一种二鸟苷酸环化酶突变体、工程菌及其应用制造技术

本发明专利技术涉及生物合成技术领域，尤其是涉及一种二鸟苷酸环化酶突变体、工程菌及其应用。本发明专利技术中二鸟苷酸环化酶基因来源于皮下假热菌，其氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示，其核苷酸序列如SEQ ID NO.2所示；二鸟苷酸环化酶单突变体是在SEQ ID NO.1所示氨基酸序列第262、264、265、280位发生单突变获得的，所述双突变体是在SEQ ID NO.2所示氨基酸序列第262和264位、262和265位发生双突变获得的，其中筛选得到的262/264双突变体酶活是原始酶的4.12倍。本发明专利技术构建的二鸟苷酸环化酶突变体工程菌株，有效解决了产物抑制问题，实现了环二鸟苷酸的绿色生产。绿色生产。绿色生产。

【技术实现步骤摘要】
一种二鸟苷酸环化酶突变体、工程菌及其应用


[0001]本专利技术涉及生物合成
，尤其是涉及一种二鸟苷酸环化酶突变体、工程菌及其应用。

技术介绍

[0002]环二鸟苷酸(c
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GMP)是细菌中广泛存在的第二信使，参与调节多种生理功能，包括调控生物膜的形成，细菌运动性和影响毒力因子的形成等。Benziman等人在研究葡萄糖木质醋酸菌的纤维素生物合成途径时，最早发现c
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GMP这一物质，它对纤维素合成酶有着变构激活的功能[Ross P,Weinhouse H,Aloni Y,et al.Regulation of cellulose synthesis in Acetobacter xylinum by cyclic diguanylic acid[J].Nature,1987,325(6101):279
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281.]。c
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GMP是由2分子GTP缩合形成的环状二核苷酸，在细胞内其合成和降解代谢分本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种二鸟苷酸环化酶突变体，其特征在于，所述二鸟苷酸环化酶突变体包括由SEQ ID NO.1所示的氨基酸序列在第262、264、265、280位发生单突变得到的突变体，或，由SEQ ID NO.1所示的氨基酸序列在第262和264位、第262和265位发生双突变得到的突变体。2.根据权利要求1所述的一种二鸟苷酸环化酶突变体，其特征在于，由SEQ ID NO.1所示的氨基酸序列在第262位发生单突变具体为由第262位的精氨酸突变为苯丙氨酸、酪氨酸或苏氨酸；由SEQ ID NO.1所示的氨基酸序列在第264位发生单突变具体为由第264位的天冬酰胺突变为天冬氨酸、赖氨酸或甘氨酸；由SEQ ID NO.1所示的氨基酸序列在第265位发生单突变具体为由第265位的天冬氨酸突变为缬氨酸、色氨酸或精氨酸；由SEQ ID NO.1所示的氨基酸序列在第280位发生单突变具体为由第280位的酪氨酸突变为精氨酸。3.根据权利要求1所述的一种二鸟苷酸环化酶突变体，其特征在于，由SEQ ID NO.1所示的氨基酸序列在第262和264位发生双突变，具体为由第262位的精氨酸突变为精氨酸，以及第264位天冬酰胺突变为赖氨酸；由SEQ ID NO.1所示的氨基酸序列在第262和265位发生双突变，具体为由第262位的精氨酸突变为精氨酸，以及第265位天冬氨酸突...

【专利技术属性】
技术研发人员：任宇红，潘小旭，
申请(专利权)人：华东理工大学，
类型：发明
国别省市：