一种用芽孢杆菌降解原油的方法技术

本发明专利技术分开了一种用芽孢杆菌降解原油的方法，按８０～１５０ｍｌ原油培养液接种０．８～１．５ｍｌ芽孢杆菌菌液的比例配制降解液，将降解液在３０～３７℃温度，１５０～２００ｒ／ｍｉｎ的摇动条件下，降解１０～３０天，芽孢杆菌菌液的浓度为１０↑［７］～１０↑［９］个／ｍｌ，原油培养液的质量浓度为０．５～５％；本发明专利技术是利用单一种类的芽孢杆菌，省去了目前要由两种及以上菌种配制降解菌液的麻烦，操作更加方便，本发明专利技术也不需要另外配制营养液，也不用附加表面活性剂，降解成本可以更低，本发明专利技术对原油降解的效果较好，２０天左右基本可以将原油完全降解。因此本发明专利技术是一种操作方便，成本较低，降解效率较好的用芽孢杆菌降解原油的方法。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及原油降解，具体涉及。
技术介绍
随着国际经贸的发展，原油的需求和运输量越来越大，同时原油的泄漏和污染事件 也越来越多，原油污染给环境和生态造成具大的伤害，清除原油污染要花费较大的成本 和较长的时间，尤其是海洋中清除原油污染困难重重。各国科学家积极研究用各种方法 (化学法、生物法)等清除原油污染，化学法会造成二次污染，目前受普遍关注和经济 的方法为用微生物降解原油，如中国专利申请号200710060178.5，名称为一种利用 微生物对易凝高粘原油降解后进行管道输送的方法，就公开了用假单胞菌、芽孢 杆菌和棒杆菌按比例配成的原油降解菌液，由原油降解菌液、营养液和重质原油 混合，在35 75'C温度条件下，3 600rpm搅拌速度下，搅拌降解70 220小时 来降低重质原油的粘度。中国专利申请号200810026548.8，名称为一种修复水体 石油污染的方法，就公开了用节杆菌、邻单胞菌、假单胞菌、芽孢杆菌和黄单胞 菌的其中两种按比例配的2ml原油降解菌液和0~2ml表面活性剂一起来降解质 量浓度为lg/L的原油。
技术实现思路
本专利技术所要解决的技术问题是提供一种操作方便，成本较低，降解效率较好的用芽 孢杆菌降解原油的方法。本专利技术解决上述技术问题所采用的技术方案为 一种用芽孢杆菌降解原油的方 法，按80 150ml原油培养液接种0.8 1.5ml芽孢杆菌菌液的比例配制降解液， 将降解液在30 37'C温度，150 200r/min的摇动条件下，降解10 30天，所述 芽孢杆菌菌液的浓度为107 109个/ 11，所述原油培养液的质量浓度为0.5 5%。按100ml原油培养液接种lml芽孢杆菌菌液的比例配制降解液，这一比例芽 孢杆菌对原油的降解20天左右就可以完成。降解时间为20天， 一般经过20天原油基本达到了降解。所述芽孢杆菌菌液的浓度为107 108个/1111。所述芽孢杆菌菌液为地衣芽孢杆菌(wle-5) 液，wle-5对原油有较好的降 解效果。所述芽孢杆菌菌液为枯草芽孢杆菌(wle-8)菌液，wle-8对原油的降解效果 也较好。也可以用短小芽孢杆菌、蜡状芽孢杆菌等菌液，若用辐照等条件处理后的芽 孢杆菌对原油有更好的降解效果。与现有技术相比，本专利技术的优点在于，按80 150ml原油培养液接种0.8 1.5ml芽孢杆菌菌液的比例配制降解液，将降解液在 30 37'C温度，150 200r/min的摇动条件下，降解10 30天，芽孢杆菌菌液的浓 度为107 109个/1111，原油培养液的质量浓度为0.5 5%;本专利技术是利用单一种类的 芽孢杆菌，省去了目前要由两种及以上菌种配制降解菌液的麻烦，操作更加方便， 本专利技术也不需要另外配制营养液，也不用附加表面活性剂，降解成本可以更低，本专利技术 对原油降解的效果较好，20天左右基本可以将原油完全降解。因此本专利技术是一种操作方 便，成本较低，降解效率较好的用芽孢杆菌降解原油的方法。附图说明图1为空白对照例、有菌对照例、实施例1、实施例2和实施例3的近红外光谱图 对照图；其中a为空白对照例、b为有菌对照例、c实施例l、 d实施例2、 e实施例3;图2为空白对照例和实施例1的中红外光谱图对照图；其中a为空白对照例、b 为实施例l。具体实施例方式以下结合附图实施例对本专利技术作进一步详细描述。 空白对照例将质量浓度(是指原油质量含量)为2%左右的100ml原油培养液在30 37°C 温度，180r/min的摇动条件下，降解10天，用红外光谱仪检测降解10天的降解 液，得到近红外光谱图如图1中所示的a，中红外光谱图如图2中所示的a。有菌对照例将浓度为107 108个/1111的lml地衣芽孢杆菌菌液接种到质量浓度为2M左右 的100ml原油培养液中配成降解液，将降解液在30 37'C温度，180r/min的摇动 条件下，降解5天，用红外光谱仪检测有菌降解5天的降解液，得到近红外光谱 图如图1中所示的b。实施例1将浓度为107 108个/1111的lml地衣芽孢杆菌菌液接种到质量浓度为2%左右 的100ml原油培养液中配成降解液，将降解液在30 37'C温度，180r/min的摇动 条件下，降解10天，用红外光谱仪检测降解IO天的降解液，得到近红外光谱图 如图l中所示的c，中红外光谱图如图2中所示的b。4实施例2将浓度为107 108个/1111的lml地衣芽孢杆菌菌液接种到质量浓度为2。/。左右 的100ml原油培养液中配成降解液，将降解液在30 37'C温度，180r/min的摇动 条件下，降解15天，用红外光谱仪检测降解15天的降解液，得到近红外光谱图 如图l中所示的d。实施例3将浓度为107 108个/1111的lml地衣芽孢杆菌菌液接种到质量浓度为2%左右 的lOOml原油培养液中配成降解液，将降解液在30 37'C温度，180r/min的摇动 条件下，降解20天，用红外光谱仪检测降解20天的降解液，得到近红外光谱图 如图l中所示的e。实施例4将浓度为107 108个/1111的lml枯草芽孢杆菌菌液接种到质量浓度为1%左右 的100ml原油培养液中配成降解液，将降解液在30 37'C温度，180r/min的摇动 条件下，降解15天。实施例5将浓度为l(^ 10S个/ml的lml枯草芽孢杆菌菌液接种到质量浓度为3%左右 的100ml原油培养液中配成降解液，将降解液在30 37'C温度，180r/min的摇动 条件下，降解20天。实施例6将浓度为10S l(^个/ml的lml枯草芽孢杆菌菌液接种到质量浓度为5%左右 的100ml原油培养液中配成降解液，将降解液在30 37'C温度，180r/min的摇动 条件下，降解30天。近红外的4000 cnf1 4500 cm"谱区为原油指纹区；原油在中红外区有许多 谱带归属，中红外原油特征谱峰主要有3簇，第一簇峰(2700cm" 3000cm") 谱带归属为芳烃化合物环的C-H键；第二簇峰U300cm" 1700cnT1)是原油的 C-O所在；第三簇峰(600cm-1 ~700cm-1)的谱带为链烯烃和碳数^7的值链烷 烃亚甲基。从图1可以看出空白对照例的特征吸收峰明显，有菌对照例的特征吸收峰虽有 縮小，但吸收峰较大，实施例1和实施例2的特征吸收峰较小，尤其小峰已消失， 说明原油链状垸烃中直链和支链烷烃C-H键断裂，原油被降解；实施例3几乎检 测不到任何原油特征吸收峰信号；说明降解时间至少以10天以上为好，以后就 让其自然条件下降解，降解15天消除了大部分原油的污染，降解20天基本消除 了原油的污染。从图2可以看出实施例1与空白对照例的中红外光谱有显著的不同第三簇峰基本都消失，说明原油的烯烃末端甲基和亚甲基被氧化；第二簇峰信号减弱， 但未完全消失，说明原油的C-O键依旧存在；第一簇峰的肩峰(2960cnT1)消失， 主峰不明显(2920cnT1)。上述实施例中wle-5和wle-8的接种量与原油培养液比可以为0.8ml: 80ml 或0.8ml: 150ml或1.5ml: 80ml或1.5ml: 150ml等。原油培养液的质量浓度可 以为4%或0.5%等。上述实施例中地衣芽孢杆菌菌液的浓度也可以为108 109个本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种用芽孢杆菌降解原油的方法，其特征在于按８０～１５０ｍｌ原油培养液接种０．８～１．５ｍｌ芽孢杆菌菌液的比例配制降解液，将降解液在３０～３７℃温度，１５０～２００ｒ／ｍｉｎ的摇动条件下，降解１０～３０天，所述芽孢杆菌菌液的浓度为１０７～１０９个／ｍｌ，所述原油培养液的质量浓度为０．５～５％。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：苏秀榕，李妍妍，李晔，
申请(专利权)人：宁波大学，
类型：发明
国别省市：97[中国|宁波]