心血管事件风险预测制造技术

提供了用于评定患有射血分数保留的心力衰竭(HFpEF)或患有射血分数降低的心力衰竭(HFrEF)的个体以预测在90天、180天或1年时间段内发生心血管(CV)事件的风险的生物标志物、方法、装置、试剂、系统和试剂盒。系统和试剂盒。系统和试剂盒。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】心血管事件风险预测
专利

[0001]本申请总体涉及生物标志物的检测以及一种评估患有慢性心力衰竭的个体体内未来心血管事件的风险的方法，并且更具体地涉及用于评定个体以预测发生心血管(CV)事件的风险的一种或多种生物标志物、方法、装置、试剂、系统和试剂盒。此类事件包括但不限于住院治疗和死亡。

技术介绍

[0002]心血管疾病是美国的死亡主因。存在原发性事件(D
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Agostino,R等人，―General Cardiovascular Risk Profile for Use in Primary Care:The Framingham Heart Study”Circulation 117:743
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53(2008)；以及Ridker,P.等人，―Development and Validation of Improved Algorithms for the Assessment of Global Cardiovascular Risk in Women”JAMA 297(6):611
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619(2007))以及继发性事件(Shlipak,M.等人，―Biomarkers to Predict Recurrent Cardiovascular Disease:The Heart&Soul Study”Am.J.Med.121:50
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57(2008))风险的许多现有和重要的预测物，所述预测物广泛用于临床实践和治疗试验中。不幸的是，接受者操作特征曲线、危险比和一致性显示出现有风险因素和生物标志物的表现是适度的(约0.75的AUC表示这些因素的表现仅介于抛硬币与无比精确中间)。除了提高诊断性能的需求之外，还需要在个体内对有益(和破坏性)干预和生活方式改变作出近期和个人反应的风险产品。常用的Framingham方程具有三个主要问题。首先，它的期限太长：它给出了10年风险计算，但人类并不重视未来风险，并且不愿意基于这些未来风险而作出行为和生活方式改变。其次，它对干预反应不大：它最主要取决于实足年龄(其无法降低)；以及性别(其无法改变)。第三，在此处设想的高风险群体内，Framingham因素无法很好地区分高风险和低风险：高四分位数与低四分位数之间的危险比仅为2，并且当人们试图使用Framingham评分来通过将受试者分层为更细化的层(例如，十分位数)而使风险个性化时，观察到的事件率对于许多十分位数而言是类似的。
[0003]心血管疾病的风险因素广泛用于推进医学治疗的强度和性质，并且它们的使用无疑已经促成了在过去二十年内已经观察到的心血管发病率和死亡率的降低。这些因素常规上已经被组合到算法中，但不幸的是，它们并未捕捉到所有风险(心脏病的最常见的首发症状仍是死亡)。事实上，它们可能仅捕捉到一半风险。在一级预防中，约0.76的ROC曲线下面积对于此类风险因素是典型的，而在二级预防中表现更为糟糕(典型为0.62)，数值仅为抛硬币的0.5与无比精确的1.0之间的约四分之一到一半的表现。
[0004]此外，在有3209个人的Framingham研究(Wang等人，―Multiple Biomarkers for the Prediction of First Major Cardiovascular Events and Death”N.Eng.J.Med.355:2631
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2637(2006))中，添加10种生物标志物(CRP、BNP、NT
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BNP前体、醛固酮、肾素、纤维蛋白原、D
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二聚体、1型纤溶酶原激活剂抑制物、高半胱氨酸和尿白蛋白与肌酐比)在加上现有风险因素时并未显著地改进AUC：在年龄、性别和常规风险因素下，0至5年事件的AUC为0.76，并且将生物标志物的最佳组合添加到混合物的情况下为0.77，并且在二
级预防中，情况更为糟糕。
[0005]对在1年窗口内具有心血管事件的较高风险的患者的早期鉴别是重要的，因为对具有升高风险的个体的更积极的治疗可改进结果。因此，最佳管理需要积极干预以降低被视为具有较高风险的那些患者体内发生心血管事件的风险，而具有心血管事件的较低风险的患者可接受备用的昂贵的且潜在具有侵害性的治疗，所述治疗对患者而言可能不具有有益效果。
[0006]用于预测在限定的时间段内具有特定疾病状态或疾患的风险的生物标志物选择涉及首先鉴别用于特定医学应用的标志物，所述标志物与事件的概率和/或时机具有可测量且统计上显著的关系。生物标志物可包括分泌或脱落的分子，所述分子处于所关注的疾患的因果关系中，或者处于疾病或疾患发展或进展的下游阶段或与疾病或疾患发展或进展并行，或者两者兼有。所述分子响应于容易发生心血管事件的生物过程而释放到来自心血管组织或来自其他器官以及周围组织和循环细胞的血流中，或者它们可反映病理生理学的下游效应，诸如肾功能的下降。生物标志物可包括小分子、肽、蛋白质和核酸。影响生物标志物的鉴别的一些关键问题包括可用数据的过拟合和数据的偏差。
[0007]各种方法已经被用于鉴别生物标志物和诊断或预测具有疾病或疾患的风险的尝试中。对于基于蛋白质的标志物，这些方法包括双向电泳、质谱法和免疫测定方法。对于核酸标志物，这些方法包括mRNA表达谱、微小RNA谱、FISH、基因表达系列分析(SAGE)、大规模基因表达阵列、基因测序和基因分型(SNP或小变体分析)。
[0008]双向电泳的效用受限于低检测灵敏度；关于蛋白质溶解度、电荷和疏水性的问题；凝胶再现性；以及单个斑点代表多种蛋白质的可能性。对于质谱法，取决于所使用的形式，局限性围绕样品处理和分离、对低丰度蛋白质的灵敏度、信噪比考虑因素和立即鉴别检测到的蛋白质的无能性展开。关于生物标志物发现的免疫测定方法的局限性集中于基于抗体的多重测定法测量大量分析物的无能性。人们可能简单地印刷高质量抗体的阵列，并且在没有夹心的情况下测量结合到这些抗体的分析物。(这将是使用核酸序列的全基因组来通过杂交测量生物体或细胞中的所有DNA或RNA序列的等效形式。由于杂交可为针对同一性的严格测试，因此杂交实验发挥了作用。)然而，即使非常良好的抗体在选择其结合配偶体时通常也不够严格以在血液或甚至细胞提取物的背景下发挥作用，因为在这些基质中的蛋白质集合具有非常不同的丰度，这可能会导致较差的信噪比。因此，人们必须使用与关于生物标志物发现的基于免疫测定的方法不同的方法
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人们将需要使用多重ELISA测定(即，夹心)以获得足够的严格性来同时测量许多分析物，以决定哪些分析物确实是生物标志物。夹心免疫测定法无法按比例扩展到高含量，并且因此使用严格的夹心免疫测定法的生物标志物发现使用标准阵列形式是不可行的。最后，抗体试剂具有大量批次可变性和试剂不稳定性的缺点。用于蛋白质生物标志物发现的即时平台克服了这个问题。
[0009]这些方法中的许多方法依赖或要求在分析之前进行一些类型的样品分级。因此，进行足够有力的研究所需的样品制备是非本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】1.一种用于为受试者筛选心血管事件(CV)事件的风险的方法，所述方法包括：形成具有N种生物标志物蛋白质的生物标志物组；以及检测来自所述受试者的样品中所述N种生物标志物蛋白质中的每一者的水平，其中N至少为2，并且其中a)所述N种生物标志物蛋白质中的至少两者选自HCC
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1、RNAS6、PAP1、SVEP1和ATL2；或b)所述N种生物标志物蛋白质中的至少一者选自HCC
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1、RNAS6、PAP1、SVEP1和ATL2，并且所述N种生物标志物蛋白质中的至少一者选自N端BNP前体、RSPO4、BNP、MIC
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1、FABPA、ILRL1、ANGP2、HE4、TAGL、RNAS1和TSP2。2.一种预测受试者将具有CV事件的可能性的方法，所述方法包括：形成具有N种生物标志物蛋白质的生物标志物组；以及检测来自所述受试者的样品中所述N种生物标志物蛋白质中的每一者的水平，其中N至少为2，并且其中a)所述N种生物标志物蛋白质中的至少两者选自HCC
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1、RNAS6、PAP1、SVEP1和ATL2；或b)所述N种生物标志物蛋白质中的至少一者选自HCC
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1、RNAS6、PAP1、SVEP1和ATL2，并且所述N种生物标志物蛋白质中的至少一者选自N端BNP前体、RSPO4、BNP、MIC
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1、FABPA、ILRL1、ANGP2、HE4、TAGL、RNAS1和TSP2。3.如权利要求1或权利要求2所述的方法，其中所述N种生物标志物蛋白质中的至少两者是RNAS6和PAP1。4.如权利要求1或权利要求2所述的方法，其中所述N种生物标志物蛋白质中的至少两者是RNAS6和ATL2。5.如权利要求1或权利要求2所述的方法，其中所述N种生物标志物蛋白质中的至少两者是HCC
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1和PAP1。6.如权利要求1或权利要求2所述的方法，其中所述N种生物标志物蛋白质中的至少两者是HCC
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1和ATL2。7.如权利要求1或权利要求2所述的方法，其中所述N种生物标志物蛋白质中的至少两者是HCC
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1和RNAS6。8.如权利要求1或权利要求2所述的方法，其中所述N种生物标志物蛋白质中的至少两者是PAP1和SVEP1。9.如权利要求1或权利要求2所述的方法，其中所述N种生物标志物蛋白质中的至少两者是HCC
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1和SVEP1。10.如权利要求1或权利要求2所述的方法，其中所述N种生物标志物蛋白质中的至少两者是RNAS6和SVEP1。11.如权利要求1或权利要求2所述的方法，其中所述N种生物标志物蛋白质中的至少两者是PAP1和ATL2。12.如权利要求1至11中任一项所述的方法，其中所述N种生物标志物蛋白质全部选自HCC
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1、RNAS6、PAP1、SVEP1、ATL2、N端BNP前体、RSPO4、BNP、MIC
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1、FABPA、ILRL1、ANGP2、HE4、TAGL、RNAS1和TSP2。13.如权利要求1至12中任一项所述的方法，其中所述N种生物标志物蛋白质中的一者是MIC
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1。14.如权利要求1至13中任一项所述的方法，其中所述N种生物标志物蛋白质中的一者是RNAS1。15.如权利要求1至14中任一项所述的方法，其中N为2，N为3，N为4，N为5，N为6，N为7，N为8，N为9，N为10，N为11，N为12，N为13，N为14，N为15，或N为16。
16.如权利要求1至15中任一项所述的方法，其中所述受试者患有射血分数降低的心力衰竭。17.一种用于为受试者筛选心血管事件(CV)事件的风险的方法，所述方法包括：形成具有N种生物标志物蛋白质的生物标志物组；以及检测来自所述受试者的样品中所述N种生物标志物蛋白质中的每一者的水平，其中N至少为2，其中所述N种生物标志物蛋白质中的至少一者选自RET和CRDL1，并且所述N种生物标志物蛋白质中的至少一者选自四连接素、N端BNP前体、TNNT2、CA125、MIC
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1、SLPI、HE4、MMP
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12、HSPB6、WISP
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2、GHR和IGFBP
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2。18.一种预测受试者将具有CV事件的可能性的方法，所述方法包括：形成具有N种生物标志物蛋白质的生物标志物组；以及检测来自所述受试者的样品中所述N种生物标志物蛋白质中的每一者的水平，其中N至少为2，其中所述N种生物标志物蛋白质中的至少一者选自RET和CRDL1，并且所述N种生物标志物蛋白质中的至少一者选自四连接素、N端BNP前体、TNNT2、CA125、MIC
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1、SLPI、HE4、MMP
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12、HSPB6、WISP
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2、GHR和IGFBP
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2。19.如权利要求17或权利要求18所述的方法，其中所述N种生物标志物蛋白质中的至少两者是RET和CRDL1。20.如权利要求17至19中任一项所述的方法，其中所述N种生物标志物蛋白质中的一者是MIC
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1。21.如权利要求17至20中任一项所述的方法，其中所述N种生物标志物蛋白质中的一者是HE4。22.如权利要求17至21中任一项所述的方法，其中所述N种生物标志物蛋白质中的一者是四连接素。23.如权利要求17至22中任一项所述的方法，其中所述N种生物标志物蛋白质中的一者是GHR。24.如权利要求17至23中任一项所述的方法，其中所述N种生物标志物蛋白质中的一者是CA125。25.如权利要求17至24中任一项所述的方法，其中所述N种生物标志物蛋白质中的一者是N端BNP前体。26.如权利要求17至25中任一项所述的方法，其中所述N种生物标志物蛋白质中的一者是IGFBP
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2。27.如权利要求17至26中任一项所述的方法，其中所述N种生物标志物蛋白质中的一者是WISP
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2。28.如权利要求17至27中任一项所述的方法，其中所述N种生物标志物蛋白质中的一者是TNNT2。29.如权利要求17至28中任一项所述的方法，其中所述N种生物标志物蛋白质中的一者是HSPB6。30.如权利要求17至29中任一项所述的方法，其中所述N种生物标志物蛋白质中的一者是SLPI。31.如权利要求17至30中任一项所述的方法，其中所述N种生物标志物蛋白质中的一者是MMP
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12。32.如权利要求17至31中任一项所述的方法，其中所述N种生物标志物蛋白质全部选自
RET、CRDL1、四连接素、N端BNP前体、TNNT2、CA125、MIC
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1、SLPI、HE4、MMP
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12、HSPB6、WISP
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2、GHR和IGFBP
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2。33.如权利要求17至32中任一项所述的方法，其中N为2，N为3，N为4，N为5，N为6，N为7，N为8，N为9，N为10，N为11，N为12，N为13，或N为14。34.如权利要求17至33中任一项所述的方法，其中所述受试者患有射血分数保留的心力衰竭。35.如权利要求1至34中任一项所述的方法，其中所述CV事件是死亡。36.如权利要求1至35中任一项所述的方法，其中筛选或预测所述受试者在从所述受试者取得所述样品的日子算起的1年内具有CV事件的风险或可能性。37.如权利要求1至35中任一项所述的方法，其中筛选或预测所述受试者在从所述受试者取得所述样品的所述日子算起的180天内具有CV事件的所述风险或可能性。38.如权利要求1至35中任一项所述的方法，其中筛选或预测所述受试者在从所述受试者取得所述样品的所述日子算起的90天内具有CV事件的所述风险或可能性。39.如权利要求36至38中任一项所述的方法，其中如果所述N种生物标志物蛋白质中至少2种的每一者的水平相对于相应生物标志物蛋白...

【专利技术属性】
技术研发人员：劳拉，
申请(专利权)人：私募蛋白质体操作有限公司，
类型：发明
国别省市：