一种同时检测福多司坦氧化杂质和异构体杂质的方法及其应用技术

本发明专利技术公开了一种同时检测福多司坦氧化杂质和异构体杂质的方法及其应用，该检测方法创造性地将用于分离异构体杂质的柱前衍生化反应用于分离氧化杂质，并结合特定的高效液相色谱梯度洗脱方式和洗脱条件，实现了在传统C18柱上，同时、有效分离检测氧化杂质YF1、氧化杂质YF2、氧化杂质F和异构体杂质Isomer的技术效果；而且，该检测方法灵敏度高，各杂质校正因子在0.2～5之间，受辅料和有机溶剂影响小，广泛适用于福多司坦原料药、固体制剂、半固体制剂或液体制剂中杂质的检测，从而提高对于福多司坦原料药及其制剂的全面质量控制。司坦原料药及其制剂的全面质量控制。

【技术实现步骤摘要】
一种同时检测福多司坦氧化杂质和异构体杂质的方法及其应用


[0001]本专利技术属于福多司坦分析方法
，具体涉及一种同时检测福多司坦氧化杂质和异构体杂质的方法及其应用。

技术介绍

[0002]福多司坦[Fudosteine，(2R)
‑2‑
氨基
‑3‑
(3
‑
羟丙基硫代)丙酸]为半胱氨酸衍生物，是一种新型的祛痰药，其作用是对环状细胞增生产生抑制作用及对呼吸道的粘液、粘膜正常状态起调节作用，适用于慢性呼吸疾病(支气管哮喘、慢性支气管炎、支气管扩张、肺结核、尘肺病、慢性阻塞性肺气肿、非典型分枝杆菌病、肺炎、弥漫性细支气管炎等)的治疗。福多司坦由日本三菱药品株式会社开发，剂型包括片剂、口服溶液剂，分别于2001年12月、2004年2月在日本上市。
[0003]目前，国内制备福多司坦原料药的工艺主要有2种，一种是盐酸半胱氨酸与烯丙醇反应制得，另一种是盐酸半胱氨酸与3
‑
卤代
‑1‑
丙醇反应制得。国内上市的福多司坦剂型有片剂、胶囊剂、颗粒剂和口服溶液剂。在福多司坦原料药和制剂中存在多种杂质，包括氧化杂质YF(亚砜类杂质，包括异构体YF1和YF2)、氧化杂质F(砜类杂质)和异构体杂质Isomer，杂质产生途径如下所示。这些杂质的存在可能会对药品的安全性和有效性产生影响，应严格控制以确保产品的安全有效。
[0004][0005]现有技术对于福多司坦杂质检测方法的研究，多集中于对映异构体杂质。国内对于福多司坦及其制剂的现行国家药监局标准(YBH02592008、YBH02782008、YBH02752008)，均仅控制了未知杂质及福多司坦右旋异构体。文献(王莹,杭太俊.手性衍生化
‑
反相HPLC法测定福多司坦光学纯度[J].药学进展,2005,29(9)：421
‑
425)通过柱前衍生化法分离异构体杂质。专利CN112881538A和专利CN101161642A分别通过手性固定相法和手性流动相法分离异构体杂质。
[0006]但是，现有技术对于福多司坦氧化杂质(尤其是砜类杂质)的检测方法少有研究。文献(郭志渊,赵欣庆,朱恒怡,袁军.HPLC法测定福多司坦原料药及其制剂中有关物质的含量.中国药房,2019,30(13):1764
‑
1769.)公开了以传统C18柱为色谱柱，以低pH己烷磺酸钠
溶液为流动相，在紫外波长210nm条件下检测亚砜类杂质C(即杂质YF)的方法，该方法存在吸收弱、灵敏度低、基线不稳等缺点，且无法对砜类杂质(即杂质F)进行分离检测。
[0007]更进一步地，对于同时检测福多司坦氧化杂质和异构体杂质的方法的研究更为稀少。然而，同时检测氧化杂质和异构体杂质对于全面评价福多司坦原料药及其制剂的质量又至关重要。专利CN112881538A采用手性固定相法同时分离检测杂质A(即杂质YF)、杂质B(即杂质F)和右旋异构体(即杂质Isomer)，以克服现有技术C18柱或氨基柱中，氧化杂质保留较弱且无法有效分离的问题。但是，以涂敷手性冠醚的硅胶为填充剂的手性固定相，易被除甲醇外的有机溶剂以及钾离子破坏，致使其适用范围受限，尤其不适用于检测含有机溶剂和多种可溶性辅料的口服溶液剂。
[0008]因此，在采用传统C18柱为色谱柱的特定条件下，选用何种适宜的方法，使得福多司坦的氧化杂质和异构体杂质可同时被分离、检测出来，是本领域技术人员尚未解决的技术难题。

技术实现思路

[0009]本专利技术要解决的技术问题在于：在采用传统C18柱为色谱柱的特定条件下，通过柱前衍生化反应结合特定的高效液相色谱条件(洗脱方式、洗脱条件等)，实现福多司坦氧化杂质YF1、氧化杂质YF2、氧化杂质F和异构体杂质Isomer的同时、有效分离检测，从而提高对于福多司坦原料药及其制剂的质量控制。
[0010]针对前述要解决的技术问题，本专利技术通过以下技术方案解决：
[0011]一种同时检测福多司坦氧化杂质和异构体杂质的方法，采用柱前衍生化反应结合高效液相色谱法，同时分离检测氧化杂质YF、氧化杂质F和异构体杂质Isomer。
[0012]优选的，本专利技术提供的一种同时检测福多司坦氧化杂质和异构体杂质的方法，包括如下步骤：
[0013]步骤一：样品处理
[0014]将福多司坦加水稀释，配置成供试品溶液、对照品溶液；
[0015]步骤二：柱前衍生化反应
[0016]将邻苯二甲醛与N
‑
乙酰半胱氨酸溶于硼酸溶液，配制得到衍生化试剂；量取步骤一所得的各样品溶液，均匀混合，衍生化反应完全；
[0017]步骤三：高效液相色谱法检测
[0018]取衍生化后的各样品溶液，进样于色谱仪进行检测，检测条件的设置包括：
[0019]色谱柱：十八烷基硅烷键合硅胶柱；
[0020]流动相：由流动相A和流动相B组成，其中流动相A为0.03～0.07mol/L乙酸铵，流动相B为乙腈；梯度洗脱，流动相A和B的比例如下：
[0021][0022]或，流动相A和B的比例如下：
[0023][0024]检测波长：340nm；
[0025]柱温为20～30℃；
[0026]流速为1.3～1.7mL/min。
[0027]优选的，步骤一中，样品溶液中福多司坦的浓度为8μg/mL～4mg/mL。
[0028]优选的，步骤二中，邻苯二甲醛与N
‑
乙酰半胱氨酸的用量比为1:1。
[0029]优选的，步骤二中，硼酸溶液的pH为10.2
±
0.1。
[0030]更优选的，步骤二中，衍生化试剂为6mmol/L邻苯二甲醛与6mmol/L N
‑
乙酰半胱氨酸溶于0.04mol/L硼酸溶液。
[0031]更优选的，步骤二配制的衍生化试剂与步骤一所得的样品溶液均匀混合时的体积比为5:1。
[0032]更优选的，步骤二配制的衍生化试剂与步骤一所得的样品溶液均匀混合，进行衍生化反应，静置10～20min，直至反应完全。
[0033]优选的，步骤三中，检测条件的设置还包括：进样体积为25～50μL。
[0034]优选的，步骤三中，检测条件的设置还包括：色谱柱选用型号为WatersHSS T3(4.6
×
250mm，5μm)的色谱柱，或型号为Agilent ZORBAX SB
‑
Aq(4.6
×
150mm，5μm)的色谱柱，或其它效能相当的色谱柱。
[0035]优选的，步骤三中，检测条件的设置包括：流动相A为0.05mol/L乙酸铵，柱温为25
℃，流速为1.5mL/min。
[0036]前述的同时检测福多司坦氧化杂质和异构体杂质的方法中，氧化杂质YF、氧化杂质F和异构体杂质Isomer的结构分别为：
[0037][0038]本专利技术进一步本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种同时检测福多司坦氧化杂质和异构体杂质的方法，其特征在于，采用柱前衍生化反应结合高效液相色谱法，同时分离检测氧化杂质YF、氧化杂质F和异构体杂质Isomer。2.如权利要求1所述的同时检测福多司坦氧化杂质和异构体杂质的方法，其特征在于，包括如下步骤：步骤一：样品处理将福多司坦加水稀释，配置成供试品溶液、对照品溶液；步骤二：柱前衍生化反应将邻苯二甲醛与N
‑
乙酰半胱氨酸溶于硼酸溶液，配制得到衍生化试剂；量取步骤一所得的各样品溶液，均匀混合，衍生化反应完全；步骤三：高效液相色谱法检测取衍生化后的各样品溶液，进样于色谱仪进行检测，检测条件的设置包括：色谱柱：十八烷基硅烷键合硅胶柱；流动相：由流动相A和流动相B组成，其中流动相A为0.03～0.07mol/L乙酸铵，流动相B为乙腈；梯度洗脱，流动相A和B的比例如下：或，流动相A和B的比例如下：检测波长：340nm；柱温为20～30℃；流速为1.3～1.7mL/min。
3.如权利要求2所述的同时检测福多司坦氧化杂质和异构体杂质的方法，其特征在于，所述步骤一中，样品溶液中福多司坦的浓度为8μg/mL～4mg/mL。4.如权利要求2所述的同时检测福多司坦氧化杂质和异构体杂质的方法，其特征在于，所述步骤二中，邻苯二甲醛与N
‑
乙酰半胱氨酸的用量比为1:1，或者步骤二中，硼酸溶液的pH为10.2
±
0.1。5.如权利要求4所述的同时检测福多司坦氧化杂质和异构体杂质的方法，其特征在于，所述步骤二中，衍生化试剂为6mmol/L邻苯二甲醛与6mmol/L N
‑
乙酰半胱氨酸溶于0.04mol/L硼酸溶液；优选的，步骤二配制的衍生化试剂与步骤一所得的样品溶液均匀混合时的体积比为5:1；更优选的，混合后静置10～20min，直至衍生化反应完全。6.如权利要求2所述的同时检测福多司坦氧化杂质和异构体杂质的方法，其特征在于，所述步骤三中，检测条件的设置还包括：进样体积为25～50μL。7.如权利要求2所述的同时检测福多司坦氧化杂质和异构体杂质的方法，其特征在于，所述步骤三中，检测条件的设置还包括：色...

【专利技术属性】
技术研发人员：叶慧，柴秋烨，徐梦露，陈瑞哲，王羽嫣，宋霄霄，李乐薇，胡育钰，沈锡明，李玉杰，
申请(专利权)人：杭州百诚医药科技股份有限公司，
类型：发明
国别省市：