本发明专利技术涉及一种药用植物多花黄精组培苗快速成苗方法，属于植物组织培养技术领域。该方法是通过将多花黄精组培苗(带芽小块茎)浸泡于BA100～400mg/L、GA400mg/L和IAA 500mg/L混合液中3～12h代替现有技术中的长时间低温处理，来打破块茎休眠，缩短培养时间。同时本发明专利技术通过激素浓度、处理时间和基质配比的筛选，使移栽出苗率达到90％以上。使移栽出苗率达到90％以上。使移栽出苗率达到90％以上。
【技术实现步骤摘要】
一种药用植物多花黄精组培苗快速成苗方法
[0001]本专利技术属于植物组织培养
，尤其涉及一种药用植物多花黄精组培苗快速成苗方法。
技术介绍
[0002]多花黄精(Polygonatum cyrtonemaHuad.)为百合科黄精属多年生草本植物，为我国传统的大宗药材，其植株形态优美，易于盆栽观赏，是集食用、药用和观赏价值于一体的林下药用植物。2015版《中国药典》收录的3种黄精中以多花黄精价值最高。研究表明，多花黄精根茎中含有的多糖、甾体皂苷、氨基酸等成分，具有抗菌、降压、降脂等作用。
[0003]在生产中，多花黄精以根状茎繁殖为主，种子繁殖仅见少数文献报道，究其原因是其种子存在休眠，且生长速度慢，四年方可移栽大田；而根茎繁殖用种量大，繁殖系数低，且长期的分根无性繁殖极易引起种质退化和药材品种不稳定。目前，多花黄精的离体培养技术已有相关报道，如《一种多花黄精组织培养方法》(专利号：CN109169286)采用1
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6℃低温处理打破多花黄精芽休眠，低温暗培养时间达30～80d，培养周期长；《一种多花黄精组织培养与快速繁殖方法》(专利号：CN107047298A)采用生长高度在5cm以上的生根组培苗移栽，其炼苗过程繁琐，不可控因素多，且存在组培苗需要缓苗、生长速度慢等问题；《优质多花黄精试管苗快速繁殖方法》(专利号：CN102550413B)采用块根膨大、块根分切循环培养的方式已获得芽或块根的增殖，继而经生根培养获得完整组培苗，其增殖系数较低，且带芽块根增殖培养周期较长，30
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40d才见新的芽体冒出。
[0004]研究表明，多花黄精初生根茎具有休眠特性，4
‑
10℃低温和激素处理方可打破其休眠，同初生根茎相似，当年移栽多花黄精带芽根茎出苗率极低。因此，建立该类型植物优良无性系的快繁体系，探寻最佳的移栽关键技术，以提高多花黄精的繁殖效率，同时缩短培养周期、降低生产成本，对于其优异种质的规模化生产具有重要意义。
技术实现思路
[0005]为了解决上述技术问题，本专利技术提供一种药用植物多花黄精组培苗快速成苗方法。
[0006]为达上述目的，本专利技术采用如下的技术方案：
[0007]一种药用植物多花黄精组培苗快速成苗方法，所述方法包括以下步骤：
[0008](1)“以芽增芽”接种方式为：切取带1个芽的多花黄精根茎组织块接种于增殖培养基中，每瓶接种5
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6个芽；“以芽繁芽”方式增殖培养基为：MS改良培养基+6
‑
BA2.0～4.0mg/L+ZT 0.5～1.0mg/L+IAA0.5～1.0mg/L+白糖30g/L+琼脂5.3g/L，培养条件为：光照强度2000lx，16h/d，温度25
±
2℃。将诱导出的新芽重复循环步骤(1)上述过程，直至达到规模化生产所需的数量进入后续的带芽块茎培养步骤。每一循环培养周期为25
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30d。
[0009](2)带芽块茎获取：将生长至2.0cm左右的小苗在基部切下，接种于生根和块茎形成培养基中，每瓶接种15株，培养28
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32d可得生根组培苗，生根率最高达100％；培养大于
50d，可得带芽和根的小块茎。生根和块茎形成培养基为1/2MS改良培养基+ABT 0.5～2.0mg/L+IBA0.2～1.0mg/L+活性炭0.1～0.5g/L+白糖50～80g/L+琼脂5.3g/L。
[0010]所述的MS改良培养基大量元素组分及其对应的浓度为：硝酸钾1620mg/L、硝酸铵1650mg/L、四水硝酸钙400mg/L、七水硫酸镁370mg/L、磷酸二氢钾220mg/L、无水氯化钙270mg/L；其他微量元素、铁盐和有机化合物与MS培养基相同；
[0011]所述的1/2MS为上述改良MS培养基中大量元素减半，其他不变。
[0012](3)带芽块茎移栽基质和苗床准备：育苗基质为黄心土、泥炭、树皮、谷壳(其中黄心土：轻基质体积比为1:2，轻基质为泥炭、树皮、谷壳按体积比为4:3:3的混合物)，按比例将各组分充分拌匀，制作成苗床高15cm，宽120cm的育苗床，育苗方式为大棚苗床育苗；
[0013]基质浸湿与消毒：将育苗基质浇透水后用洒水壶淋撒0.5％的高锰酸钾溶液，后放置10小时以上(一般为过夜，上覆塑料薄膜)。
[0014](4)组培带芽块茎清洗、处理与杀菌(打破了块茎休眠)：
[0015]将生根和块茎形成培养基上培养50天以上形成的多花黄精带芽小块茎从瓶中取出，抖落附着的培养基，用清水漂洗干净，用BA 100～400mg/L、GA400mg/L和IAA 500mg/L混合液浸泡3～12h，移栽前速蘸(时间约1
‑
2秒)浓度为1
‰
的甲基托布津与1
‰
多菌灵混合杀菌剂和1％的ABT生根剂混合溶液，移栽完后用洒水壶浇定根水。
[0016]与现有技术相比，本专利技术具有如下有益效果：
[0017](1)缩短了组培苗培养周期，如打破多花黄精根茎芽休眠只需激素处理几个小时，较低温处理缩短30
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80d；
[0018](2)精简了培养步骤，如组培过程中炼苗，需慢慢松开组培瓶瓶盖，并控制适宜的温湿度，而本专利技术中所培育的根茎芽无需炼苗，从而延长了生长期；
[0019](3)成本低、取材方便、操作简单，本专利技术各培养步骤中所使用的的培养基，均采用白糖来代替传统的蔗糖，同样为植物生长提供充足的碳水化合物，且在移栽时采用黄心土、泥炭及农林废弃物(树皮、锯末和谷壳等)，使得废弃物重利用，保护了环境、降低了成本，便于工厂化种苗生产；
[0020](4)本专利技术通过激素浓度、处理时间和基质配比的筛选，移栽出苗率高达90％以上。
附图说明
[0021]图1为实施例2中移栽当年秋季带芽小块茎萌苗。
[0022]图2a、2b为实施例2中移栽第二年秋季萌发及生长情况。
具体实施方式
[0023]实施例1
[0024]本实施例对打破块茎休眠的方式进行了比较，具体步骤如下：
[0025]第一种方式：将多花黄精组培出的带芽块茎从瓶中取出，抖落附着的培养基，用清水漂洗干净，用BA 0～400mg/L、GA400mg/L和IAA500mg/L混合液浸泡0～12h，移栽前速蘸(时间约1
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2秒)浓度为1
‰
的甲基托布津与1
‰
多菌灵混合杀菌剂和1％的ABT生根剂混合溶液，移栽完后用洒水壶浇定根水，当BA、GA和IAA的添加量为0时作为对照组。
[0026]第二种方式：将多花黄精带芽块茎从瓶中取出，抖落附着的培养基，用清水漂洗干净，置于0
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5℃低温环境下处理10
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50天，以不处理的做对照，移栽前速蘸(时间约1
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2秒)浓度为1
‰
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【技术保护点】
【技术特征摘要】
1.一种药用植物多花黄精组培苗快速成苗方法，其特征在于，所述方法是通过将多花黄精带芽小块茎浸泡于BA 100～400mg/L、GA400mg/L和IAA 500mg/L混合液中3～12h来打破块茎休眠，缩短培养时间。2.根据权利要求1所述的药用植物多花黄精组培苗快速成苗方法，其特征在于，所述方法包括以下步骤：(1)“以芽增芽”接种方式为：切取多花黄精根茎组织块并将其接种于增殖培养基中，所述增殖培养基为：MS改良培养基+6
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BA2.0～4.0mg/L+ZT 0.5～1.0mg/L+IAA0.5～1.0mg/L+白糖30g/L+琼脂适量；(2)带芽块茎获取：将生长至1.8
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2.2cm的小苗在基部切下，接种于生根和块茎形成培养基中，培养50d后即可得带芽小块茎；生根和块茎形成培养基为1/2MS改良培养基+ABT 0.5～2.0mg/L+IBA 0.2～1.0mg/L+活性炭0.1～0.5g/L+白糖50～80g/L+琼脂适量；(3)带芽块茎移栽基质和苗床准备：育苗基质为黄心土、泥炭、树皮、谷壳，将各组分充分拌匀，制作成苗床，后浸湿基质并消毒；(4)组培带芽块茎清洗、处理与杀菌：将步骤(2)中的多花黄精带芽块茎漂洗干净，用BA 100～400mg/L、GA300～400mg/L和IAA 500mg/L混合液浸泡3～12h，移栽前进行杀菌处理，移栽完后用洒水壶浇定根水。3.根据权利要求2所述的药用植物多花黄精组培苗快速成苗方法，其特征在于，所述步骤(1)中的培养条件为：光照强度2000lx，16h/d，温度25
【专利技术属性】
技术研发人员：李峰卿，刘素贞，周新华，曾满生，姚甲宝，潘文婷，邹玉玲，罗桂生，
申请(专利权)人：中国林业科学研究院亚热带林业实验中心，
类型：发明
国别省市：
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