TCR或其抗原结合片段及其应用制造技术

本发明专利技术属于T细胞免疫治疗药物技术领域，具体涉及一种T细胞受体(TCR)或其抗原结合片段及其应用，该TCR包含由如SEQIDNO:15所示序列编码得到的片段。该TCR对KRAS

【技术实现步骤摘要】
TCR或其抗原结合片段及其应用


[0001]本专利技术属于T细胞免疫治疗药物
，具体涉及一种TCR或其抗原结合片段及其应用。

技术介绍

[0002]随着生物医药领域研究的进展，靶向恶性实体瘤的T细胞免疫治疗的靶点选择在不断演变，从最初的谱系抗原变成了病毒抗原，而随着近年来高通量测序技术的出现，靶向肿瘤个体突变成为了新一代T细胞治疗聚焦的靶点。
[0003]T细胞治疗目前主要包括TCR
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T和CAR
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T治疗手段。目前CAR
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T技术治疗在白血病、淋巴病瘤等血液瘤的治疗中起到显著效果，大大提高了患者生存率和生存质量，但是针对实体瘤，CAR
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T治疗手段由于目前的特异性靶点有限，大大限制了其应用前景。TCR
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T技术不同于CAR
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T细胞技术，TCR是所有T细胞表面的特征性标志，以非共价键与CD3结合，形成TCR
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CD3复合物。外周血中，90％
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95％的T细胞表达TCR，经过基因改造的TCR的T细胞，可以对肿瘤细胞表面上的抗原分子进行特异性识别，进而针对肿瘤细胞产生免疫反应。目前，在人类癌症中，KRAS基因为肿瘤学领域最著名的致癌基因之一，KRAS基因突变(KRAS
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G12C突变、KRAS
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G12D突变、KRAS
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G12V突变等)出现在接近90％的胰腺癌中，30％
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40％的结肠癌中，17％的子宫内膜癌中，15％
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20％的肺癌包括小叶性肺癌中，以及胆管癌、宫颈癌、膀胱癌等。
[0004]通过以上所述情况，现需一种可以与KRAS突变多肽特异性结合，并能介导T细胞对KRAS突变的肿瘤细胞进行杀灭的TCR。

技术实现思路

[0005]本专利技术目的之一在于提供一种TCR，可以靶向特异性识别KRAS
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G12D突变位点，与KRAS
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G12D突变的多肽与HLA的复合体特异性结合，从而刺激T细胞活化，介导T细胞分泌IFN
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γ等细胞因子，进而杀伤表达KRAS
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G12D突变基因的肿瘤细胞。该TCR或其抗原结合片段对KRAS
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G12D突变的多肽特异性强，而且能介导T细胞分泌大量的IFN
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γ细胞因子，杀灭KRAS
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G12D突变的肿瘤细胞。
[0006]本专利技术一方面提供了一种TCR，可以从以下两种TCR进行选择：
[0007]第一种：TCR的α链可变区可以包含如SEQIDNO:3所示序列编码的α链CDR3，TCR的β链可变区包含如SEQIDNO:6所示序列编码的β链CDR3。
[0008]第二种：TCR可以包含由如SEQIDNO:15所示序列编码得到的片段。
[0009]本专利技术另一方面提供了一种抗原结合片段，可以包含上述两种TCR中的任意一种。
[0010]本专利技术再一方面提供了一种多核苷酸，可以从以下两种多核苷酸进行选择：
[0011]第一种：可以包含如SEQIDNO:3和SEQIDNO:6所示序列。
[0012]第二种：可以包含如SEQIDNO:15所示序列。
[0013]本专利技术再一方面提供了一种表达载体，可以包含上述两种多核苷酸中任意一种。
[0014]本专利技术再一方面提供了一种工程细胞，可以包含上述的表达载体。
[0015]本专利技术再一方面提供了一种药物组合物，可以包含上述的TCR或上述的抗原结合片段或上述的多核苷酸或上述的表达载体或上述的工程细胞，和药学上可接受的载体和/或稀释剂。
[0016]本专利技术再一方面提供了一种上述的TCR或上述的抗原结合片段或上述的多核苷酸或上述的表达载体或上述的工程细胞在制备用于提高T细胞分泌IFN
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γ和/或Granzyme
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B细胞因子水平药物中的应用。
[0017]本专利技术再一方面提供了一种上述的TCR或上述的抗原结合片段或上述的多核苷酸或上述的表达载体或上述的工程细胞在制备用于检测表达KRAS
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G12D突变的肿瘤细胞试剂或试剂盒中的应用。
[0018]本专利技术再一方面提供了一种上述的TCR或上述的抗原结合片段或上述的多核苷酸或上述的表达载体或上述的工程细胞在制备用于治疗携带KRAS
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G12D突变导致的疾病的药物中的应用。
[0019]本专利技术有益效果在于：本专利技术提供的TCR对KRAS
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G12D突变多肽有很强的特异性，而且能介导T细胞分泌大量的IFN
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γ细胞因子杀死KRAS
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G12D突变的肿瘤细胞。
附图说明
[0020]图1为实施例中的KT5对KRAS
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G12D突变多肽特异性流式细胞检测结果图。
[0021]图2为实施例中的KT5介导T细胞分泌IFN
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γ细胞因子情况。
[0022]图3为实施例中的KT5介导T细胞分泌Granzyme
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B细胞因子情况。
具体实施方式
[0023]本文中使用的术语仅用于描述特定实施例，并且无意于限制本公开。除非在上下文中具有明显不同的含义，否则单数形式的表达包括复数形式的表达。如本文所使用的，应当理解，诸如“包括”、“具有”、“包含”之类的术语旨在指示特征、数字、操作、组件、零件、元件、材料或组合的存在。在说明书中公开了本专利技术的术语，并且不旨在排除可能存在或可以添加一个或多个其他特征、数字、操作、组件、部件、元件、材料或其组合的可能性。如在此使用的，根据情况，“/”可以被解释为“和”或“或”。
[0024]本专利技术中，术语“抗原结合片段”是指TCR的抗原结合片段及TCR类似物，其通常包括至少部分母体TCR的抗原结合区或可变区，例如一个或多个CDR。TCR的片段保留母体TCR的至少某些结合特异性。
[0025]本专利技术目的在于提供一种TCR，本专利技术目的之一在于提供一种TCR，可以靶向特异性识别KRAS
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G12D突变位点，与KRAS
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G12D突变的多肽与HLA的复合体特异性结合，从而刺激T细胞活化，介导T细胞分泌IFN
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γ等细胞因子，进而杀伤表达KRAS
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G12D突变的肿瘤细胞。该TCR或其抗原结合片段对KRAS
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G12D突变的多肽特异性强，而且能介导T细胞分泌大量的IFN
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γ细胞因子。
[0026]本专利技术一方面提供了一种TCR，TCR包含α链可变区和β链可变区，本专利技术中的TCR可以从以下几种TCR进行选择：
[0027]第一种TCR：
[0028]第一种TCR中，α链可变区至少包含如SEQIDNO:3所示本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.TCR，其特征在于，包含α链可变区和β链可变区；α链可变区包含如SEQ ID NO:3所示序列编码的α链CDR3，β链可变区包含如SEQ ID NO:6所示序列编码的β链CDR3。2.根据权利要求1所述的TCR，其特征在于，α链可变区还包含：如SEQ ID NO:1所示序列编码的α链CDR1和/或如SEQ ID NO:2所示序列编码的α链CDR2；β链可变区还包含：如SEQ ID NO:4所示序列编码的β链CDR1和/或如SEQ ID NO:5所示序列编码的β链CDR2。3.根据权利要求1或2所述的TCR，其特征在于，α链可变区还包含：如SEQ ID NO:7所示序列编码的α链FR1、如SEQ ID NO:8所示序列编码的α链FR2、如SEQ ID NO:9所示序列编码的α链FR3和如SEQ ID NO:10所示序列编码的α链FR4中一种或多种；β链可变区还包含：如SEQ ID NO:11所示序列编码的β链FR1、如SEQ ID NO:12所示序列编码的β链FR2、如SEQ ID NO:13所示序列编码的β链FR3和如SEQ ID NO:14所示序列编码的β链FR4中一种或多种。4.TCR，其特征在于，包含由如SEQ ID NO:15所示序列编码得到的片段。5.抗原结合片段，其特征在于，包含权利要求1至4中任一权利要求所述的TCR。6.多核苷酸，其特征在于，包含如SEQ ID NO:3和SEQ ID NO:6所示序列。7.根据权利要求6所述的多核苷酸，其特征在于，还包含如SEQ ID NO:1所示序列、如SEQ ID NO:2所示序列、如SEQ ID NO:4所示序列、如SEQ ID NO:5所示序列、如SEQ ID NO:7所示序列、如SEQ ID NO:8所示序列、如SEQ ID NO:9所示序列、如SEQ ID NO:10所示序列、如SEQ ID NO:11所示序列、如SEQ ID NO:12所...

【专利技术属性】
技术研发人员：金艾顺，韩晓建，申美莹，王君凡，张静，王易，
申请(专利权)人：冯玉林，
类型：发明
国别省市：