一种人血小板凋亡微囊泡的应用制造技术

本发明专利技术公开了一种人血小板凋亡微囊泡在制备促进间充质干细胞成骨向分化的制剂中的应用，并提供一种骨缺损修复制剂，包括PLGA支架材料，PLGA支架材料表面搭载前述人血小板凋亡微囊泡。本发明专利技术提供的来源于人血小板的凋亡微囊泡可从患者自身血液提取，避免了伦理问题和免疫问题。本发明专利技术提供的由PLGA/pDA支架搭载人血小板凋亡微囊泡构建的骨缺损修复制剂，改善了PLGA疏水、成骨活性低的缺点，特别是通过先在PLGA支架表面负载一层pDA膜后再搭载人血小板凋亡微囊泡，使得人血小板凋亡微囊泡能够在体内缓慢释放，进一步提高了间充质干细胞体内成骨能力。内成骨能力。内成骨能力。

【技术实现步骤摘要】
一种人血小板凋亡微囊泡的应用


[0001]本专利技术涉及生物组织工程
，具体为一种人血小板凋亡微囊泡的应用。

技术介绍

[0002]细胞凋亡是一个高度调控的细胞死亡过程，牺牲特定的细胞以获得更大的有机体利益。这是多细胞生物的正常生理过程。细胞凋亡以一种协调的方式赋予多细胞生物以优势，使其维持稳态并微调生命周期。细胞凋亡导致的死亡经历了几个阶段，首先是核染色质的凝结，接着是膜泡破裂，进而细胞内容物解体成不同的膜包裹的囊泡，称为凋亡小体或凋亡微囊泡(apoptotic vesicles，apoVs)。凋亡微囊泡不同于外泌体（又叫做外泌体微囊泡或外排体）、微囊泡（又叫做微泡）和逆转录病毒样颗粒 (Retrovirus
‑
Like Particles, RLPs)，外泌体、微囊泡和RLPs是在正常细胞过程中分泌的，而凋亡微囊泡仅在程序性细胞死亡过程中形成。细胞凋亡过程中，内容物聚合形成凋亡微囊泡并最终被吞噬细胞吞噬，这一过程被称为胞葬作用。传统观点认为胞葬作用是凋亡的终点，因此它在生物化学上结束了凋亡细胞的生命，而越来越多的证据本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.人血小板凋亡微囊泡在制备促进间充质干细胞成骨向分化的制剂中的应用。2.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述人血小板凋亡微囊泡的制备方法包括以下步骤：1）体外分离并提纯人血小板；2）以培养液重悬，加入星形孢菌素诱导血小板凋亡；3）收集上清液，通过梯度离心法分离得到凋亡微囊泡。3.根据权利要求2所述的应用，其特征在于，包括如下a
‑
c中的一项或多项：a. 所述用于重悬的培养液为含有10%FBS和1%青
‑
链霉素双抗的MEMα培养基；b. 所述的梯度离心法包括以下步骤：1）将所述上清液于4℃，以800g离心10min，取上清液，获得第一离心上清液；2）将所述第一离心上清液于4℃、以16000离心30min，取沉淀物，获得第二离心上清液；即得粗制凋亡微囊泡；3）将所述粗制凋亡微囊泡以无菌PBS洗涤，然后于4℃、以16000g离心30min，获得血小板凋亡微囊泡纯品；c. 所述凋亡微囊泡呈双面凹的圆盘状，粒径为90
‑
300nm。4.根据权利要求1
‑
3任一项所述的应用，其特征在于，所述的制剂为用于骨缺损修复的制剂。5.一种骨缺损修复制剂，包括PLGA 支架材料,其特征在于,所述PLGA 支架材料表面搭载权利要求1
‑
4任一项中所述人血小板凋亡微囊泡。6.根据权利要求5所述的骨缺损修复制剂，其特征在于，所述的骨缺损修复制剂的构建过程包括以下步骤：（1）将PLGA支架浸泡在多巴胺溶液中形成pDA膜；（2）去除未附着的多余的多巴胺分子，得到PLG...

【专利技术属性】
技术研发人员：周永胜，张晓，江雨荷，邵玉子，杨坤坤，
申请(专利权)人：北京大学口腔医学院，
类型：发明
国别省市：