增强胞苷生产的方法及应用技术

本发明专利技术公开了增强胞苷生产的方法及应用，属于基因工程和微生物工程领域。本发明专利技术通过敲除胞苷脱氨酶基因cdd、尿苷激酶基因udk、嘧啶特异性核糖核苷水解酶基因rihB、核苷酸5

【技术实现步骤摘要】
增强胞苷生产的方法及应用


[0001]本专利技术涉及增强胞苷生产的方法及应用，属于基因工程和微生物工程领域。

技术介绍

[0002]1‑
β
‑
D
‑
呋喃核苷胞嘧啶(1
‑
beta
‑
ribofuranosylcytosine)又名胞嘧啶核苷(cytosine nucleoside)、胞苷(cytidine)。胞苷是由胞嘧啶的N
‑
1与D
‑
核糖的C
‑
1通过β糖苷键相连接形成的化合物。胞苷存在于一切生物体内，是RNA的组成部分。胞苷最重要的工业用途是作为化学合成抗病毒、抗肿瘤药物的原料。许多胞苷结构类似物，都具有干扰细胞RNA合成的作用。基于这一原理，已开发出了多种胞苷类似物，用于治疗病毒感染和肿瘤，其中许多药物被作为临床特效药和首选药物而广泛使用。例如：扎西他滨(2'，3'
‑
双脱氧胞嘧啶核苷)，能够竞争性的抑制逆转录酶活性，被广泛用于治疗HIV感染和其它逆转录病毒感染。卡培他滨(5'...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种重组大肠杆菌，敲除了基因组上的胞苷脱氨酶基因cdd、尿苷激酶基因udk、嘧啶特异性核糖核苷水解酶基因rihB、核苷酸5
’‑
单磷酸核苷酶基因ppnN、丙酮酸氧化酶基因poxB和核糖核苷三磷酸还原酶基因nrdD，并整合表达5
’‑
CTP二磷酸水解酶和/或乳清酸磷酸核糖转移酶。2.根据权利要求1所述的重组大肠杆菌，其特征在于，所述5
’‑
CTP二磷酸水解酶具有SEQ ID NO.6所示的氨基酸序列；所述乳清酸磷酸核糖转移酶的氨基酸序列如SEQ ID NO.8或SEQ ID NO.10所示。3.根据权利要求1或2所述的重组大肠杆菌，其特征在于，在umpH位点整合5
’‑
CTP二磷酸水解酶和/或乳清酸磷酸核糖转移酶的编码基因。4.根据权利要求3所述的重组大肠杆菌，其特征在于，所述5
’‑
CTP二磷酸水解酶的基因序列如SEQ ID NO.5所示；所述乳清酸磷酸核糖转移酶的基因序列如SEQ ID NO.7或SEQ ID NO.9所示。5.根据权利要求1～4任一所述的重组大肠杆菌，其特征在于，在丙酮酸氧化酶基因poxB所在位置整合表达尿苷酸激酶突变体；所述尿苷酸激酶突变体具有SEQ ID NO.14所示的氨基酸序列。6.根据权利要求1～5任一所述的重组大肠杆菌，其特征在于，所述重组大肠杆菌在核糖核苷三磷酸还原酶基因n...

【专利技术属性】
技术研发人员：张玮琪，张剑，
申请(专利权)人：江苏香地化学有限公司，
类型：发明
国别省市：