【技术实现步骤摘要】
本专利技术属于生物医药，具体涉及抗cd5纳米抗体及应用。
技术介绍
1、cd5分子高度表达在t细胞恶性肿瘤细胞表面，为t细胞系的特异性分子，同时表达在一部分b细胞恶性肿瘤表面，且其并不表达于正常的造血干细胞及其他类型的非造血细胞royston,wang(j exp med.1992 may l；175(5):1213-20)。因此，cd5分子有望成为t细胞恶性肿瘤的一个理想靶点。cd5分子为i型膜糖蛋白分子，分子量67kda，属于高度保守的srcr超家族(scavenger receptor cysteine-rich(srcr)superfamily)成员之一。srcr超家族分子可介导同型或异型相互作用，介导致病原相关的分子模式识别(pathogen-associated molecular pattern(pamp)recognition)。cd5分子胞外区包括d1、d2、d3三个srcr结构域，其中d3为近膜结构域。(consuegra-fernández m,aranda f,i，orta m,sarukhan a,lozano f.cd5 as a target for immune-based therapies.crit revimmunol.2015；35(2):85-115)。在靶向不同抗原的car-t细胞研究中显示，结合抗原分子近膜表位可增强car-t细胞的免疫功能.。
2、cd5抗体是一种特意性识别cd5分子的免疫球蛋白，其氨基酸组成因来源和结构而异。cd5抗体在t细胞免疫反应中起着重要作用，可
3、单域抗体(single domain antibody，sdab)，又称纳米抗体(nanobody)，纳米抗体只包含一个重链可变区(vhh)和ch2、ch3区，相比于普通的抗体，纳米抗体轻链天然缺失，是自然存在的可以和抗原结合的最小片段。纳米抗体能像正常抗体一样与抗原等靶标紧紧结合，但不像单链抗体那样相互黏连聚集成块。以该“重链抗体”为基础的纳米抗体不仅分子量只是普通抗体的1/10，临床使用更加安全，而且化学性质也更加灵活、稳定性好、可溶性高、表达容易且容易偶联其他分子。
4、单域抗体因具备传统抗体不具备的小分子质量和强穿透性的优势，被认为在疾病诊断与治疗、病原检测、药物残留分析、环境监测等领域具有巨大的应用潜力，在基因工程与adc药物研发、体外诊断技术(胶体金法、酶联免疫吸附法、电化学发光法)、肿瘤及免疫学研究等方面也已取得一些新的研究。目前无针对cd5靶点的的上市药物，因此研发靶向cd5治疗性纳米抗体具有广阔的前景。
技术实现思路
1、为了解决上述问题，本专利技术提供了一种抗cd5纳米抗体，重链可变区的cdr序列如seq id no.1-seq id no.3所示，重链可变区氨基酸序列如seq id no.4所示，该纳米抗体具有较强的特异性和亲和力，为相关疾病的治疗提供技术支持。
2、一方面，本专利技术提供了一种抗cd5纳米抗体，包括重链可变区，所述的重链可变区包括cdr1、cdr2和cdr3，其中：
3、(1)cdr1的氨基酸序列为seq id no.1；
4、(2)cdr2的氨基酸序列为seq id no.2；
5、(3)cdr3的氨基酸序列为seq id no.3。
6、具体地，所述的单域抗体的重链可变区氨基酸序列为seq id no.4或与seq idno.4具有85％以上序列同源性的序列。
7、优选地，所述的单域抗体的重链可变区氨基酸序列为与seq id no.4具有88％以上序列同源性的序列。
8、进一步优选地，所述的单域抗体的重链可变区氨基酸序列为与seq id no.4具有90％以上序列同源性的序列。
9、更进一步优选地，所述的单域抗体的重链可变区氨基酸序列为与seq id no.4具有95％以上序列同源性的序列。
10、最进一步优选地，所述的单域抗体的重链可变区氨基酸序列为与seq id no.4具有98％以上序列同源性的序列。
11、另一方面，本专利技术提供了前述的单域抗体的fc融合抗体或人源化抗体。
12、具体地，所述的的人源化抗体的氨基酸序列可以是seq id no.5。
13、另一方面，本专利技术提供了一种重组蛋白，包括前述的抗cd5纳米抗体或前述的fc融合抗体或人源化抗体。
14、另一方面，本专利技术提供了一种表达载体，包括编码前述的单域抗体或前述的fc融合抗体或人源化抗体的核酸。
15、具体地，所述的核酸的序列为seq id no.6或与seq id no.6具有80％以上序列同源性的序列。
16、另一方面，本专利技术提供了一种宿主细胞，包括前述的单域抗体或前述的fc融合抗体或人源化抗体或前述的表达载体。
17、具体地，所述的宿主细胞为真核细胞或原核细胞。
18、优选地，所述的真核细胞选自：巴斯德毕赤酵母、酿酒酵母、裂殖酵母和/或木霉；
19、所述的原核细胞选自：大肠杆菌、枯草杆菌、乳酸菌、链霉菌和/或奇异变形菌。
20、另一方面，本专利技术提供了一种cd5检测方法，该方法通过前述的抗cd5纳米抗体或前述的fc融合抗体或人源化抗体进行检测，所述的方法为非疾病诊断或治疗方法。
21、另一方面，本专利技术提供了一种cd5检测试剂盒，该试剂盒包括前述的单域抗体或前述的fc融合抗体或人源化抗体或前述的表达载体或前述的宿主细胞。
22、具体地，所述的试剂盒还包括但不限于：固相载体、检测标记、检测底物和/或缓冲液。
23、进一步具体地，所述的固相载体可以是一种具有亲和性的材料，可以将特异性抗体固定在表面上。
24、所述的检测标记可以是酶标记物，所述的酶标记物是一种能够与抗体结合的酶，用于检测抗体与抗原的结合情况。
25、所述的检测底物可以是酶标记物的反应产物，能够在酶催化下产生可测量的信号。
26、另一方面，本专利技术提供了一种预防和/或治疗肿瘤或自身免疫疾病的药物，所述的药物包括前述的单域抗体或前述的fc融合抗体或人源化抗体。
27、具体地，所述的药物还包括药学上可接受的辅料。
28、优选地，所述的药学上可接受的辅料选自聚山梨酯、组氨酸、蔗糖、精氨酸、氯化钠、蛋氨酸、醋酸盐、海藻糖、脯氨酸、山梨醇、磷酸钠、泊洛沙姆188、乙二胺四乙酸、柠檬酸、甘露醇、谷氨酸盐、甘氨酸、柠檬酸钠、琥珀酸钠和/或乳酸。
29、具体地，所述的药物剂型包括但不限于：仅液体溶液、冻干粉、仅预充式注射器以及预充式注射器、冻干粉，片剂、胶囊剂、颗粒剂、喷雾剂。
30、具体地，所述的给药途径包括但不限于：眼内注射、静脉内注射、肌内注本文档来自技高网...
【技术保护点】
1.一种抗CD5纳米抗体，其特征在于，包括重链可变区，所述的重链可变区包括CDR1、CDR2和CDR3，其中：
2.根据权利要求1所述的单域抗体，其特征在于，所述的单域抗体的重链可变区氨基酸序列为SEQ ID NO.4或与SEQ ID NO.4具有85％以上序列同源性的序列。
3.权利要求1-2任一项所述的单域抗体的Fc融合抗体或人源化抗体。
4.根据权利要求3所述的Fc融合抗体或人源化抗体，其特征在于，所述的的人源化抗体的氨基酸序列为SEQ ID NO.5。
5.一种重组蛋白，其特征在于，包括权利要求1-2任一项所述的抗CD5纳米抗体或权利要求3-4任一项所述的Fc融合抗体或人源化抗体。
6.一种表达载体，其特征在于，包括编码权利要求1-2任一项所述的单域抗体或权利要求3-4任一项所述的Fc融合抗体或人源化抗体的核酸。
7.根据权利要求6所述的表达载体，其特征在于，所述的核酸的序列为SEQ ID NO.6或与SEQ ID NO.6具有80％以上序列同源性的序列。
8.一种宿主细胞，其特征在于，包
9.根据权利要求8所述的宿主细胞，其特征在于，所述的宿主细胞为真核细胞或原核细胞。
10.一种CD5检测方法，其特征在于，通过权利要求1-2任一项所述的抗CD5纳米抗体或权利要求3-4任一项所述的Fc融合抗体或人源化抗体进行检测，所述的方法为非疾病诊断或治疗方法。
11.一种CD5检测试剂盒，其特征在于，包括权利要求1-2任一项所述的单域抗体或权利要求3-4任一项所述的Fc融合抗体或人源化抗体或权利要求6-7任一项所述的表达载体或权利要求8-9任一项所述的宿主细胞。
12.根据权利要求11所述的试剂盒，其特征在于，还包括固相载体、检测标记、检测底物和/或缓冲液。
13.一种预防和/或治疗肿瘤或自身免疫疾病的药物，其特征在于，所述的药物包括利要求1-2任一项所述的单域抗体或权利要求3-4任一项所述的Fc融合抗体或人源化抗体。
14.根据权利要求13所述的药物，其特征在于，所述的药物还包括药学上可接受的辅料。
15.根据权利要求13或14所述的药物，其特征在于，所述的药物还可以包括另一种或多种治疗肿瘤或自身免疫疾病的药物。
16.权利要求1-2任一项所述的单域抗体或权利要求3-4任一项所述的Fc融合抗体或人源化抗体在制备治疗肿瘤或自身免疫疾病的药物中的应用。
...【技术特征摘要】
1.一种抗cd5纳米抗体，其特征在于，包括重链可变区，所述的重链可变区包括cdr1、cdr2和cdr3，其中：
2.根据权利要求1所述的单域抗体，其特征在于，所述的单域抗体的重链可变区氨基酸序列为seq id no.4或与seq id no.4具有85％以上序列同源性的序列。
3.权利要求1-2任一项所述的单域抗体的fc融合抗体或人源化抗体。
4.根据权利要求3所述的fc融合抗体或人源化抗体，其特征在于，所述的的人源化抗体的氨基酸序列为seq id no.5。
5.一种重组蛋白，其特征在于，包括权利要求1-2任一项所述的抗cd5纳米抗体或权利要求3-4任一项所述的fc融合抗体或人源化抗体。
6.一种表达载体，其特征在于，包括编码权利要求1-2任一项所述的单域抗体或权利要求3-4任一项所述的fc融合抗体或人源化抗体的核酸。
7.根据权利要求6所述的表达载体，其特征在于，所述的核酸的序列为seq id no.6或与seq id no.6具有80％以上序列同源性的序列。
8.一种宿主细胞，其特征在于，包括权利要求1-2任一项所述的单域抗体或权利要求3-4任一项所述的fc融合抗体或人源化抗体或权利要求6-7任一项所述的表达载体。
9.根据权...
【专利技术属性】
技术研发人员：张继帅，栗红建，苏红昌，祖璎玲，罗燕平，
申请(专利权)人：深圳普瑞金生物药业股份有限公司，
类型：发明
国别省市：
还没有人留言评论。发表了对其他浏览者有用的留言会获得科技券。