嵌合抗原受体及其用途制造技术

本发明专利技术公开了一种嵌合抗原受体，涉及生物医药技术领域。所述嵌合抗原受体包含BCMA结合结构域和非抗原结合结构域，其中所述非抗原结合结构域包括CD28的胞外域、跨膜域和胞内共刺激结构域或其功能性变体，以及CD3ζ的信号传导结构域或其功能性变体；所述增强子选自IL

【技术实现步骤摘要】
嵌合抗原受体及其用途


[0001]本专利技术涉及生物医药
，具体涉及一种嵌合抗原受体及其用途。

技术介绍

[0002]免疫治疗的两种主要手段是免疫检查点抑制剂，如抗PD1/PDL1抗体、抗CTLA4抗体等，和嵌合抗原受体T细胞(CAR
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T)。CAR
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T治疗流程是从人外周血分离出T细胞，在体外进行CAR基因修饰，扩增培养到一定数量后，回输患者。其中，CAR基因的设计研发是CAR
‑
T的核心技术。将设计好的CAR基因转入T细胞的基因组中，T细胞就可以表达相应的CAR分子。CAR分子将使T细胞无需MHC限制性，通过单链可变区片段scFv直接识别肿瘤细胞，同时获得第一刺激信号和共刺激信号，被“一键激活”。CAR
‑
T可在体内增殖，为“活的药物”，形成持续的杀伤力，CAR
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T还可以体内释放细胞因子召集活化更多的免疫细胞协同杀死肿瘤细胞。
[0003]虽然现有CAR
‑
T药物技术成熟，疗效显著，但是仍存在较多问题，如患者需等待制备时间(非现货)，期间可能肿瘤出现进展致使治疗风险增加或失去治疗机会；也可能制备失败致使无药可用；还存在安全性问题、售价高问题等。如要解决目前自体CAR
‑
T细胞药物的主要不足(非现货、价格高)，是研制通用现货型的细胞药物，如通用型CAR
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T、通用型CAR
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NK等，使用同种异体的T细胞、或NK细胞，或由iPS细胞诱导分化得到T细胞或NK细胞，制备成现货的CAR
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T、CAR
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NK，可以一批次制备几十份细胞药物，相比自体CART细胞药物一批次制备一份药物，通用型CAR
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T、或CAR
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NK降低了成本，使售价可以降低。
[0004]CAR
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NK技术是伴随自体CAR
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T技术同时出现的免疫细胞治疗策略，最初，为了实现现货细胞药物的目的，CAR修饰的NK细胞主要使用NK细胞系NK
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92(能够无限扩增)，但因为NK
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92的成瘤风险，在使用前需进行辐照，该CAR
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NK
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92无法体内实现扩增，报道的临床疗效不理想。NK细胞使用的CAR结构，需要特殊的设计。目前仍需要新的CAR
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NK疗法来满足患者的需求。

技术实现思路

[0005]本专利技术的目的是提供一种嵌合抗原受体，该靶向BCMA的CAR
‑
NK杀伤肿瘤细胞的效果较好。
[0006]为了实现上述的专利技术目的，本专利技术的技术方案如下：
[0007]一方面，本专利技术提供了一种融合多肽，其包含本专利技术所述的嵌合抗原受体(CAR)和能够增强免疫效应细胞的一种或多种活性的增强子，所述嵌合抗原受体包含BCMA结合结构域和非抗原结合结构域，其中所述非抗原结合结构域包括CD28的胞外域、跨膜域和胞内共刺激结构域或其功能性变体，以及CD3ζ的信号传导结构域或其功能性变体；所述增强子选自IL
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2，IL
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3，IL
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4，IL
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6，IL
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7，IL
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8，IL
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10，IL
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11，IL
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12，IL
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15，IL
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17，IL
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18，IL
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21，IL
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23，其受体，其功能变体中的一种或多种。
[0008]在某些实施方式中，其中所述BCMA结合结构域包含重链互补决定区1(HCDR1)，重链互补决定区2(HCDR2)和重链互补决定区3(HCDR3)，所述HCDR1包含SEQ ID NO:2所示的氨
基酸序列，所述HCDR2包含SEQ ID NO:3所示的氨基酸序列，且所述HCDR3包含SEQ ID NO:4所示的氨基酸序列。
[0009]在某些实施方式中，所述HCDR1包含与SEQ ID NO:2所示的氨基酸序列具有至少约50％同一性的氨基酸序列，所述HCDR2包含与SEQ ID NO:3所示的氨基酸序列具有至少约50％同一性的氨基酸序列，且所述HCDR3包含与SEQ ID NO:4所示的氨基酸序列具有至少约50％同一性的氨基酸序列。
[0010]在某些实施方式中，其中所述BCMA结合结构域包括单域抗体。
[0011]在某些实施方式中，其中所述BCMA结合结构域包含SEQ ID NO:8所示的氨基酸序列；或与SEQ ID NO:8所示的氨基酸序列具有至少约50％同一性的氨基酸序列。
[0012]在某些实施方式中，其中所述CD28的胞外域、跨膜域和胞内共刺激结构域包含SEQ ID NO:9所示的氨基酸序列；
[0013]或与SEQ ID NO:9所示的氨基酸序列具有至少约50％同一性的氨基酸序列。
[0014]在某些实施方式中，其中所述CD3ζ的信号传导结构域包含SEQ ID NO:5所示的氨基酸序列；或与SEQ ID NO:5所示的氨基酸序列具有至少约50％同一性的氨基酸序列。
[0015]在某些实施方式中，其中所述非抗原结合结构域包含SEQ ID NO:10所示的氨基酸序列；或与SEQ ID NO:10所示的氨基酸序列具有至少约50％同一性的氨基酸序列。
[0016]在某些实施方式中，其中所述抗原结合结构域特异性地结合肿瘤抗原。
[0017]在某些实施方式中，其中所述肿瘤抗原与非实体瘤相关。
[0018]在某些实施方式中，其中所述非实体瘤选自以下组：淋巴细胞瘤、霍奇金淋巴瘤、慢性和急性淋巴细胞性白血病、慢性髓性白血病、急性髓样白血病和多发性骨髓瘤。
[0019]在某些实施方式中，其中所述肿瘤抗原与实体瘤相关。
[0020]在某些实施方式中，其中所述实体瘤选自以下组：肝癌、胃癌、小细胞肺癌、非小细胞肺癌、食道癌、胰腺癌、结直肠癌、乳腺癌、前列腺癌和卵巢癌。
[0021]在某些实施方式中，其中所述肿瘤抗原包括肿瘤抗原选自以下组：CD5、CD7、CD38、CS1、BAFFR、TACI、CD19、CD20、CD22、BCMA、GPRC5D、Mesothelin、DLL1、GPC3、EGFR、PSMA、PSCA、Claudin18.2、HER2和CD70。
[0022]在某些实施方式中，所述嵌合抗原受体还包含信号肽片段，所述信号肽片段的C端与所述BCMA结合结构域的N端连接；所述信号肽片段包含SEQ ID NO:1所示的氨基酸序列；或与SEQ ID NO:1所示的氨基酸序列具有至少约50％同一性的氨基酸序列。
[0023]在某些实施方式中，所述嵌合抗原受体包含SEQ ID NO:11所示的氨基酸序列或SE本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.融合多肽，其特征在于，包含嵌合抗原受体和能够增强免疫效应细胞的一种或多种活性的增强子，所述嵌合抗原受体包含BCMA结合结构域和非抗原结合结构域，所述非抗原结合结构域包括CD28的胞外域、跨膜域和胞内共刺激结构域或其功能性变体，以及CD3ζ的信号传导结构域或其功能性变体；所述增强子选自IL
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2，IL
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3，IL
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4，IL
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6，IL
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7，IL
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8，IL
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10，IL
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11，IL
‑
12，IL
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15，IL
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17，IL
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18，IL
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21，IL
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23，其受体，其功能变体中的一种或多种。2.根据权利要求1所述的融合多肽，其特征在于，所述BCMA结合结构域包含重链互补决定区1，重链互补决定区2和重链互补决定区3，所述重链互补决定区1包含SEQ ID NO:2所示的氨基酸序列，所述重链互补决定区2包含SEQ ID NO:3所示的氨基酸序列，所述重链互补决定区3包含SEQ ID NO:4所示的氨基酸序列。3.根据权利要求2所述的融合多肽，其特征在于，所述BCMA结合结构域包括单域抗体。4.根据权利要求3所述的融合多肽，其特征在于，所述BCMA结合结构域包含SEQ ID NO:8所示的氨基酸序列或其功能性变体。5.根据权利要求1所述的融合多肽，其特征在于，所述CD28的胞外域、跨膜域和胞内共刺激结构域包含SEQ ID NO:9所示的氨基酸序列。6.根据权利要求1所述的融合多肽，其特征在于，所述CD3ζ的信号传导结构域包含SEQ ID NO:5所示的氨基酸序列。7.根据权利要求1所述的融合多肽，其特征在于，所述非抗原结合结构域包含SEQ ID NO:10所示的氨基酸序列。8.根据权利要求1所述的融合多肽，其特征在于，所述嵌合抗原受体还包含信号肽片段，所述信号肽片段的C端与所述抗原结合结构域的N端连接；所述信号肽片段包含SEQ ID NO:1所示的氨基酸序列。9.根据权利要求8所述的融合多肽，其特征在于，所述嵌合抗原受体包含SEQ ID NO:11所示的氨基酸序列或SEQ ID NO:12所示的氨基酸序列。10.根据权利要求1所述的融合多肽，其特征在于，所述增强子包括IL
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15或其功能变体，或包含IL
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15受体的嵌合细胞因子受体。11.根据权利要求10所述的融合多肽，其特征在于，所述增强子包含SEQ IDNO:7所示的氨基酸序列。12.根据权利要求1所述的融合多肽，其特征在于，所述融合多肽包含SEQ ID NO:13所示的氨基酸序列。13.分离的核酸分子，其特征在于，编码权利要求1
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12中任一项所述的融合多肽。14.分离的一种或多种核酸分子，其特征在于，包含：编码嵌合抗原受体的核苷酸序列，所述嵌合抗原受体包含BCMA结合结构域和非抗原结合结构域，其中所述非抗原结合结构域包括CD28的胞外域、跨膜域和胞内共刺激结构域或其功能性变体，以及CD3ζ的信号传导结构域或其功能性变体；和编码能够增强免疫效应细胞的一种或多种活性的增强子的核...

【专利技术属性】
技术研发人员：张继帅，栗红建，苏红昌，宾珍兰，罗燕平，向斌，王玲，张兵祥，
申请(专利权)人：深圳普瑞金生物药业股份有限公司，
类型：发明
国别省市：