靶向BCMA嵌合抗原受体及其应用制造技术

本发明专利技术提供一种靶向BCMA嵌合抗原受体，该受体包括人源靶向BCMA的ScFv结构，ScFv的重链可变区ScFv

【技术实现步骤摘要】
靶向BCMA嵌合抗原受体及其应用


[0001]本专利技术涉及肿瘤的细胞免疫治疗领域，具体涉及靶向BCMA嵌合抗原受体。

技术介绍

[0002]多发性骨髓瘤(multiple myeloma，MM)是一种终末分化的浆细胞异常增殖的恶性肿瘤，是第二大最常见的血液系统恶性肿瘤。近年来，随着新的治疗药物如蛋白酶体抑制剂和免疫调节剂的发展，患者的预后有了明显改善。但是MM仍然是一种不治之症，几乎所有患者最终都会面临复发和耐药的风险。因此，新的治疗方案对这些患者至关重要。以嵌合抗原受体T(chimeric antigen receptor modified T cell，CAR
‑
T)细胞为代表的免疫疗法在血液系统肿瘤中显示出良好的疗效，有望成为MM的新型有效治疗方法。
[0003]与传统T细胞活化途径不同，CAR
‑
T细胞的活化不依赖于MHC的呈递。CAR
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T细胞可通过胞外的单链可变区(single
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chain variable fragment，ScFv)识别并结合肿瘤靶细胞表面抗原。在最初的设计中，胞外的抗原结合域与胞内的信号传导结构域通过跨膜结构域相连(第一代CAR)，在识别并结合抗原后可直接诱导T细胞的活化。抗原结合域与细胞表面的配体结合提供第一信号，一旦与配体结合，胞内共刺激分子随即被激活提供第二信号，第一信号与第二信号传输到胞内的激活域中将CAR
‑
T激活，发挥抗肿瘤活性。研究发现第一代CAR结构几乎没有肿瘤清除作用，并且无增殖活性，因此研究者们构建了包含CD28或4
‑
1BB等共刺激域的第二代CAR，第二代CAR具有更强的抗肿瘤活性。整合一个以上胞内共刺激域(如CD28、OX40、4
‑
1BB、CD27等)的CAR成为第三代CAR。第四代CAR是能够分泌细胞因子如IL
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12和表达细胞表面标记如共刺激配体的CAR。目前，二代CAR结构显示出更好的安全性和临床有效性，因此临床应用更为广泛。
[0004]典型的CAR
‑
T细胞制造需要从患者体内抽取外周血，分离出外周血单个核细胞(PBMC)，再进行T细胞的刺激和活化，之后通过基因工程的方法，使其细胞表面表达将能够特异性识别肿瘤靶抗原的CAR，制备成功的CAR
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T细胞通过大量扩增后回输至患者体内，发挥抗肿瘤功能。CAR
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T细胞的生产一般需要10
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14天。自2017年以来，先后已有5款CAR
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T产品获得FDA批准上市，用于治疗血液系统恶性肿瘤，其中靶向BCMA的Abecma在今年获批上市，是首款用于治疗MM的CAR
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T细胞产品。
[0005]识别肿瘤特异性抗原是CAR
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T细胞治疗成功的关键。首先，抗原必须在肿瘤细胞表面表达。其次，抗原必须在肿瘤细胞上均匀表达，理想情况下应该是肿瘤存活所必需的。最重要的是，靶抗原不能在相关的健康组织表达，以避免发生潜在的靶上肿瘤外毒性。
[0006]BCMA，也称为CD269或TNFRSF17，是一种由成熟的B淋巴细胞、浆细胞和大多数多发性骨髓瘤患者表达的大小为27kDa的III型跨膜糖蛋白。BCMA可与多种配体结合，包括BAFF(B细胞激活因子)和APRIL(A增殖诱导配体)，通过下游的NF
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κB和MAPK/JNK信号通路介导细胞存活BCMA是肿瘤坏死因子的一员，在支持浆细胞分化和存活方面起着至关重要的作用。它在正常浆细胞和MM细胞上选择性表达，在其他组织的细胞中没有检测到BCMA的表达。BCMA与跨膜激活剂、钙离子调节剂和亲环素配体相互作用因子(TACI)一起，也是增殖诱导
配体(APRIL)的受体。在多发性骨髓瘤中，APRIL/BCMA通路在支持生长、耐药和免疫受损的环境中起着关键作用。由于其在浆细胞上的独特表达和在多发性骨髓瘤中的重要作用，BCMA已成为治疗多发性骨髓瘤的理想靶点。
[0007]虽然已经报道了以MM为靶点的BCMA CAR
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T细胞，但仍需要对新型CAR
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T细胞进行临床实验，以推进MM的治疗。

技术实现思路

[0008]为了解决上述问题，本专利技术提供一种靶向BCMA嵌合抗原受体，该受体包括人源靶向BCMA的ScFv结构，ScFv的重链可变区ScFv
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VH与轻链可变区ScFv
‑
VL之间通过一个或多个G4S序列连接；重链可变区ScFv
‑
VH的氨基酸序列与以下SEQ ID NO.8具有至少90％同源性，优选地具有至少95％同源性，更有优选地具有至少98％同源性：SQVTLRESGPGLVRPSQTLSLTCTVSGGSIDSGGHYWSWIRQHPGKGLEWIGS IYHSGNTYYNPSLKSRVTMSVDTSKNQFSLKLTSVTAADTAIYYCARDIPHYF EPAYWGQGTLVTVSS；
[0009]轻链可变区ScFv
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VL的氨基酸序列与以下SEQ ID NO.9具有至少90％同源性，优选地具有至少95％同源性，更有优选地具有至少98％同源性：QSALTQPASASGSPGQSVTISCTGTSSDVGGYNYVSWYQQHPGKAPKLMIYE VSNRPSGVSNRFSGSKSGNTASLTISGLQAEDEADYYCAIWHSSAWVFGGGT KLTVLG。
[0010]在一种实施方式中，该受体包括人源靶向BCMA的ScFv结构为ScFv
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VH
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(G4S)n
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ScFv
‑
VL，其中n为大于等于1的整数，优选地为3或4。
[0011]在一种实施方式中，该受体包括人源靶向BCMA的ScFv结构为ScFv
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VH
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(G4S)3
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ScFv
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VL，重链可变区ScFv
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VH的氨基酸序列为SEQ ID NO.8；轻链可变区ScFv
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VL的氨基酸序列为SEQ ID NO.9。
[0012]在一种实施方式中，该受体包括人源靶向BCMA的ScFv结构为ScFv
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VH
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(G4S)n
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ScFv
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VL
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(G4S)n
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ScFv
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VL
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(G4S)n
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ScFv
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VH，其中n为大于等于1的整数，优选地为3或4。
[0013]在一种实施方式中，该受体包括人源靶向BCMA的ScFv结构为ScFv
‑
VH
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(G4S)3
‑本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种靶向BCMA嵌合抗原受体，其特征在于，该受体包括人源靶向BCMA的ScFv结构，ScFv的重链可变区ScFv
‑
VH与轻链可变区ScFv
‑
VL之间通过一个或多个G4S序列连接；重链可变区ScFv
‑
VH的氨基酸序列与以下SEQ ID NO.8具有至少90％同源性，优选地具有至少95％同源性，更有优选地具有至少98％同源性：SQVTLRESGPGLVRPSQTLSLTCTVSGGSIDSGGHYWSWIRQHPGKGLEWIGSIYHSGNTYYNPSLKSRVTMSVDTSKNQFSLKLTSVTAADTAIYYCARDIPHYFEPAYWGQGTLVTVSS；轻链可变区ScFv
‑
VL的氨基酸序列与以下SEQ ID NO.9具有至少90％同源性，优选地具有至少95％同源性，更有优选地具有至少98％同源性：QSALTQPASASGSPGQSVTISCTGTSSDVGGYNYVSWYQQHPGKAPKLMIYEVSNRPSGVSNRFSGSKSGNTASLTISGLQAEDEADYYCAIWHSSAWVFGGGTKLTVLG。2.根据权利要求1所述的靶向BCMA嵌合抗原受体，其特征在于，该受体包括人源靶向BCMA的ScFv结构为ScFv
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VH
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(G4S)n
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ScFv
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VL，其中n为大于等于1的整数，优选地为3或4。3.根据权利要求1所述的靶向BCMA嵌合抗原受体，其特征在于，该受体包括人源靶向BCMA的ScFv结构为ScFv
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VH
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(G4S)3
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ScFv
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VL，重链可变区ScFv
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VH的氨基酸序列为SEQ ID NO.8；轻链可变区ScFv
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VL的氨基酸序列为SEQ ID NO.9。4.根据权利要求1所述的靶向BCMA嵌合抗原受体，其特征在于，该受体包括人源靶向BCMA的ScFv结构为ScFv
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VH
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(G4S)n
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ScFv...

【专利技术属性】
技术研发人员：王建勋，李晓瑞，冯娅茹，尚凤琴，余卓营，宋志茹，童建松，刘颖，
申请(专利权)人：深圳细胞谷生物医药有限公司，
类型：发明
国别省市：