新型无核细胞作为来源用于治疗富血小板血浆依赖性病症制造技术

本文描述了用血小板样细胞或其变体(PLC)或其衍生物或其裂解物或从其产生的富血小板血浆(PRP)治疗、修复或改善与干眼症、骨关节炎、肌腱、韧带、骨修复、伤口愈合或伤口愈合相关的病症、脱发或皮肤更新或再生相关的疾病、病症或损伤的方法。此外，本文还描述了从PLC或其衍生物或其裂解物生成富血小板血浆(PRP)的方法。方法。方法。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】新型无核细胞作为来源用于治疗富血小板血浆依赖性病症
[0001]相关申请
[0002]本申请要求2020年5月14日提交的美国临时专利申请序列号63/024,587；2020年10月27日提交的美国临时专利申请序列号63/106,009；和2021年2月1日提交的美国临时专利申请序列号63/144,033的优先权，其全部内容通过引用全文纳入本文。

技术介绍

[0003]富血小板血浆(PRP)被认为在伤口愈合的医学治疗或加速受损组织(如软骨、肌腱、韧带和骨骼)的修复，或在治疗干眼症和其他疾病中发挥作用。然而，由于来自血小板供者的报告数据的样品量有限，缺乏关于PRP在临床程序中的有益作用的关键数据。此外，每个血小板供者是不同的，因此，为医疗程序生产的PRP的质量不一致。目前正在使用的PRP还存在其他几个缺点，例如批次间的可变性，因为每个患者都提供自己的血小板作为其PRP的来源。其他缺点包括供体血小板寿命短、杂质或污染、缺乏可用性或供应短缺。由于PRP产品缺乏标准化，PRP的临床有效性仍有争论。因此，本领域迫切需要能够开发出一种安全、标准化、明确的现成产品并由监管机构批准用于人，代替不得不为每个患者单独制作不可靠的PRP制品，引发对其潜在功效和用途的怀疑。
[0004]骨关节炎(OA)是一种迫切需要治疗且严重未满足需求的疾病。在当前的OA治疗中，患者被给予NSAID和度洛西汀。如果症状没有改善，开始口服度洛西汀。如果三个月后症状改善，则继续进行非药物管理和口服度洛西汀治疗，并监测症状进展，这可能是一个长期的治疗过程。如果三个月后症状持续或进展，则不得不向需要短期镇痛的患者注射关节内糖皮质激素。如果症状持续进展，患者将被视为需要手术，并转介给骨科矫形医生。因此，需要用于治疗OA和其他医疗需求未得到满足的疾病(例如，伤口愈合、干眼病、脱发或受损或老化皮肤等)的新型的、不那么激进的更好的治疗选择，并在本申请中进行了描述。

技术实现思路

[0005]本公开的方法和组合物有利地利用新型无核血小板或血小板样细胞或血小板变体(统称为“多个PLC”(或其单数形式：“PLC”)或其衍生物或其裂解物或其衍生的富血小板血浆，来满足治疗、修复或改善与骨关节炎、肌腱、韧带、骨修复、伤口愈合或伤口愈合相关病症、干眼症、脱发或皮肤更新或再生相关的疾病、病症或损伤的需求，其无法通过常规手段(例如通过使用供体血小板)实现充分或一致的治疗。
[0006]有利地，PLC或其衍生物或从其衍生的PRP在质量和组成上是一致的，并且与从人供体获得的血小板相比，可以以相对较低的成本制备。更重要的是，它消除了从供者的血液中提取PRP的需要，从而消除了穿刺患者抽取血液的需要。此外，PLC很容易制备，PLC从生物反应器或流体装置中出来，并且它们可以以比其他治疗选择更不激进的方式给予(例如，不涉及手术或复杂的医疗程序)。通过本公开的方法生产的PLC或其衍生物或其裂解物可以容易地放大，可以连续供应(不受批次间变化的妨碍)，相对不含污染物，可以用作供者来源的PRP的补充物，可以在损伤部位或其附近局部给给予，来治疗、修复或减轻组织损伤或组织
损伤相关疾病，例如但不限于骨相关疾病(例如，骨关节炎)或干眼病，或治疗或缓解与之相关的再生疾病或病症，或作为美容品治疗或缓解皮肤老化或脱发。
[0007]因此，在一些实施方式中，提供了组合物，该组合物包含PLC或其衍生物或其裂解物或其衍生的PRP，或制造PLC或其衍生物或其衍生PRP的前体细胞，其可直接或在组织损伤部位附近给予，以加速受损组织的愈合，例如但不限于，肌腱、韧带、肌肉、关节或其他肌肉骨骼损伤。在一些实施方式中，将包含PLC或其衍生物或其衍生的PRP或制造PLC或其衍生物或其衍生PRP的前体细胞的组合物局域地(locally)或局部地(topically)给予损伤部位附近(例如，用于骨关节炎治疗时，在膝盖)或老化皮肤下或其附近用于皮肤或毛发再生或更新。在一些实施方式中，PLC或其衍生物或制备PLC或其衍生物或从其衍生的PRP的前体细胞是裂解物形式，即，浓缩PLC或其衍生物或制备PLC或其衍生物或从其衍生的PRP的前体细胞，并从浓缩物制备裂解物。在一些实施方式中，如本文所公开的，将PLC或裂解物浓缩并在运载体、稀释剂或缓冲液或来源于供者的PRP中使用之前稀释。在一些实施方式中，接受这种治疗的患者(即，对象)是接受化疗或其他基于癌症的治疗的癌症患者，其导致组织受伤或受损或脱发，但本专利技术的治疗本身不针对癌症。在一些实施方式中，治疗是在无癌症的患者中。
[0008]在一些实施方式中，用生长因子或刺激生长因子从PLC或其衍生物释放的试剂富集PLC或其衍生物或其裂解物，或以最适合对象的组合与来自对象富血小板血浆混合。
[0009]PLC或其衍生物由一种或多种工具和技术产生，例如生物反应器或流体装置。生物反应器或流体装置可包括但不限于剪切应力、机械应力和脉冲电磁场生物反应器、大型搅拌釜生物反应器，自动化生物反应器和旋转壁生物反应器(RWB)，以及用波浪式生物反应器所见的摇动运动，器官芯片(organ
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on
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chip)生物反应器。还考虑了能够连续灌注操作的其他生物反应器构造，例如填充床生物反应器(PBB)、流化床生物反应器(FBB)或PBB或FBB，包括使用微运载体，CultiBag生物反应器和膜生物反应器，例如中空纤维生物反应器(HFB)，以产生本公开的PLC/EV或其衍生物。生物反应器的操作可能需要与再循环管线上的内部或外部细胞保持装置偶联，通过离心、沉淀、超声分离或使用旋转过滤器的微滤、交替切向流(ATF)过滤或切向流过滤(TFF)或体内生物反应器，其为身体内的囊袋，在有需要的部位向其中植入生物材料(例如，PLC或其衍生物或其衍生自的祖细胞)，孵育较长的时间。在这些囊袋内(例如，骨组织或肌肉瓣等)，移植物利用身体的再生能力从疾病或损伤中恢复。生物反应器的非限制性实例描述于，例如，在共同提交的题为“三种组分同时紧密结合以形成生物反应器或过滤器结构”的申请(美国申请号62/981,373)或其他地方描述，例如在美国专利9,795,965；10,343,163；9,763,984；9,993,503和10,426,799；美国公开号20180334652；US公开号20180334652；PCT申请PCT/US2018/021354；PCT/US2019/012437,PCT/US19/040021和美国申请号16/730,603中公开的工具和技术(例如生物反应器或者流体装置)，其全部内容通过引用并入本文。可以常规产生PLC或衍生物的已知或未知的生物反应器或微流体装置也考虑可用于本专利技术。
[0010]在一些实施方式中，PLC或其衍生物或其衍生的裂解物或从其衍生的PRP或制备PLC或其衍生物或从其衍生的PRP的前体细胞的来源是自体的，即，它们是利用，例如，需要基于PLC的治疗的个体的CD34+祖细胞生产的，其中通过生物反应器培养该祖细胞以产生PLC或其衍生物，所述PLC或其衍生物可作为本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】1.一种治疗、修复或改善有需要的对象状况的方法，所述对象需要的处理包括给予对象有效量的包含血小板样细胞(PLC)或其衍生物的治疗组合物，其中所述状况是疾病、受损组织、脱发、伤口愈合、伤口愈合相关病症、或受损或老化皮肤中的一种或多种。2.如权利要求1所述的方法，其中所述组合物进一步包括伤口愈合剂、组织再生剂、抗凋亡剂、抗炎剂、抗激素剂或免疫调节剂或其组合。3.如权利要求1所述的方法，其中所述组合物进一步包括来自对象的富血小板血浆(PRP)。4.如权利要求1
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3中任一项所述的方法，其中所述组合物在运载体中稀释到生理浓度，其中所述运载体包括稀释剂或赋形剂。5.如权利要求4所述的方法，其中所述运载体是血浆或血浆代用品或plasmalyte。6.如权利要求1
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3中任一项所述的方法，其中给予所述组合物用于治疗骨关节炎、受损组织、肌腱损伤、韧带损伤、骨修复、伤口愈合或伤口愈合相关病症、干眼病、脱发或老化或受损的皮肤中的一种或多种。7.如权利要求6所述的方法，其中所述受损组织包括肌肉骨骼系统的损伤。8.如权利要求6所述的方法，其中老化或受损的皮肤是在对象的面部、头皮、颈部、胸部、手、手臂、腿、腹部或臀部或其组合。9.如权利要求6所述的方法，其中干眼病是由干燥综合症或非干燥综合症引起的。10.如权利要求1
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3中任一项所述的方法，其中所述PLC或其衍生物不含红细胞或血红蛋白内容物或白细胞。11.如权利要求1
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3中任一项所述的方法，其中所述组合物还包括胞外囊泡(EV)。12.如权利要求1
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3中任一项所述的方法，其中所述组合物被配制为应用于治疗损伤部位。13.如权利要求2所述的方法，其中所述组合物还包含另一种治疗剂。14.如权利要求12所述的方法，其中所述配制在缓冲剂、稀释剂或赋形剂或其组合中进行。15.如权利要求1
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3中任一项所述的方法，其中所述组合物是冻干的。16.如权利要求1
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3中任一项所述的方法，其中所述组合物被植入可植入装置上。17.如权利要求1
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3中任一项所述的方法，其中所述组合物被冷冻保存。18.如权利要求1
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3中任一项所述的方法，其中所述组合物在损伤或疾病的范围或附近进行局部给予。19.一种用于生产包含PRP的PLC的方法，所述方法包括：在生物反应器中离体培养祖细胞群一段时间，使所述祖细胞分化为成熟的巨核细胞；在所述生物反应器中通过压力梯度分离PLC或其衍生物群与所述巨核细胞；浓缩所述PLC或其衍生物；任选地，裂解所述PLC或其衍生物；以及，与来自供者的富血小板血浆混合。20.如权利要求19所述的方法，其中所述祖细胞选自下组的一个或多个：人诱导多能干细胞(iPSC)、造血干细胞、CD34+脐带血干细胞(UCB细胞)、CD34+动员外周血细胞(MPB细胞)或CD34+骨髓细胞。
21.一种治疗有需要的对象的方法，包括给予所述对象有效量的权利要求19所述的PLC或其衍生物或从其衍生的PRP。22.如权利要求21所述的方法，其进一步包括另一种治疗剂。23.一种用分离的体外血小板样细胞(PLC)无核群或其衍生物治疗患者的方法，其具有以下特征：i)来源于体细胞、祖细胞或干细胞的重编程，通过生物反应器传代的产物ii)不是癌细胞；iii)在体内不表现出不受控制的生长或肿瘤形成，其中将所述PLC或其衍生物以治疗量给予需要这种治疗的患者。24.如权利要求23所述的方法，其进一步包括给予所述患者胞外载剂(EV)或其衍生物，这种EV或其衍生物是在包含PLC或PLC
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衍生物的混合物中制成。25.如权利要求23
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24中任一项所述的方法，其中所述病症或损伤是骨关节炎、受损组织、肌腱损伤、韧带损伤、骨修复、伤口愈合或伤口愈合相关病症、干眼病、脱发或老化皮肤。26.一种治疗与损伤有关的疾病或病症的方法，所述损伤包括有需要的对象的关节损伤、损伤的肌腱、关节炎、骨软骨病变...

【专利技术属性】
技术研发人员：D，
申请(专利权)人：血小板生源说股份有限公司，
类型：发明
国别省市：