一种靶向S100A9的自组装融合多肽及其应用制造技术

本发明专利技术公开了一种靶向S100A9的自组装融合多肽及其应用，靶向S100A9的自组装融合多肽，其主体结构为MEWSLEKGYTIK

【技术实现步骤摘要】
一种靶向S100A9的自组装融合多肽及其应用


[0001]本专利技术涉及生物领域，具体涉及一种靶向S100A9的自组装融合多肽及其应用。

技术介绍

[0002]骨髓源性抑制细胞(MDSCs)是一种异质细胞群，阻碍免疫细胞的正常先天和适应性免疫功能。MDSCs主要抑制CD8+ T细胞、NK细胞和B细胞的功能，并促使CD4+ T细胞向调节性T细胞和肿瘤相关巨噬细胞分化，导致过度的免疫抑制。此外，MDSCs促进肿瘤血管生成，促进上皮
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间充质转化，分泌基质金属蛋白酶，并分化为破骨细胞，加速肿瘤细胞的侵袭和转移。S100A9可由MDSCs合成和分泌，并与晚期糖基化终产物受体结合，激活MAPK和NF
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κB信号通路，导致MDSCs募集和肿瘤转移。即抑制S100A8/A9介导的MDSCs积累是预防恶性肿瘤肺转移的重要途径，因此靶向S100A9以耗竭并促进MDSCs的分化被认为是一种很有前景的抑制肿瘤转移的策略。
[0003]Qin等通过噬菌体展示技术已筛选出了靶向S100A9的多肽H6（MEWSLEKGYTIK），将H6与抗体融合后可选择性耗竭荷瘤小鼠体内的MDSCs，发挥良好的抑瘤效果。另外，Chung等通过将H6共价偶联到豇豆花叶病毒表面，发展了一种靶向S100A9的联合免疫疗法。虽然可以利用抗体的免疫效应作用和植物病毒的免疫调控作用来增强其抗肿瘤效果，但是多肽与抗体的融合制备复杂，生产周期长，成本很高；而植物病毒虽然具有很强的免疫调控作用，但是其安全性仍有待确认，且多肽与病毒共价偶联效率较低，不同批次重复性较差。因此开发新型的S100A9靶向多肽递送策略是调控MDSCs抗肿瘤转移效果的关键。

技术实现思路

[0004]本专利技术的目的在于克服现有技术的至少一个不足，提供一种靶向S100A9的自组装融合多肽及其应用。
[0005]本专利技术所采取的技术方案是：本专利技术的第一个方面，提供：一种靶向S100A9的自组装融合多肽，其主体结构为MEWSLEKGYTIK
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连接子
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QQKFQFQFEQQ或QQKFQFQFEQQ
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连接子
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MEWSLEKGYTIK。
[0006]在一些自组装融合多肽的实例中，MEWSLEKGYTIK的末端连接或未连接有保护肽。
[0007]在一些自组装融合多肽的实例中，MEWSLEKGYTIK的末端共价连接有不影响其特异性的保护分子。
[0008]在一些自组装融合多肽的实例中，所述连接子为柔性肽或PEG。
[0009]在一些自组装融合多肽的实例中，所述柔性肽的氨基酸序列为(GS)n或(SG)n，n为不小于2的整数。
[0010]在一些自组装融合多肽的实例中，n为2～10之间的整数。
[0011]在一些自组装融合多肽的实例中，其氨基酸序列为MEWSLEKGYTIK
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SGSG
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QQKFQFQFEQQ。
[0012]本专利技术的第二个方面，提供：自组装融合多肽在制备靶向S100A9制剂中的应用，所述自组装融合多肽如本专利技术第一个方面所述。
[0013]在一些应用的实例中，所述靶向S100A9制剂为诊断制剂、抑制肿瘤肺转移药物。
[0014]本专利技术的第三个方面，提供：一种DNA分子，其编码本专利技术第一个方面所述的自组装融合多肽，所述自组装融合多肽的连接子为柔性肽。
[0015]本专利技术的有益效果是：本专利技术一些实例的自组装融合多肽，在体外可自组装形成β
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sheet纳米纤维结构，与S100A9蛋白具有高度亲和力（亲和力KD = 9.27μM）；通过体内示踪技术，自组装多肽H6
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Q11延长多肽H6的体内循环时间，有效地靶向肿瘤转移主要部位肺组织；通过构建黑色素瘤和乳腺癌转移瘤模型，自组装多肽H6
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Q11有效抑制肿瘤发生肺转移。
附图说明
[0016]图1是多肽Q11和多肽H6
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Q11自组装特性表征，其中，a) Q11、H6
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Q11的圆二色吸收谱图；b）Q11、H6
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Q11的TEM形貌图。
[0017]图2是多肽H6
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Q11和多肽H6与S100A9的结合解离曲线。
[0018]图3是多肽H6
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Q11和H6在肺内生物分布，其中，a) 多肽Cy5.5
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H6
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Q11、Cy5.5
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H6在肺内荧光成像图；b) 多肽Cy5.5
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H6
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Q11、Cy5.5
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H6在肺内荧光信号定量分析。
[0019]图4是不同多肽抑制黑色素瘤肺转移的有效性研究结果，其中，a)不同处理组肺部照片及肿瘤计数；b）不同处理组肺切片H&E染色及肿瘤计数。
[0020]图5是不同多肽抑制乳腺癌肺转移的有效性研究，其中，a)不同处理组肺部照片及肿瘤计数；b）不同处理组肺切片H&E染色及肿瘤计数。
具体实施方式
[0021]本专利技术的第一个方面，提供：一种靶向S100A9的自组装融合多肽，其主体结构为MEWSLEKGYTIK
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连接子
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QQKFQFQFEQQ或QQKFQFQFEQQ
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连接子
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MEWSLEKGYTIK。
[0022]在一些自组装融合多肽的实例中，MEWSLEKGYTIK的末端连接或未连接有保护肽。
[0023]保护肽的长度以1～3个为宜，这种情况下基本不影响MEWSLEKGYTIK的靶向性和亲和力。保护肽的作用在于提高肽段在体内的稳定性在一些自组装融合多肽的实例中，MEWSLEKGYTIK的末端共价连接有不影响其特异性的保护分子。
[0024]在一些自组装融合多肽的实例中，所述连接子为柔性肽或PEG。连接子优选为柔性肽，这样可以直接表达、纯化得到。
[0025]柔性肽的种类没有特别的限制。在一些自组装融合多肽的实例中，所述柔性肽的氨基酸序列为(GS)n或(SG)n，n为不小于2的整数。这种类型的柔性肽基本不影响肽两端的肽的特性。
[0026]在一些自组装融合多肽的实例中，n为2～10之间的整数。
[0027]在一些自组装融合多肽的实例中，其氨基酸序列为MEWSLEKGYTIK
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SGSG
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QQKFQFQFEQQ。
[0028]本专利技术的第二个方面，提供：自组装融合多肽在制备靶向S100A9制剂中的应用，所述自组装融合多肽如本专利技术第一个方面所述。
[0029]在一些应用的实例中，所述靶向S100A9制剂为诊断制剂、抑制肿瘤肺转移药物。
[0030]在一些应用的实例中，所述靶向S100A9制剂为抑制黑色本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种靶向S100A9的自组装融合多肽，其特征在于，其主体结构为MEWSLEKGYTIK
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连接子
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QQKFQFQFEQQ或QQKFQFQFEQQ
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连接子
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MEWSLEKGYTIK。2.根据权利要求1所述的自组装融合多肽，其特征在于，MEWSLEKGYTIK的末端连接或未连接有保护肽。3.根据权利要求1所述的自组装融合多肽，其特征在于，MEWSLEKGYTIK的末端共价连接有不影响其特异性的保护分子。4.根据权利要求1所述的自组装融合多肽，其特征在于，所述连接子为柔性肽或PEG。5.根据权利要求4所述的自组装融合多肽，其特征在于，所述...

【专利技术属性】
技术研发人员：蔡辉，郭雅静，洪胜，杨安平，
申请(专利权)人：中山大学，
类型：发明
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