新疆一枝蒿组织培养及快速繁殖方法技术

本发明专利技术属于新疆一支蒿的组织培养技术领域，公开了新疆一枝蒿组织培养及快速繁殖方法。该方法包括：A、将新疆一支蒿种子杀菌培养获得无菌苗；B、将步骤A获得的无菌苗剪取茎段接种到含无糖培养液和激素的培养基质中，通过调节培养条件连续生根和壮苗培养，培养后进行移栽；步骤B中所述含无糖培养液为不含任何有机糖的1/2MS液体培养基，所述激素为0.01

【技术实现步骤摘要】
新疆一枝蒿组织培养及快速繁殖方法


[0001]本专利技术属于新疆一支蒿的组织培养
，特别涉及新疆一枝蒿组织培养及快速繁殖方法。

技术介绍

[0002]新疆一支蒿（Artemisia rupestris L.），为菊科艾属植物岩蒿 Artemisia rupestris L.，以全草入药，为多年生草本植物，主要分布于我国新疆，生长在海拔 1600～3700m 森林草原带。多个中药方剂中均应用一枝蒿，由于一枝蒿疗效显著，至使近年来人为滥采滥挖，野生一枝蒿资源破坏严重，分布面积及密度逐年缩小，价格也随之逐年上涨，具有很高的药用和生产价值。
[0003]目前，一支蒿主要通过温室播种育苗或大田撒播育苗，耕地、整地后，通过沟播（或畦播、条播）、培育壮苗等田间管理后，才能进行大田移栽，种子繁殖变异性较大，种苗品质特性不均一，并且其操作复杂、繁殖周期长，劳动工作量大，难以实现一支蒿机械化、规模化、产业化生产需要。
[0004]常规组培苗生根培养是在含有的蔗糖培养基中，很容易造成污染，而且生根培养时间较长；且组培生根培养和炼苗操作复杂繁琐，耗费时间较多，工作量大，对对规模化生产有一定局限性，难以实现快速扩繁的目的。因此，急需一种新疆一枝蒿组织快繁的方法，用以解决一枝蒿现实生产需求。

技术实现思路

[0005]为了解决现有技术中中缺乏新疆一枝蒿组培苗生根培养方法、且现有组培方法容易造成污染、生根时间长、且生根培养和炼苗操作复杂繁琐、耗费时间多、工作量大等技术问题，本专利技术提供了新疆一枝蒿组织培养及快速繁殖方法。
[0006]为了解决上述技术问题，本专利技术采用以下技术方案：本专利技术提供了新疆一枝蒿组织培养及快速繁殖方法，所述方法包括以下步骤：A、将新疆一支蒿种子无菌、消毒处理，然后进行无菌水冷冻处理；将处理后的一支蒿种子接种于萌发培养基中培养，获得无菌苗；B、将步骤A获得的无菌苗剪取茎段接种到含无糖培养液和激素的培养基质中，通过调节培养条件连续生根和壮苗培养，培养后进行移栽；步骤A中萌发培养基为：质量分数为20
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30%蔗糖和7
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7.5%琼脂的1/2MS固体培养基；步骤B中所述含无糖培养液为不含任何有机糖的1/2MS液体培养基，所述激素为0.01
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0.02mg/l的吲哚丁酸（IBA）或0.03
‑
0.05mg/L的萘乙酸（NAA），所述培养基质为蛭石、珍珠岩、沙或石棉；培养条件包括起初培养和壮苗培养条件。
[0007]进一步地，步骤B中，起初培养条件为：温度23
‑
25℃，3000
‑
5000lx光照培养2
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3天，14
‑
16 h/天。
[0008]进一步地，步骤B中，壮苗培养条件为：温度为23
‑
25℃，光强为5000
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8000 lx，光照时间为16
‑
18 h/天，增加CO2供气量，起始供气量为400
‑
600ml/min，光照时每供气10
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20 min暂停10
‑
20 min后再供气10
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20min，如此反复，每隔两天供气量增加200ml/min，增加至1000
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1500ml/min通气量不在增加，培养10
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15天后进行移栽。
[0009]进一步地，步骤A中培养条件为：温度为23
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25℃，暗培养1
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2天，然后置于光照连续培养10
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15天，温度为23
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25℃，光照时间为14
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16h/天，光照强度为5000
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8000lx。
[0010]更进一步地，步骤A或步骤B中，pH调节到5.8
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6.0。
[0011]进一步地，步骤A中的无菌、消毒处理为：先用0.05%Tween20的无菌水进行清洗1
‑
2次，然后用无菌水洗涤2
‑
3次，0.5
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1.0 min/次；然后加入消毒溶液缓慢振荡消毒，消毒溶液为75%的酒精溶液，浸泡20
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30s后，无菌水清洗2
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3次，每次2
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3 min/次；再用2
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5%的NaClO消毒液震荡消毒2
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5 min，最后无菌水洗涤3
‑
5次，2
‑
3 min/次。
[0012]进一步地，无菌水冷冻处理的条件为：无菌水在
‑
20℃温度下冷冻处理10
‑
15min。
[0013]本专利技术提供了新疆一枝蒿组织培养及快速繁殖方法，实现了新疆一支蒿的组织培养及快速繁殖技术，组培苗生根与壮苗一步培养法，组培苗生根培养液采用不含任何有机糖（比如蔗糖）的1/2MS培养基+0.01
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0.02mg/l的吲哚丁酸（IBA）或0.03
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0.05mg/L的萘乙酸（NAA），培养基简单且大大降低污染概率，生根快，几天内即可长出健壮根系；协同控制光照条件和CO2通气量，进一步促进组培苗自养生长，对外界生长环境适应性强，大大缩短培养周期。该方法操作简便，生根和壮苗两个步骤同时进行，整个培养过程极大缩短培养周期，同时降低污染，提高成活率，可以为实现大量选育、快速繁殖，规模化推广提供技术支持。
附图说明
[0014]图1 为本专利技术实施例1的一枝蒿无菌苗示意图；图2 为本专利技术实施例1的一枝蒿的生长苗示意图。
具体实施方式
[0015]本专利技术公开了新疆一枝蒿组织培养及快速繁殖方法，本领域技术人员可以借鉴本文内容，适当改进工艺参数实现。特别需要指出的是，所有类似的替换和改动对本领域技术人员来说是显而易见的，它们都被视为包括在本专利技术当中。本专利技术的方法及应用已经通过较佳实施例进行了描述，相关人员明显能在不脱离本
技术实现思路
、精神和范围内对本文所述的方法和应用进行改动或适当变更与组合，来实现和应用本专利技术技术。
[0016]本专利技术提供了新疆一枝蒿组织培养及快速繁殖方法，所述方法包括以下步骤：A、将新疆一支蒿种子无菌、消毒处理，然后进行无菌水冷冻处理；将处理后的一支蒿种子接种于萌发培养基中培养，获得无菌苗；B、将步骤A获得的无菌苗剪取茎段接种到含无糖培养液和激素的培养基质中，通过调节培养条件连续生根和壮苗培养，培养后进行移栽；步骤A中萌发培养基为：质量分数为20
‑
30%蔗糖和7
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7.5%琼脂的1/2MS固体培养基；步骤B中所述含无糖培养液为不含任何有机糖的1/2MS液体培养基，所述激素为0.01
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0.02mg/l的吲哚丁酸（IBA）或0.03
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0.05mg/L的萘乙酸（NAA），所述培养基质为本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.新疆一枝蒿组织培养及快速繁殖方法，其特征在于，所述方法包括以下步骤：A、将新疆一支蒿种子无菌、消毒处理，然后进行无菌水冷冻处理；将处理后的一支蒿种子接种于萌发培养基中培养，获得无菌苗；B、将步骤A获得的无菌苗剪取茎段接种到含无糖培养液和激素的培养基质中，通过调节培养条件连续生根和壮苗培养，培养后进行移栽；步骤A中萌发培养基为：质量分数为20
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30%蔗糖和7
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7.5%琼脂的1/2MS固体培养基；步骤B中所述含无糖培养液为不含任何有机糖的1/2MS液体培养基，所述激素为0.01
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0.02mg/l的吲哚丁酸（IBA）或0.03
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0.05mg/L的萘乙酸（NAA），所述培养基质为蛭石、珍珠岩、沙或石棉；培养条件包括起初培养和壮苗培养条件。2.如权利要求1所述的新疆一枝蒿组织培养及快速繁殖方法，其特征在于，步骤B中，起初培养条件为：温度为23
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25℃，3000
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5000lx光照培养2
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3天，14
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16h/天。3.如权利要求1或2所述的新疆一枝蒿组织培养及快速繁殖方法，其特征在于，步骤B中，壮苗培养条件为：温度为23
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25℃，光强为5000
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8000 lx，光照时间为16
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18 h/天，增加CO2供气量，起始供气量为400
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600ml/min，光照时每供气10
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20min暂停10
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20min后再供气10
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20min，如此反复，每隔两天供气量增加200ml/min...

【专利技术属性】
技术研发人员：郝小军，潘虹，林慧，
申请(专利权)人：新疆中亚果树产业研究院有限公司，
类型：发明
国别省市：