至关重要。饲料安全是指 在饲料中不应含有有毒有害物质或因素，至少不应在畜禽水产品中残留蓄积转而危害人体 健康和对人类生存环境构成威胁。那西肽就是一种完全符合人们需求的绿色饲用添加剂。那西肽(nosiheptide)又名诺肽菌素(primofax)、多硫霉素(multhiomycin)。分子 式C51H43N13012S6，分子量1222. 37，是发酵工程产物。它是由12个氨基酸及其衍生物 组成的多肽，是一种新型的在动物体内不残留的饲料添加剂，它是一种新型非吸收的饲用 抗生素。那西肽产品科技含量高，原料成本低(黄豆饼粉、玉米粉等)，提取工艺简单，产品 本身毒性较低(口服LDs。〉13060毫克/公斤体重，腹腔注射LDs。〉4610毫克/公斤体重)。畜 禽、水产类动物食用本产品后，体内没有残留，且能够明显促进动物生长和改善饲料利用 率，符合绿色产品的要求。那西肽原粉具有含量高的特点，对下游生产厂家来说可以大幅 节约其运输成本。
技术实现思路
本专利技术的目的在于提供一种那西肽原粉的提取方法。本专利技术的目的是通过以下技术手段实现的，那西肽原粉的提取方法，包括下述步骤a、 取那西肽发酵液加热至80-9(TC，保温30分钟以上，加入助滤剂，过滤；b、 取那西肽滤渣，按l: 1.2的比例加入95%以上乙醇，控温45-5(TC，搅拌处理30 分钟以上，抽滤得乙醇提取液；c、 抽滤后滤渣，再加入70%乙醇，控温45-5(TC，搅拌处理30分钟以上，进行第二 次提取处理后，抽滤得乙醇提取液；d、 滤渣重复c步操作，再提取一遍，然后将三次乙醇提取液合并；e、 将乙醇提取液控温60-65°C，真空度0.08-0. 09Mpa减压浓縮乙醇，浓出原体积三分之二液体时，停止浓縮；f、 浓縮液内加入相当于浓縮液体积3倍的纯化水，温度降至l(TC以下结晶，离心， 50-6(TC干燥，得那西肽粗品；g、 那西肽粗品用相当于其重量10倍的pH值2-3的纯化水洗涤、离心分离，然后再 用pH值8-9的纯化水洗涤、离心分离，分离后那西肽原粉再用丙酮洗涤，离心分离，然 后干燥即得那西肽原粉。本专利技术的进一步技术方案是上述a步骤中过滤采用板框过滤。由上述技术方案可见，本专利技术在发酵液离心分离方面，把原有的用离心机分离发酵液 的方法，改用板框过滤，这样大大提高了单位时间处理量，减少设备投资；在粗品结晶步 骤，利用那西肽不溶于水的性质，在浓縮结束时加入一定量的水，既不增加成本，又可大 幅度提高收率(目前现有的收率为60%左右，本专利技术的收率达到75%以上)；精制步骤由 原来的丁醇提取改用酸水洗涤，以达到提纯的目的，改进后的精制工艺生产的那西肽原粉 效价可达920-980 ug/mg，不仅大幅度提高了产品含量而且由溶剂提取改用酸水洗涤还能 大幅度降低生产成本。本专利技术的提取工艺具有方法简单，收率高，品质好等优点，具备工 业化生产条件。具体实施例方式实施例一a、 取那西肽发酵液3500ml加热至8(TC，保温35分钟，加入助滤剂，板框过滤；b、 取那西肽滤渣，按l: 1.2的比例加入95%以上乙醇，控温45。C，搅拌处理30分 钟，抽滤得乙醇提取液；c、 抽滤后滤渣，再加入70%乙醇，控温45。C，搅拌处理30分钟，进行第二次提取 处理后，抽滤得乙醇提取液；d、 滤渣重复c步操作，再提取一遍，然后将三次乙醇提取液合并共3470ml;e、 将乙醇提取液控温60'C，真空度0.08Mpa减压浓縮乙醇，浓出原体积三分之二液 体时，停止浓縮；f、 浓縮液内加入相当于浓縮液体积3倍的纯化水，温度降至l(TC以下结晶，离心， 5(TC干燥，得那西肽粗品7. 18g;g、 那西肽粗品用相当于其重量10倍的pH值2-3的酸水洗涤、离心分离，然后再用 pH值8-9的纯化水洗涤、离心分离，分离后那西肽原粉再用丙酮洗涤，离心分离，然后干4燥即得那西肽原粉5.11g。发酵液3500ml效价1800ug/ml总亿0. 063乙醇提取液3470ml效价1752 ug/ml总亿0. 0608收率96.51%粗品7. 18g效价767 ug/mg总亿0. 0551收率90.63%精粉5. llg效价948 ug/mg总亿0.0484收率87.90%总收率0.0484+0.063 XI00% =76. 83%实施例二a、 取那西肽发酵液15000ml加热至85'C，保温30分钟，加入助滤剂，板框过滤；b、 取那西肽滤渣，按l: 1.2的比例加入95%以上乙醇，控温48。C，搅拌处理35分 钟，抽滤得乙醇提取液；c、 抽滤后滤渣，再加入70%乙醇，控温45。C，搅拌处理35分钟，进行第二次提取 处理后，抽滤得乙醇提取液；d、 滤渣重复c步操作，再提取一遍，然后将三次乙醇提取液合并共14350ml;e、 将乙醇提取液控温55°C，真空度0.09Mpa减压浓縮乙醇，浓出原体积三分之二液 体时，停止浓縮；f、 浓縮液内加入相当于浓縮液体积3倍的纯化水，温度降至IO'C以下结晶，离心， 55'C干燥，得那西肽粗品26. 85g;g、 那西肽粗品用相当于其重量10倍的pH值2-3的酸水洗涤、离心分离，然后再用 pH值8-9的纯化水洗涤、离心分离，分离后那西肽原粉再用丙酮洗涤，离心分离，然后干 燥即得那西肽原粉20.41g。发酵液15000ml效价1685ug/ml总亿0. 253乙醇提取液14350ml效价1686ug/ml总亿0. 242收率95. 65%粗品26. 85g效价838ug/mg总亿0.225收率92. 98%精粉20. 41g效价975ug/mg总亿0. 199收率88. 44%总收率0. 199 + 0. 253X100% =78. 66%实施例三a、 取那西肽发酵液8000ml加热至9(TC，保温30分钟，加入助滤剂，板框过滤；b、 取那西肽滤渣，按l: 1.2的比例加入95%以上乙醇，控温50。C，搅拌处理30分 钟，抽滤得乙醇提取液；c、 抽滤后滤渣，再加入70%乙醇，控温5(TC，搅拌处理30分钟，进行第二次提取处理后，抽滤得乙醇提取液；d、 滤渣重复c步操作，再提取一遍，然后将三次乙醇提取液合并共7470ml;e、 将乙醇提取液控温65°C，真空度0.08Mpa减压浓縮乙醇，浓出原体积三分之二液 体时，停止浓縮；f、 浓縮液内加入相当于浓縮液体积3倍的纯化水，温度降至l(TC以下结晶，离心， 6(TC干燥，得那西肽粗品15. 03g;g、 那西肽粗品用相当于其重量10倍的pH值2-3的酸水洗涤、离心分离，然后再用 pH值8-9的纯化水洗涤、离心分离，分离后那西肽原粉再用丙酮洗涤，离心分离，然后干 燥即得那西肽原粉11.79g。1750ug/ml 总亿0. 14 1763ug/ml 总亿0. 132 改价 825ug/mg 总亿本文档来自技高网...

【技术保护点】
那西肽原粉的提取方法，其特征在于：　ａ、取那西肽发酵液加热至８０－９０℃，保温３０分钟以上，加入助滤剂，过滤；　ｂ、取那西肽滤渣，按１∶１．２的比例加入９５％以上乙醇，控温４５－５０℃，搅拌处理３０分钟以上，抽滤得乙醇提取液；　 　ｃ、抽滤后滤渣，再加入７０％乙醇，控温４５－５０℃，搅拌处理３０分钟以上，进行第二次提取处理后，抽滤得乙醇提取液；　ｄ、滤渣重复ｃ步操作，再提取一遍，然后将三次乙醇提取液合并；　ｅ、将乙醇提取液控温６０－６５℃，真空度０． ０８－０．０９Ｍｐａ减压浓缩乙醇，浓出原体积三分之二液体时，停止浓缩；　ｆ、浓缩液内加入相当于浓缩液体积３倍的纯化水，温度降至１０℃以下结晶，离心，５０－６０℃干燥，得那西肽粗品；　ｇ、那西肽粗品用相当于其重量１０倍的ｐＨ值２－ ３的酸水洗涤、离心分离，然后再用ｐＨ值８－９的纯化水洗涤、离心分离，分离后那西肽原粉再用丙酮洗涤，离心分离，然后干燥即得那西肽原粉。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：刘瑞华，孙冠中，李为全，姚健，杨春丽，朱立元，
申请(专利权)人：安徽省皖北药业股份有限公司，
类型：发明
国别省市：34[中国|安徽]