一种蓝莓的组织培养育苗方法技术

本发明专利技术公开了一种蓝莓的组织培养育苗方法，属于植物组织培养技术领域。该方法包括以下步骤：S01，外植体的准备与诱导培养：获取外植体，在诱导培养基上培养，得到诱导培养的芽；S02，继代培养：将所述诱导培养的芽在继代培养基上培养，得到继代苗；S03，复壮培养：将所述继代苗在复壮培养基上培养，得到复壮苗。本发明专利技术的方法继代繁殖系数高，芽高茎粗，周期短，利于生根成苗，利用该组织培养育苗技术，继代周期缩短了15～20d，具有减少能耗，提高空间利用率，提高生产效率，降低生产成本等优点。降低生产成本等优点。

【技术实现步骤摘要】
一种蓝莓的组织培养育苗方法


[0001]本专利技术属于植物组织培养
，特别是涉及一种蓝莓的组织培养育苗方法。

技术介绍

[0002]蓝莓，学名越橘，果实为蓝色，甜酸适中，果肉细腻，是世界卫生组织认定的“人类最佳营养价值十大产品”中唯一的水果。其中富含抗氧化功能的花青素，能帮助人体中和由于新陈代谢所产生的有害微粒“自由基”，具有保护眼睛、延缓衰老、增强皮肤弹性、增强人体免疫力、降低心血管疾病发病率以及降低各种癌症发病率等保健作用，被国际粮农组织列为人类“五大健康果品”之一。
[0003]鉴于蓝莓市场广阔，对蓝莓的苗木需求越来越旺盛。通过种子繁殖育苗、扦插育苗、嫁接育苗等传统育苗方法往往存在繁殖系数低、成活率不高、发芽率低等问题。而通过组织培养育苗方法，可以在相对较短时间内繁育出大量的无病毒健康种苗，降低生产周期和企业生产成本。组织培养育苗技术已成为蓝莓行业种苗繁育的主要生产方式，广泛应用于蓝莓苗木的生产实践中。CN101869078A公开了蓝莓组培微繁育苗方法，该方法生长季节从田间采集蓝莓新梢，无菌条件下，经表面消毒，用无菌水冲后，剪切成带1～2个芽茎段，将带1～2个芽的茎段接种到初代诱导培养基WPM+ZT 3.0mg/L+NAA 0.02mg/L+蔗糖30g/L+琼脂6.5g/L上，该培养基pH 5.4；经过2～3代的培养，获得无菌的、旺盛生长的、分枝多的组培无性系；在蓝莓组培苗继代增殖培养阶段，采用增殖培养基WPM+ZT 0.5～1.5mg/L+CPPU0.05～1.0mg/L+蔗糖30g/L+琼脂6.5g/L，pH 5.4；每50～60天一个继代周期，繁殖系提高5～10倍。CN102870680A公开了一种适宜脱毒兔眼蓝莓的高效快繁技术，该技术采用外植体材料为当年生幼嫩枝，采用以下步骤获得优质脱毒苗：a、无菌苗的获得，b、丛生芽的诱导与增殖，c、叶片再生体系的建立，d、试管苗生根培养，e、炼苗；优质脱毒苗采用以下方法进行改良：f、丛生芽的诱导与增殖，g、叶片再生体系的优化，h、试管苗的瓶内生根优化，i、炼苗基质的优化。本方法从叶片再生、增殖培养、生根培养到炼苗这一系列环节进行了优化，建立了一种可高效、快速、持续获得优良的脱毒兔眼组培种苗技术。CN103583368A公开了兔眼蓝莓组培快繁体系的构建方法，该方法选取水培苗的茎段为外植体，用酒精和升汞处理后接种在茎芽系诱导培养基中，进一步将茎芽系诱导培养的茎段竖直插于茎芽系增殖培养中，并在生根培养中取IBA浓度2.0mgL
‑1，生根率高于85％。CN102812905A公开了蓝莓嫩茎段组培快繁工艺，该工艺包括以下步骤：S1、从田间选取未木质化的嫩茎，洗净消毒，切成带芽茎段；S2、诱导培养，采用的诱导培养基为MS+ZT3.0mg/L+IBA0.1mg/L+蔗糖30g/L+琼脂粉6.5g/L；S3、继代培养，采用的继代增殖培养基为MS+ZT0.5～1.5mg/L+IBA0.05～0.1mg/L+蔗糖30g/L+琼脂6.5g/L；在蓝莓出瓶移栽之前采用MS+ZT0.3～0.7mg/L培养基进行苗木复壮。

技术实现思路

[0004]本专利技术的目的是提供一种蓝莓组织培养育苗方法，该方法在得到较高繁殖系数，
芽粗，缩短了继代周期，保证了种苗的质量，提高了生产效率，进一步降低了生产成本。
[0005]本专利技术在于公开一种蓝莓的组织培养育苗方法，其特征在于，包括以下步骤：
[0006]S01，外植体的准备与诱导培养：获取外植体，在诱导培养基上培养，得到诱导培养的芽；
[0007]S02，继代培养：将所述诱导培养的芽在继代培养基上培养，得到继代苗；
[0008]S03，复壮培养：将所述继代苗在复壮培养基上培养，得到复壮苗。
[0009]在本专利技术的一些实施方式中，S01中，诱导培养基中包括基础培养基、激素、蔗糖；所述激素为1.5
‑
2.5mg/L的ZT，优选为1.8
‑
2.2mg/L。
[0010]在本专利技术的一些实施方式中，S02中，继代培养基中包括基础培养基、激素、蔗糖；所述激素为0.5
‑
1.5mg/L的ZT，优选为0.8
‑
1.2mg/L。
[0011]在本专利技术的一些实施方式中，S03中，复壮培养基中包括基础培养基、激素、蔗糖；所述激素为0.2
‑
0.8mg/L的ZT，优选为0.4
‑
0.8mg/L。
[0012]在本专利技术的一些实施方式中，所述基础培养基为WPM、改良WPM或优化WPM；
[0013]所述优化WPM为以154mg/L EDDHAFe6代替原WPM培养基中的硫酸亚铁和乙二胺四乙酸钠；
[0014]所述改良WPM为以0.05
‑
0.15mg/L VB1、650
‑
700mg/LCa(NO3)2·
4H2O、70
‑
75mg/LC
10
H
13
FeN2NaO8、160
‑
210mg/L KNO3代替原WPM培养基中K2SO4、CaCl2、FeSO4、EDTA
‑
Na。
[0015]在本专利技术的一些实施方式中，所述诱导培养基、继代培养基和复壮培养基中的蔗糖均为20
‑
30mg/L。
[0016]在本专利技术的一些实施方式中，所述诱导培养基、继代培养基和复壮培养基中均还包括4
‑
6mg/L的琼脂。
[0017]在本专利技术的一些实施方式中，S01、S02和S03中，均先暗培养再光照培养；
[0018]优选地，S01中，先暗培养8
‑
12d，再光照培养50
‑
60d；
[0019]优选地，S02中，先暗培养1
‑
3d，再光照培养60
‑
70d；
[0020]优选地，S03中，先暗培养1
‑
3d，再光照培养60
‑
70d；
[0021]优选地，S01、S02和S03中，所述光照培养中，光照时长均为12h/d或16h/d，进一步优选为12h/d。
[0022]优选地，S01、S02和S03中，所述暗培养再光照培养中，温度均为23
‑
28℃。
[0023]在本专利技术的一些实施方式中，还包括以下步骤：
[0024]S04，炼苗：将所述复壮苗移植到室外培养，开盖中继续培养，得到瓶苗；
[0025]S05，瓶外生根：将所述瓶苗蘸生根剂后扦插到苗床，淋定根水，遮阴，定期喷水。
[0026]在本专利技术的一些实施方式中，S01中，采集无病毒区生长健壮两周内新抽的嫩芽，消毒，剪取带一个腋芽的茎段作为外植体；
[0027]优选地，所述消毒为用75％的酒精浸泡15S，无菌水冲洗一遍，再用1％次氯酸钠浸泡10min，无菌水冲洗5遍。本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种蓝莓的组织培养育苗方法，其特征在于，包括以下步骤：S01，外植体的准备与诱导培养：获取外植体，在诱导培养基上培养，得到诱导培养的芽；S02，继代培养：将所述诱导培养的芽在继代培养基上培养，得到继代苗；S03，复壮培养：将所述继代苗在复壮培养基上培养，得到复壮苗。2.根据权利要求1所述的蓝莓的组织培养育苗方法，其特征在于，S01中，诱导培养基中包括基础培养基、激素、蔗糖；所述激素为1.5
‑
2.5mg/L的ZT，优选为1.8
‑
2.2mg/L；和/或，S02中，继代培养基中包括基础培养基、激素、蔗糖；所述激素为0.5
‑
1.5mg/L的ZT，优选为0.8
‑
1.2mg/L；和/或，S03中，复壮培养基中包括基础培养基、激素、蔗糖；所述激素为0.2
‑
0.8mg/L的ZT，优选为0.4
‑
0.8mg/L。3.根据权利要求1或2所述的蓝莓的组织培养育苗方法，其特征在于，所述基础培养基为WPM、改良WPM或优化WPM；所述优化WPM为以154mg/L EDDHAFe6代替原WPM培养基中的硫酸亚铁和乙二胺四乙酸钠；所述改良WPM为以0.05
‑
0.15mg/L VB1、650
‑
700mg/LCa(NO3)2·
4H2O、70
‑
75mg/LC
10
H
13
FeN2NaO8、160
‑
210mg/L KNO3代替原WPM培养基中K2SO4、CaCl2、FeSO4、EDTA
‑
Na；和/或，所述诱导培养基、继代培养基和复壮培养基中的蔗糖均为20
‑
30g/L；和/或，所述诱导培养基、继代培养基和复壮培养基中均还包括4
‑
6mg/L的琼脂。4.根据权利要求1
‑
3任一所述的蓝莓的组织培养育苗方法，其特征在于，S01、S02和S03中，均先暗培养再光照培养；优选地，S01中，先暗培养8
‑

【专利技术属性】
技术研发人员：蒋艳莲，陈日远，章笑赟，
申请(专利权)人：广州智源农业科技发展有限公司，
类型：发明
国别省市：