一种特异性识别PRAME抗原肽的TCR及其应用制造技术

本发明专利技术公开了一种特异性识别PRAME抗原肽的TCR及其应用。所述的TCR的α链可变区的CDR1、CDR2和CDR3分别包含如SEQ ID NO:4、SEQ ID NO:5和SEQ IDNO:6所示的氨基酸序列，所述的TCR的β链可变区的CDR1、CDR2和CDR3分别包含如SEQ ID NO:7、SEQ ID NO:8和SEQ ID NO:9所示的氨基酸序列，本发明专利技术的TCR与pMHC(HLA

【技术实现步骤摘要】
一种特异性识别PRAME抗原肽的TCR及其应用


[0001]本专利技术属于生物
，涉及一种特异性识别PRAME抗原肽的TCR及其应用，具体为一种识别HLA
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的TCR及其应用。

技术介绍

[0002]黑色素瘤特异性抗原(Preferentially Expressed Antigen of Melanoma，PRAME)是肿瘤癌睾抗原家族的一员，最初在黑色素瘤中发现，具有免疫原性，能被细胞毒性T淋巴细胞(简称T细胞)特异性识别并引发肿瘤溶解的表面抗原(Immunity,1997,6,199；Br JHaematol,1998,102,1376；J Exp Med,2001,193,73；Clin Cancer Res,2006,12,3130；Blood,2008,112,1876；Clin Cancer Res,2011,17,5615；Oncol Rep,2014,31,384；Cancer Res,2018,78,3337)。PRAME属于肿瘤相关抗原，在许多不同的癌症中高度表达，例如急慢性白血病、淋巴瘤、黑色素瘤、非小细胞肺癌、宫颈癌、肉瘤、头颈癌、肾细胞癌、乳腺癌等(Cancer Res,1998,58,4090；Cell,2005,122,835；Blood,2009,114,15；Oral Oncol,2013,49,144；Clin Cancer Res,2013,19,2562；Oncol Rep,2014,31,384；Immunol Invest,2016,45,619；Mol Ther Methods Clin Dev,2021,21,492)，而在正常组织中几乎不表达或表达量极低(例如睾丸、肾上腺、卵巢和子宫内膜)，因此PRAME是肿瘤免疫治疗中重要的潜在靶点(Biomark Med,2012,6,629；Cancers(Basel),2019,11,984)。VLDGLDVLL肽段(SEQ ID NO:1)在PRAME上位于100
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A*02:01分子进行递呈并被细胞毒性T淋巴细胞识别而产生效应，该肽段与HLA
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A*02:01分子的结合亲和力是5.2μM，其复合物在37℃半衰减期为2.5h(J.Exp.Med.,2001,193,73)。
[0003]T细胞受体基因工程改造的T细胞(T cell receptor gene engineered T cells，TCR
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T)疗法是将肿瘤抗原特异性的TCR基因转导到正常T细胞中，能够增强或重新赋予该T细胞识别肿瘤抗原的能力，特异地靶向和杀伤肿瘤细胞，是当前过继性细胞治疗中重要的治疗方法(Immunol Rev,2014,257,56)。许多临床试验已经证明了TCR
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T细胞疗法在治疗黑色素瘤、滑膜细胞肉瘤、骨髓瘤等恶性肿瘤中的有效性和安全性(Science,2006,314,126；J Clin Oncol,2011,29,917；Nat Med,2015,21,914；Blood,2017,130,1985；Cancer Discov,2018,8,944)。截至2022年2月，clinicaltrials.gov网站上显示，针对PRAME靶点目前全球已开展10项临床试验，其中与TCR相关的疗法有5项(NCT02743611、NCT03503968、NCT03318900、NCT04262466、NCT03686124)。Immatics N.V.公司开发的PRAME TCR
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T疗法的Ia期临床数据验证了该疗法的有效性和安全性(NCT03686124,J Immunother Cancer,2021,9(Suppl 2),A1009)，为PRAME相关癌症的治疗提供一条新的途径。随着相关技术的发展和研究的不断深入，TCR
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T疗法将逐渐向高效、低毒及可操控的方向发展，在提高疗效和安全性的同时也能带来临床应用的便捷性，从而为更多肿瘤患者带来治愈的希望。

技术实现思路

[0004]本专利技术所要解决的技术问题是为克服现有技术中识别并结合PRAME抗原肽的TCR
数量有限的缺陷，从而本专利技术提供一种特异性识别PRAME抗原肽的TCR，采用该TCR改造的T细胞通过高效识别HLA
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靶点对肿瘤细胞进行特异性杀伤。
[0005]主要组织相容性复合体(MHC)分子属于免疫球蛋白超家族成员，可以是I类或II类MHC分子。其对于抗原的呈递具有特异性，不同的个体有不同的MHC，能呈递一种蛋白抗原中不同的短肽到各自的抗原呈递细胞(APC)表面。人类的MHC通常称为HLA基因或HLA复合体。
[0006]T细胞受体(TCR)，是呈递在MHC上的特异性抗原的唯一受体。在免疫系统中，通过抗原特异性的TCR与pMHC复合物的结合引发T细胞与APC直接的物理接触，然后T细胞及APC两者的其他细胞膜表面分子发生相互作用，引起一系列后续的细胞信号传递和其他生理反应，从而使得不同抗原特异性的T细胞对其靶细胞发挥免疫效应。
[0007]TCR是T淋巴细胞识别抗原的功能单位，属免疫球蛋白超级家族，其编码链包括α、β、γ和δ四条链，TCR是由α链/β链或者γ链/δ链以异质二聚体形式存在的细胞膜表面的糖蛋白。外周血95％的TCR是由α和β两条多肽链构成的异源二聚体。但重组TCR还可以由一条单独的TCRβ链或者TCRα链组成，其已被证明能够结合抗原肽
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MHC分子(WO 2005/113595)。
[0008]广义上讲，α和β各链包含可变区、连接区和恒定区，β链通常还在可变区和连接区之间含有短的多变区，但该多变区常被视作连接区的一部分。各可变区包含嵌合在框架结构(framework regions)中的3个CDR(互补决定区)，CDR1、CDR2和CDR3。CDR区决定了TCR与pMHC复合物的结合，其中CDR3由可变区和连接区重组而成，被称为超变区。TCR的α和β链一般看作各有两个"结构域"即可变域和恒定域，可变域由连接的可变区和连接区构成。TCR恒定域的序列可以在国际免疫遗传学信息系统(IMGT)的公开数据库中找到，如TCR分子α链的恒定域序列为TRAC(也可称为TRAC*01)，TCR分子β链的恒定域序列为TRBC1(也可称为TRBC1*01)或TRBC2(也可称为TRBC2*01)。此外，TCR的α和β链还包含跨膜区和胞质区，胞质区很短。
[0009]另外，α链由胚系基因中TRAV、TRAJ、TRAC重排组成；β链由胚系基因中的TRBV、TRBD、TRBJ、TRBC重排组成，不同V(D)J重排后，由V
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J(或V
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D和D
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J本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种TCR，所述TCR包含α链和β链，所述α链包含α链可变区，所述β链包含β链可变区，其特征在于，所述α链可变区的CDR1、CDR2和CDR3分别为如SEQ ID NO:4、SEQ ID NO:5和SEQ ID NO:6所示的氨基酸序列，且所述β链可变区的CDR1、CDR2和CDR3分别为如SEQ ID NO:7、SEQ ID NO:8和SEQ ID NO:9所示的氨基酸序列。2.如权利要求1所述的TCR，其特征在于，所述TCR的α链和/或β链还包含框架区；所述α链的框架区来源于TRAV和TRAJ，其中所述TRAV优选种系TRAV20，所述TRAJ优选种系TRAJ36；和/或，所述β链的框架区来源于TRBV、TRBD和TRBJ，所述TRBV优选种系TRBV7
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8，所述TRBD优选种系TRBD1，所述TRBJ优选种系TRBJ2
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3。3.如权利要求2所述的TCR，其特征在于，所述α链可变区的氨基酸序列如SEQ ID NO:10所示，和/或所述β链可变区的氨基酸序列如SEQ ID NO:12所示。4.如权利要求1～3任一项所述的TCR，其特征在于，所述TCR的α链和/或β链还包括恒定区，所述α链和/或所述β链的恒定区优选来源于人种系；较佳地，所述α链的恒定区来源于TRAC，和/或，所述β链的恒定区来源于TRBC，所述TRBC优选种系TRBC2；更佳地，来源于人种系的α链的恒定区的氨基酸序列如SEQ ID NO:11所...

【专利技术属性】
技术研发人员：吴显辉，王晓娟，陈亮，汤小欣，黄金燕，李嘉，林子圣，栗红建，
申请(专利权)人：深圳普瑞金生物药业股份有限公司，
类型：发明
国别省市：